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蛋白酶体抑制剂对白血病细胞系细胞周期的影响被引量：6: 2002年; 近年来的研究显示蛋白酶体抑制剂可诱导多种人肿瘤细胞系的凋亡 ,机制之一是其对细胞周期的影响。本实验就蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO对白血病细胞系M 0 7e、TF 1、HL 60细胞周期的影响进行了初步研究。应用MTT法显示Z LLL CHO对三株白血病细胞系呈不同程度的细胞杀伤效应。流式细胞仪检测显示应用 2 .5 μmol LZ LLL CHO 8h后可使G2 M期细胞比例增加 ,此种效应在S +G2 M期比例最高的HL 60中最为显著。对凋亡峰的考察发现 ,Z LLL CHO作用后可使细胞凋亡峰的比例增加 ,但与其对细胞周期的影响程度无明显相关性。上述结果提示蛋白酶体抑制剂作用后可使白血病细胞系G2 M期细胞比例增加 ,细胞对其诱导凋亡的敏感性与细胞周期受影响的程度无明显相关性 ,提示其他的相关机制参与了蛋白酶体抑制剂诱导白血病细胞凋亡的调控。; 兰雨张学敏杨平地胡美茹杨怡沈倍奋; 关键词：蛋白酶体抑制剂白血病细胞系细胞凋亡细胞周期

应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱源后衰变技术鉴定蛋白质被引量：2: 2004年; 目的　应用源后衰变 (PSD)技术结合数据库检索鉴定二维蛋白质电泳 (2DE)胶上的蛋白质斑点。方法用已知多肽 (ACTH) 1839肽段和TPA被胰酶降解后的 1个肽段建立了PSD MALDI TOF MS方法。结果　应用已建立的PSD MALDI TOF MS法分别将 2DE分离后胶上的 2个未知蛋白质斑点鉴定为 4 0S核糖体蛋白S12和dnaK抑制蛋白。; 王杰杨松成吴胜明王红霞魏开华张学敏; 关键词：蛋白质肽质量指纹谱

蛋白酶体抑制剂对正常骨髓单个核细胞的影响被引量：1: 2001年; 兰雨张学敏杨平地胡美茹杨怡沈倍奋; 关键词：蛋白酶体抑制剂骨髓单个核细胞白血病抗肿瘤药

MassPREP^(TM)全自动酶切仪及在蛋白质组学研究中的应用: 2002年; 介绍了MassPREPTM自动酶切仪的结构和功能 ,并取标准蛋白和肺鳞癌组织样品的一维和二维电泳斑点进行了自动酶切 ,系统的灵敏度为 10ng。讨论了本技术在蛋白质组学研究中的应用。; 王鸿丽薛燕王杰吴胜明赵晓光魏开华张学敏; 关键词：蛋白质组学牛血清白蛋白

蛋白质组学研究中的一些问题被引量：5: 2002年; 当前生命科学在研究方法上面临着巨大的技术和理论的挑战 ,即如何从结构、功能和生物学过程调控的角度解释一个物种基因序列中所含的信息。这个问题的关键是研判一个未知基因的功能与其他基因产物及其亚细胞结构之间的功能联系 ,不能只通过对核酸一级结构的检测来确定。; 张学敏; 关键词：蛋白质蛋白质组学生物质谱

部分结构特殊多肽的纳升电喷雾串联质谱测序分析被引量：9: 2003年; 目的 :测定用Edman降解方法不能测序的结构特殊多肽的序列。方法 :用纳升电喷雾四极杆_飞行时间串联质谱的denovo测序方法进行测序。结果 :测定了亮丙瑞林、胸腺五肽及EPD等的多肽序列 ,这些多肽用Edman降解方法未能测定出序列。结论 :串联质谱测序法是Edman降解测序法的最好补充 ,且具有灵敏、快速和样品用量少的优点。; 王红霞何昆李卫华魏开华王杰杨松成张学敏; 关键词：氨基酸序列

阻断泛素-蛋白酶体通路对人原代白血病细胞的作用被引量：2: 2002年; 阻断泛素-蛋白酶体通路对不同类型细胞具有完全不同的结果,但未见对原代白血病细胞作用的报道.观察了阻断上述通路对8例白血病患者和10例正常人骨髓单个核细胞（MNC）的作用.结果表明,不同个体原代白血病细胞对阻断此通路的反应敏感性存在明显差异,其中3例细胞极为敏感,24h以内90％细胞被迅速诱发凋亡,而正常人骨髓MNC对阻断泛素蛋白酶体通路反应不敏感,未观察到凋亡现象发生.进一步的免疫印迹实验发现,对上述通路敏感的原代白血病细胞Bcl-2蛋白表达量较高,而且在凋亡过程中发生了特异位点的酶解;对上述通路不敏感的细胞（包括正常人骨髓MNC）Bcl-2蛋白低表达,或Bcl-2高表达但未能检测到其特异性酶解现象.结合其他实验结果,提示细胞中Bcl-2蛋白是否发生特异位点酶解与细胞对阻断上述通路的敏感性之间具有相关性,为进一步研究不同种类细胞对阻断泛素-蛋白酶体通路敏感性差异的机制提供了线索.; 兰雨胡美茹于鸣沈倍奋张学敏杨怡杨平地; 关键词：泛素-蛋白酶体通路 BCL-2蛋白抗肿瘤机制通路阻断

人Bcl-2蛋白的基因克隆、表达及初步活性分析: 2003年; 目的 :以特定形式对高度疏水性的人Bcl 2 (hBcl 2 )蛋白进行可溶性表达 ,获得非疏水性hBcl 2蛋白并具备生物学结合活性 ,为进一步研究hBcl 2三维结构并在此基础上研发特异性小分子药物提供充足的蛋白样品。方法 :用PCR方法对hBcl 2基因进行克隆重组 ,插入原核表达载体pET2 8a(+)中。用WesternBlot和MALDI TOF生物质谱鉴定 ,采用荧光极化方法进行活性测定。结果 :重组hBcl 2在E .Coli中实现了高效、可溶性的融合表达 ,重组蛋白经纯化至电泳纯 ,具备了与Bcl 2家族Bak蛋白BH3功能域特异结合的能力 ,表明原核表达的重组hBcl 2具有较好的结合活性。结论 :成功地对重组hBcl 2蛋白进行了可溶性表达和活性测定。; 胡美茹张学敏靳宝锋兰雨沈倍奋; 关键词：基因克隆活性分析

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