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国家自然科学基金(30370944)

作品数：12 被引量：112H指数：7
相关作者：朱国念桂文君王春梅刘毅华金仁耀更多>>
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相关领域：农业科学医药卫生理学化学工程更多>>

文献类型

  • 12篇中文期刊文章

领域

  • 4篇农业科学
  • 3篇医药卫生
  • 2篇化学工程
  • 2篇理学
  • 1篇轻工技术与工...
  • 1篇环境科学与工...

主题

  • 6篇ELISA
  • 5篇免疫
  • 5篇抗体
  • 5篇克隆
  • 4篇抗原
  • 3篇多克隆
  • 3篇多克隆抗体
  • 3篇农药
  • 3篇酶联免疫吸附
  • 2篇单克隆
  • 2篇单克隆抗体
  • 2篇毒死蜱
  • 2篇三唑磷
  • 2篇试剂
  • 2篇试剂盒
  • 2篇人工抗原
  • 2篇氯霉素
  • 2篇酶联
  • 2篇酶联免疫
  • 2篇酶联免疫吸附...

机构

  • 11篇浙江大学
  • 1篇生物技术有限...

作者

  • 11篇朱国念
  • 8篇桂文君
  • 4篇王春梅
  • 3篇刘毅华
  • 3篇金仁耀
  • 2篇程敬丽
  • 2篇黄雅丽
  • 2篇王姝婷
  • 2篇梁赤周
  • 2篇吴建祥
  • 1篇郑尊涛
  • 1篇李贤宾
  • 1篇陈则利
  • 1篇郭逸蓉
  • 1篇寿林飞
  • 1篇毕金程

传媒

  • 5篇农药学学报
  • 2篇浙江大学学报...
  • 2篇中国食品学报
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇农业环境科学...
  • 1篇Agricu...

年份

  • 3篇2008
  • 3篇2007
  • 5篇2006
  • 1篇2005
共 12 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
Synthesis and Identification of Artificial Antigen for Imidacloprid被引量：18
2006年
This study reported that a hapten of imidacloprid, 1-[（6-Carboxylethylthio-3- pyridinyl）methyl]-N -nitro-imidazolidinimine was synthesized using technical material of imidacloprid to react with 3-mercaptopropionic acid in hot alkaline solution. The hapten was conjugated to bovine serum albumin （BSA） and ovalbumin （OVA） to form the immuno-antigens and the coating antigen, respectively. The antibody with high titer （2.56 × 10^4） was obtained after immuning rabbits. The results showed that the antibody had a high affinity to imidacloprid tested by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）, which IC50 and IC20 were 20.7 and 1.1 μg L^-1; and the cross reactibilities to those compounds related with imidacloprid were less than 1.4%.
ZHU Guo-nianGUI Wen-junZHENG Zun-taoCHENG Jing-liWU Gang
关键词：IMIDACLOPRIDANTIBODY
分子模拟在农药半抗原设计及其免疫识别机制中的应用被引量：14
2007年
免疫半抗原的分子设计与合成是建立小分子免疫化学分析方法的关键步骤。在介绍农药半抗原设计一般策略的基础上,指出分子模拟技术在农药半抗原合理设计中的适用性在于其能通过对分子结构和动力学行为的模拟,获得能表示和解释农药分子免疫原性和生物活性的参数。重点阐述了分子模拟在免疫原和竞争原设计中的应用,揭示了采用分子模拟技术进行半抗原设计的优势在于其能够克服目前半抗原设计方法的经验性和主观随意性。运用分子模拟技术能够更好地研究抗原抗体反应中的分子间作用力,因此该技术有利于促进抗原抗体反应识别机制研究的深入进行。分子模拟技术还能够应用于解释抗体的交叉反应率,从而能应用于提高抗体宽谱性研究。
刘毅华朱国念桂文君
关键词：分子模拟农药半抗原免疫分析
吡虫啉人工抗原的合成与鉴定被引量：18
2005年
以吡虫啉原药与β-巯基丙酸为起始原料,在碱性条件下反应,合成了半抗原{1-[6-(2-羧基乙硫基)-3-吡啶基甲基]-N-硝基亚咪唑烷-2-叉胺}。利用该半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联得到了人工抗原,经免疫动物后,获得了高效价的特异性多克隆抗体,抗血清效价为 2.56×104。经酶联免疫反应(ELISA)测定,吡虫啉对抗体的抑制中浓度(IC50)为 20.7 μg·L-1,最低检测限(IC20 )为 1.1 μg·L-1,检测范围在 1～1 000 μg·L-1内线性关系较好,吡虫啉结构类似物交叉反应率均小于 1.4%。
朱国念桂文君郑尊涛程敬丽吴刚
关键词：效价酶联免疫反应ELISA吡虫啉人工抗原免疫动物
三唑磷残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研制及应用被引量：14
2008年
采用包被多克隆抗体直接竞争ELISA法研制一种检测水样、蔬菜和粮食样品中三唑磷残留的酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒。将不同浓度的三唑磷添加到水样、蔬菜和粮食样品中,用制备的试剂盒检测三唑磷残留并用气相色谱分析法(GC)进行验证,结果样品的加标回收率在65%～125%之间,变异系数<15%。对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定,结果表明:研制的试剂盒最低检测限为4.13ng/mL,线性检测范围3.9～500ng/mL;在4℃或-20℃条件下试剂盒有效期可达6个月。用ELISA试剂盒检测三唑磷残留具有可批量分析样品,快速、简便、灵敏、经济的特点,可广泛应用于环境监测和安全食品的生产。
梁赤周桂文君朱国念
关键词：三唑磷酶联免疫吸附测定法试剂盒
氯霉素多克隆抗体的制备及免疫活性研究被引量：16
2006年
为建立氯霉素的免疫分析方法，由氯霉素原药与丁二酸酐反应合成了氯霉素两种半抗原（CAP-HS1、CAP-HS2），分别纯化后经质谱法（MS）分析鉴定结构．纯化的半抗原与牛血清蛋白（BSA）以碳二亚胺法偶联得到人工抗原．将免疫抗原分别免疫免子获得了相应抗体．当包被抗原的浓度为10μg·mL^-1时，抗CAP-HS1和CAP-HS2的冻干粉效价分别为8．39×10^6和6．55×10^4（OD490nm=1．0）．研究了抗原抗体反应的亲和力和竞争抑制能力，其中抗CAP-HS1抗体适合免疫分析，检测线性范围为0．2～100ng·mL^-1，最低检测限IC20为0．239ng·mL^-1，抗CAP-HS1抗体对各类似物如甲砜霉素、氟甲砜霉素的交叉反应率分别为0．025％和0．166％，对其他类抗生素的交叉反应率〈2×10^-5．
黄雅丽程敬丽桂文君朱国念
关键词：氯霉素人工抗原抗体ELISA
毒死蜱多克隆抗体的制备被引量：10
2006年
以三氯硫磷为起始原料，经三步反应合成得到毒死蜱半抗原O-乙基O-（3，5，6-三氯-2-吡啶基）N-（3-羧丙基）硫逐磷酸胺（简称CHBu），此半抗原分别与牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）用碳二亚胺法和混合酸酐法通过偶联反应得到免疫抗原和包被抗原，其结合比分别为14．6：1和6．2：1。用所得的免疫原免疫兔子获得了高效价（抗血清：2．56×10^4；冻干粉：2．56×10^6）、高亲和性、特异性好的多克隆抗体。交叉反应试验表明，该抗体与毒死蜱各结构类似物交叉反应率均小于4％；亲和性试验表明，在1-500ng／mL浓度范围内，抑制率与浓度呈线性关系，线性回归方程为Y=23．503lg（x）＋28．556，r=0．9919，抑制中浓度I50=8．2ng／mL，最低检测限为1．0ng／mL。
桂文君金仁耀黄雅丽朱国念
关键词：毒死蜱半抗原多克隆抗体
抗毒死蜱单克隆抗体的研制被引量：6
2006年
用与牛血清蛋白(BSA)交联的毒死蜱人工抗原(CHBu-BSA)免疫的BALB/C鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌毒死蜱抗体的单克隆细胞株(1G10),1G10的抗体类型及亚类均为IgG1,其轻链为κ链.制备单克隆抗体腹水,腹水的间接ELISA效价在1×10-6以上.该单克隆抗体与毒死蜱特异性结合反应的50%抑制质量浓度为80.8μg?L-1,与其他毒死蜱结构类似物无交叉反应.
金仁耀桂文君吴建祥王春梅朱国念
关键词：毒死蜱单克隆抗体ELISA
均匀设计在ELISA分析方法条件优化实验中的应用被引量：3
2008年
以对硫磷为对象,通过与常规方法相比较,对均匀设计法在ELISA分析方法条件优化实验中应用的适用性进行了研究。采用常规方法对对硫磷ELISA分析方法条件优化的结果为:甲醇体积分数为5%,离子强度0.50mol/L和pH7.40,此时建立的ELISA方法IC50值为89.17ng/mL,IC20值为12.49ng/mL。而采用均匀设计法对对硫磷ELISA分析方法条件进行优化,并对实验结果进行多元二项式统计回归,预测了最佳条件组合的取值,并进行了ELISA实验验证,结果表明:当甲醇体积分数为10%、离子强度为2.00mol/L、pH为5.00时,建立的ELISA方法的IC50值为9.96ng/mL,IC20值为1.21ng/mL。将两种方法应用于5种性质不同的环境土壤中对硫磷的检测,结果表明,采用均匀设计法进行ELISA分析方法条件优化实验快速简便,能够筛选得到最优条件组合,建立的ELISA方法具有更好的广谱性,能够更广泛地应用于基质差异较大的同类样品检测。
王春梅刘毅华李贤宾黄国洋朱国念
关键词：ELISA均匀设计农药土壤
对硫磷ELISA异源分析模式比较研究被引量：7
2008年
为探讨方法模式对异源ELISA法各分析参数的影响情况及影响机理,设计并合成了4种与对硫磷结构相似的竞争半抗原,通过建立不同模式的同源与异源ELISA分析法,比较了不同模式下的抗原抗体用量、灵敏度、检测限及不同样品添加回收率。结果表明,异源分析对抗原和抗体的用量比同源分析有所增加,但异源分析可大大提高方法的检测灵敏度。在异源分析中,直接竞争包被抗原的ELISA(CC模式)方法重现性较差;直接竞争包被抗体的ELISA(AC模式)抗原抗体用量最多,检测灵敏度较低;间接竞争ELISA法(IC模式)具有较好的检测灵敏度,抗环境和基质干扰的能力较强,为异源ELISA分析中较优的模式。
刘毅华王春梅毕金程黄国洋朱国念
关键词：对硫磷ELISA农药残留
氯霉素ELISA检测试剂盒的研制及其性能测试被引量：9
2007年
采用包被多克隆抗体直接竞争ELISA法建立了氯霉素残留的酶联免疫分析方法,并构建了氯霉素残留ELISA检测试剂盒。研究结果表明,所选用的抗体对氯霉素亲合力强、特异性高,试剂盒对氯霉素残留检测的线性范围为0.24～250ng/mL,检测限(IC10)0.47ng/mL,样品的加标回收率70%～130%。试剂盒性能测试结果表明,其准确性和重现性较好,保存期至少6个月,可用于虾肉、鸡肉、蜂蜜、鲜奶样品中氯霉素残留的批量快速、廉价检测。
郭逸蓉桂文君王姝婷朱国念
关键词：氯霉素酶联免疫吸附分析试剂盒
全选 清除 导出
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