国家重点基础研究发展计划(2006CB101900)
- 作品数:15 被引量:135H指数:7
- 相关作者:周明国陈长军王建新陈雨李俊更多>>
- 相关机构:南京农业大学广西大学晋中市农业局更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 一种经济高效的禾谷镰孢菌原生质体转化方法
- 禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)原生质体遗传转化技术是建立禾谷镰孢菌突变体文库及研究其功能基因组的一种重要方法,本文以禾谷镰孢菌Y-A为供试菌株,研究酶解材料、酶组合、酶浓度、酶解时间、酶解温度和最...
- 侯毅平陈长军王建新周明国
- 关键词:禾谷镰孢菌原生质体制备
- 禾谷镰孢菌微管相关蛋白基因(map)克隆及其与多菌灵抗药性关系分析被引量:1
- 2009年
- 根据禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)测序菌株NRRL31084(PH-1)的微管相关蛋白基因(map)核苷酸序列设计4对引物,采用PCR方法测定了禾谷镰孢菌对多菌灵(MBC)不同敏感性表型的6个中国菌株的map全序列。DNA序列比对表明,中国的3个敏感菌株和3个抗药菌株的map核苷酸序列相似性没有差异,表明多菌灵抗药性与微管相关蛋白无关。该基因全长1 793 bp,含有6个内含子,编码199个氨基酸;与NRRL31084的map核苷酸序列相似性为99.39%,存在10个差异核苷酸,与其所编码的氨基酸序列相似性为100%。
- 陈长军李俊于俊杰王建新周明国
- 关键词:禾谷镰孢菌多菌灵抗药性
- 抗氰烯菌酯的禾谷镰刀菌nit突变体的诱导及其生物学特性被引量:7
- 2007年
- 【目的】研究抗氰烯菌酯的禾谷镰刀菌nit突变体的生物学特性。【方法】将3个抗氰烯菌酯的禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum Schw.)菌株分别在含氯酸盐的MMC培养基上培养,共获得了50个硝酸盐利用缺陷突变体(nit)。比较了抗性菌株的nit突变体与亲本在无性和有性阶段的主要生物学性状。【结果】抗性菌株的nit突变体与亲本在菌落生长速率、培养性状和致病性方面没有显著差异;但某些突变体中,产孢量和产子囊壳能力方面存在一定差异。此外,禾谷镰刀菌对氯酸盐和氰烯菌酯之间没有交互抗药性,且抗性可以稳定遗传。【结论】可以将nit作为遗传标记来研究禾谷镰刀菌对氰烯菌酯的抗药性遗传学。
- 陈雨陈长军王建新金丽华周明国
- 关键词:禾谷镰刀菌生物学性状
- 马铃薯StTOM1和StTOM3双干扰植物双元表达载体的构建及转化验证被引量:3
- 2014年
- 病毒病是制约马铃薯生产的重要因素之一。在拟南芥等植物的研究中发现,抑制寄主因子可以显著降低细胞中病毒的累积量,从而缓解病害症状。本研究在获得与拟南芥寄主因子AtTOM1和AtTOM3具有同源性的马铃薯基因StTOM1和StTOM3的基础上,尝试用RNAi方法同时沉默StTOM1和StTOM3。以pUCCRNAi为中间载体,构建同时含StTOM1和StTOM3双基因干扰片段StT1-StT3的质粒pUCStT1-StT3-dRi(±),再将双基因干扰片段StT1-StT3切下并连接到双元载体pBI121上。用农杆菌介导方法,将StT1-StT3片段导入马铃薯中,获得转基因马铃薯小苗,阳性率达到83.6%。RT-PCR检测表明,转StT1-StT3马铃薯中StTOM1基因mRNA的表达水平下调了78%,StTOM3基因下调了81%。StTOM1和StTOM3沉默转基因马铃薯的获得,为将来验证和评价StTOM1和StTOM3是否为马铃薯病毒的寄主因子及在创建抗病毒马铃薯新种质的潜力,奠定了基础。
- 宋静静蒙姣荣卢晓静邹承武陈保善
- 关键词:马铃薯
- 禾谷镰孢菌两个β-微管蛋白基因功能
- 本文分别敲除禾谷镰孢菌的β1、β2-微管蛋白基因,并测定各敲除突变体菌株对多菌灵的敏感性,结果表明,敲除其中任意一个β-微管蛋白基因的突变体菌株都对多菌灵敏感,但敏感性有差异:与野生菌株相比(EC50=0.56μg/ml...
- 毕朝位周明国陈长军王建新
- 关键词:小麦赤霉病禾谷镰孢菌Β-微管蛋白基因功能
- 用小RNA深度测序鉴定广西冬种马铃薯病毒被引量:10
- 2013年
- 【目的】对广西冬种马铃薯病毒进行鉴定,为无病毒种薯选择和大田防治提供依据。【方法】2012年在马铃薯主要产区采集具有明显病毒病症状的样品,在血清学ELISA检测的基础上,进一步用小RNA深度测序对按症状分类的样品进行混合样本的病毒种类鉴定,再用RT-PCR方法对分组混合样本进行验证。【结果】在109个样本中检测到马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)、马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)、马铃薯H病毒(Potato virus H,PVH)、马铃薯M病毒(Potato virus M,PVM)、马铃薯S病毒(Potato virus S,PVS)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)和马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTVd),同时发现PVS有丰富的株系分化。【结论】近年广西冬种马铃薯病毒种类增多,病症多样,亟需加强种薯管理,培育无毒健康种薯。
- 宋静静蒙姣荣邹承武李璞王志强陈保善
- 关键词:冬种马铃薯病毒病害
- 小麦赤霉病菌对多菌灵的抗药性与α_2-微管蛋白序列无关析被引量:6
- 2008年
- 【目的】研究小麦赤霉病菌对多菌灵的抗药性与α2-微管蛋白基因的相关性。【方法】比较对多菌灵不同敏感性水平菌株间在药剂作用下的形态学特征及其α2-微管蛋白基因异同。【结果】当敏感菌株和田间中抗菌株均在各自EC50和EC90浓度作用下,两者分生孢子芽管和初生菌丝均表现畸形,肿胀,分支增多。根据小麦赤霉病菌核基因组测序菌株NRRL31084(PH-1)的α2-微管蛋白基因核苷酸序列设计4对引物,采用PCR方法克隆并测定了小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)对多菌灵(MBC)不同敏感性表型的8个中国菌株的α2-微管蛋白基因全序列。DNA序列比对结果表明中国的4个敏感菌株和4个抗药性菌株的α2-微管蛋白基因核苷酸序列同源性没有差异,多菌灵抗药性与α2-微管蛋白无关。该基因全长1712bp,含有4个内元,编码453aa;与NRRL31084的α2-微管蛋白基因核苷酸序列同源性为99%,存在5个差异核苷酸,与其所编码的氨基酸序列同源性为100%;与其他9种真菌α2-微管蛋白基因所编码的氨基酸序列同源性为64%-89%。【结论】小麦赤霉病菌对多菌灵的抗药性与α2-微管蛋白序列无关。
- 陈长军周立邦毕朝位李红霞王建新周明国
- 关键词:小麦赤霉病菌形态学特征多菌灵抗药性
- 利用错配碱基引物的ASO-PCR检测小麦赤霉病菌对多菌灵中抗菌株Codon^(200) TTC→TAC基因型
- 2011年
- 采用在引物3′端引入错配碱基,建立了特异性检测小麦赤霉病菌对多菌灵中抗菌株(Codon200TTC→TAC)基因型的ASO-PCR分子检测技术。结果表明含有错配碱基的引物对NT-7 R1/NT-7 Err5 F能够特异性检测小麦赤霉病菌对多菌灵的中抗菌株(Codon200TTC→TAC),扩增条件为94℃预热5 min;94℃变性60 S,56℃退火60 S,72℃延伸60 S,35个循环;最后72℃延伸15 min。并利用26种常见植物病原真菌验证了所设计引物的PCR扩增特异性。整个检测过程快速,操作简单,结果准确,在6小时内完成。
- 陈长军蔡倩王建新周明国
- 关键词:小麦赤霉病菌多菌灵抗药性
- 氰烯菌酯对禾谷镰孢菌分生孢子萌发及菌丝生长的影响被引量:26
- 2007年
- 氰烯菌酯(2-氰基-3-氨基-3-苯基丙烯酸乙酯,JS399-19)是一种对禾谷镰孢菌Fusarium graminearum具有专化活性的新型杀菌剂。离体条件下,采用菌丝生长速率法测定了该药剂对禾谷镰孢菌抗性菌株和敏感菌株的生长抑制活性;同时采用孢子萌发法测定了其对禾谷镰孢菌分生孢子萌发的影响。结果表明,氰烯菌酯能够强烈地抑制禾谷镰孢菌敏感菌株菌丝的生长,EC50值分布在0.092~0.141μg/mL之间;并可降低敏感菌株分生孢子的萌发速率,以及影响其萌发的方式,使芽管从分生孢子基部和中间细胞萌发的比率增加;同时氰烯菌酯使敏感菌株分生孢子膨大、畸形,并使其芽管肿胀、扭曲,明显抑制其芽管的伸长生长;但对抗性菌株的抑制作用和致畸作用不明显。
- 陈雨张文芝周明国
- 关键词:氰烯菌酯小麦赤霉病禾谷镰孢菌孢子萌发致畸作用
- 多菌灵对禾谷镰孢菌分生孢子萌发和有丝分裂的影响
- 禾谷镰孢菌Fusarium graminearum Schwabe是我国引起小麦赤霉病的主要病原菌,多菌灵是防治该病害的主要药剂之一。已有研究结果表明多菌灵对灰葡萄孢菌Botrytis cinerea
- 毕朝位仇剑波周明国陈长军王建新
- 关键词:禾谷镰孢菌灰葡萄孢菌有丝分裂多菌灵抗药性