国家自然科学基金(30370987)
- 作品数：31 被引量：257H指数：11
- 相关作者：章镇渠慎春陶建敏乔玉山姚泉洪更多>>
- 相关机构：南京农业大学上海市农业科学院苏州农业职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省科技基础设施建设计划项目广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 苹果铁结合蛋白基因的克隆及表达特性被引量：5
- 2006年
- 根据已报道的植物铁结合蛋白基因(ferritin)的保守区域设计引物,用RT-PCR的方法从‘嘎拉’苹果叶片中获得铁结合蛋白基因的全长序列。该基因cDNA共有1043个碱基,其中编码区834bp,编码277个氨基酸残基的蛋白质,终止密码子后有209bp左右的3’端尾随序列区。Southern杂交结果显示ferritin基因在‘嘎拉’苹果基因组中至少有7个拷贝存在。0·5mmol·L-1的柠檬酸铁处理‘嘎拉’苹果试管苗不同时间后的定量RT-PCR分析表明,‘嘎拉’苹果的铁结合蛋白基因随着诱导时间的延长表达量增加,说明该基因可能在转录水平上受铁诱导表达。
- 叶霞陶建敏蔡斌华章镇
- 关键词：苹果克隆
- 雪蜜草莓不定芽离体再生技术被引量：2
- 2008年
- 王媛花佟兆国乔玉山王壮伟章镇
- 关键词：草莓不定芽
- 农杆菌介导菜豆铁结合蛋白基因(PvFer)转化番茄的研究被引量：4
- 2007年
- 利用农杆菌介导的转化方法将菜豆铁结合蛋白基因(PvFer)导入'粉红908'番茄基因组中。经PCR、PCR-Southern、Southern blotting检测证实,外源基因已整合到2株番茄基因组中。半定量式RT-PCR检测表明,外源菜豆铁结合蛋白基因在2株转基因植株中得到了表达。测定番茄果实和叶片中铁、锌、锰含量表明,转ferritin基因株系T1的叶片铁含量提高了174%,果实中的铁含量提高了37%,锌在果实中提高了119%,而锰在果实中的含量却降低了56%。
- 叶霞黄晓德姚泉洪章镇
- 关键词：番茄铁蛋白基因根癌农杆菌
- 核果类果树ITS序列分子进化及系统发育关系研究被引量：28
- 2010年
- 为研究核果类果树的进化和系统发育,选择桃、李、梅、杏、樱桃各2～4个主要种或变种共16个基因型测定其ITS序列,与从GenBank下载的6个核果类果树ITS序列形成了较为全面的数据矩阵。采用二次置根法用樱桃置根,用PAUP软件计算数据集在56个进化模型的得分,Modeltest筛选最佳模型和参数,计算遗传距离、变异,用最大简约法构建了桃、李、梅、杏、樱桃的系统发育树。结果表明:1.核果类果树各组ITS1和ITS2的分子进化速率不同,信息量也不同;2.核果类果树演化顺序为:共同的原始材料分化成樱桃、李、杏,再由李进化产生桃,杏进化产生梅;3.辽杏较普通杏和西伯利亚杏原始,桃演化顺序是:巴旦杏—山桃—普通桃、新疆桃;4.本结果支持将核果类果树分成4个亚属。
- 王化坤陶建敏渠慎春房经贵马瑞娟章镇娄晓鸣
- 关键词：核果类系统发育ITS分子进化
- 小黄李的离体快速繁殖被引量：1
- 2006年
- 乔玉山许宽勇章镇丁治国李晓燕
- 关键词：离体快速繁殖植物名称腋芽植株成龄
- 超声波辅助农杆菌介导八棱海棠转rolC基因被引量：11
- 2006年
- 应用超声波辅助农杆菌介导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,以期提高转化效率并获得转基因植株。利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理时期和农杆菌悬浮液中乙酰丁香酮(As)浓度对rolC基因转化率的影响。结果表明,叶盘在D600nm为0．6且含有75 mg／L As的农杆菌悬浮液中侵染2 min后,用功率为100 W的超声波处理30 s,再浸泡2．5 min,然后放到再生培养基上共培养3 d,能获得最佳的gus基因瞬间表达率。最佳处理条件下转化683枚八棱海棠叶片,共得到138个抗性愈伤组织和15株抗性苗,转化率为2．2％。GUS染色、PCR及Southern blotting检测结果显示,有12个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。
- 丛郁王三红王红霞姚泉洪章镇
- 关键词：八棱海棠ROLC基因
- 通过农杆菌介导将番茄铁转运蛋白基因导入八棱海棠(英文)被引量：15
- 2005年
- 用农杆菌介导法,成功地将番茄铁转运蛋白基因导入了苹果砧木八棱海棠。获得了19个卡那霉素抗性株系,其中有11个株系经PCR鉴定为阳性。Southern杂交结果显示:有9个转基因株系基因组中整合了完整的目的基因。选择其中含有单拷贝和3个拷贝目的基因的各一个株系进行水培试验,结果表明整合了单拷贝目的基因的转基因株系表现出较强的抗缺铁胁迫能力,5周后其植株的鲜重比对照高21%￣34%。
- 渠慎春黄晓得章镇姚泉洪陶建敏乔玉山张君毅
- 关键词：八棱海棠农杆菌
- 香蕉凝集素基因双启动子表达被引量：3
- 2008年
- 为了获得香蕉果实特异表达的强启动子,利用PCR方法将2个凝集素(BanLec)基因启动子串联在一起,置换植物表达载体pBI121上的35S启动子,构建BanLec基因双启动子携带gus植物表达载体pBIL3,用基因枪转化香蕉叶片、根系和果实薄片,瞬时表达结果显示BanLec基因串连的双启动子依然表现为果实特异性表达,而且表达量明显高于BanLec基因单启动子及35S启动子,证明该串连的双启动子是一个在香蕉果实中特异表达且表达量较高的强启动子。
- 张建斌赵静黎耀平金志强徐碧玉
- 关键词：香蕉凝集素基因双启动子
- 叶绿体微卫星在植物种质资源研究中的应用被引量：37
- 2006年
- 叶绿体微卫星(chloroplastsimplesequencerepeat,cpSSR)是近年来发展起来的一种新型高效的分子标记技术,由于具有微卫星标记共显性、高多态性、分布广泛性等优点又兼顾到叶绿体基因组结构简单、相对保守、单亲遗传等特点,目前广泛用于植物群体遗传分析及系统发育分析研究,在更高分类水平和自然植物群体间基因漂移研究上特别有用。本文就cpSSR分析技术的原理、特点、引物开发等方面进行了介绍,并针对其在群体遗传结构、基因流动进化、物种演化、胞质遗传特性、种群分类等方面的研究进展进行了综述,并据此提出问题和展望。
- 王化坤娄晓鸣章镇
- 关键词：分子标记
- 重组腺病毒突变型人低氧诱导因子1α调节细胞周期的分子机制被引量：4
- 2008年
- 背景:目前研究显示低氧诱导因子1α可诱导细胞周期停滞,但其机制尚不清楚。目的:研究重组腺病毒突变型人低氧诱导因子1α(Ad-HIF-1α-Ala564-Ala803)调节细胞周期的分子机制。设计、时间及地点:对照实验,于2007-03/12在南方医科大学中医实验中心完成。材料:人结肠腺癌细胞株LoVo细胞由南方医院消化内科实验室提供;重组腺病毒Ad-HIF-1α-Ala564-Ala803和对照病毒Ad-lacZ载体为自行构建。方法:将重组腺病毒Ad-HIF-1α-Ala564-Ala803和对照病毒Ad-lacZ在HEK293A细胞中扩增,测定病毒滴度,然后在常氧下以感染复数10,20,30,40,50,60,70,80,90,100感染LoVo细胞。主要观察指标:X-gal染色检测重组腺病毒对LoVo细胞的感染效率;荧光定量PCR检测不同时间点低氧诱导因子1α与p21WAF1/CIP1的mRNA表达水平;MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果:①重组腺病毒扩增后能获得较高的滴度,在LoVo细胞中具有很高的感染效率,感染效率与感染复数成量效关系,当感染复数为60时,感染效率为90%以上。②随低氧诱导因子1α表达的增高,p21WAF1/CIP1的表达也相应增高,两者存在正相关(r=0.945,P<0.05)。③与对照病毒相比,重组腺病毒感染后LoVo细胞增殖轻度受抑;细胞周期示G1期细胞明显增加,S期的细胞显著减少(P<0.05)。结论:①重组腺病毒载体介导的人HIF-1α-Ala564-Ala803基因可有效地转染LoVo细胞并成一定的量效关系。②低氧诱导因子1α在细胞周期的调节中发挥重要的作用,可能通过上调p21WAF1/CIP1的表达,诱导细胞周期停滞于G1期。
- 韦莉莉王月刚陈娓唐其东赖艳娴胡英芳吴平生
- 关键词：腺病毒HIF-1ΑP21WAF1/CIP1
