中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(HSY201205)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 相关作者：常玉梅唐然梁利群李世国李明云更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所上海海洋大学宁波大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鲤耐低温候选基因CcSCD全长cDNA的克隆及功能预测被引量：5
- 2012年
- 硬酯酰辅酶A脱氢酶(Stearoyl-CoA Desaturase,SCD)是参与脂肪酸脱氢反应的限速酶和关键酶,此酶编码基因SCD对增加膜磷脂的不饱和脂肪酸成分,提高细胞膜在低温下的流动性发挥重要作用,可能是抗寒过程中的关键基因成员。本研究采用cDNA末端快速扩增技术(Rapid Amplifications of cDNAEnds,RACE)克隆了鲤(Cyprinus carpio)脑组织CcSCD基因的全长cDNA序列,采用实时荧光定量PCR技术检测该基因在低温(6℃)和常温(23℃)条件下的转录表达差异,对其蛋白编码序列的结构和功能进行了预测分析。结果显示,CcSCD基因cDNA全长2618bp,包含一个由324个氨基酸残基组成的长度为975bp的阅读框(ORF);蛋白分子进化树显示鲤的SCD和草鱼(Ctenopharyngodon idella)的SCD蛋白同源性最高,相似性达88%;实时荧光定量结果表明,低温刺激下(6℃),CcSCD基因表达水平是常温条件下(23℃)的13.9倍,差异非常显著(P<0.01)。本研究旨在为今后构建表达载体,通过遗传操作等研究手段鉴定其抗寒功能奠定基础。
- 常玉梅徐丽华李世国唐然梁利群
- 关键词：荧光定量PCR
- Tgf2转座子多克隆位点的克隆与表达
- 2014年
- 以金鱼pTgf2-EF1α-EGFP转座子为基础,构建含有多克隆位点(Multiple cloning sites,MCS)序列以及外源目的基因肌醇-3-磷酸合成酶(Myo-inositol-3-phosphate synthase,MIPS)的重组表达载体并注射到斑马鱼1-2期受精卵,检测重组表达载体pTgf2-EF1α-MCS-EGFP和pTgf2-EF1α-MCS-MIPS-EGFP在斑马鱼中绿色荧光蛋白基因(EGFP)的表达情况以及外源基因MIPS在斑马鱼体内的整合情况。荧光观察结果显示,两个重组载体均不影响EGFP的表达,只是表达强度存在一定差异,表明对Tgf2转座子的改造是有效的。转基因斑马鱼PCR检测结果显示,靶基因MIPS的编码区能够完整地整合到斑马鱼基因组中,整合效率达31.4%。重组表达载体的成功构建显示金鱼Tgf2转座子可以介导外源基因在斑马鱼中的表达,为以后Tgf2转座子在鱼类基因功能研究方面奠定了基础。
- 陶然常玉梅梁利群唐然窦新杰王楠李明云
- 关键词：金鱼
- Tol2转座子的特性及其在转基因鱼类中的应用
- 2014年
- Tol2转座子是从青鳉(Oryzias latipes)中发现的唯一一个具有自主转座活性的转座子,是hAT转座子家族的一员。研究表明,Tol2在多种模式动植物中都有转座活性,如斑马鱼(Danio rerio)、小鼠、非洲爪蟾等,并已得到了广泛应用。本文综述了Tol2转座子的特性、转座机制以及其在斑马鱼、青鳉和罗非鱼等鱼类中的最新研究进展,以期为Tol2转座子在转基因养殖鱼类中的应用研究提供参考。
- 陶然常玉梅李世国唐然梁利群李明云
- 关键词：转座机制转基因鱼类
