国家自然科学基金(30070334)
- 作品数：6 被引量：34H指数：3
- 相关作者：孙耕耘王应灯肖贞良钱桂生夏前明更多>>
- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院第三军医大学新桥医院成都军区总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省优秀青年科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 山莨菪碱对血小板活化因子致肺微血管内皮细胞形态和骨架变化的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 观察血小板活化因子 (PAF)对培养肺微血管内皮细胞形态、单层通透性、肌动蛋白骨架的影响及山莨菪碱的干预作用。方法 HE染色观察PAF对体外培养大鼠肺微血管内皮细胞 (RPMVEC)的形态影响 ;用针头式滤器观察PAF对RPMVEC单层通透性的影响 ;用免疫细胞化学的方法观察PAF对RPMVECF 肌动蛋白 (F actin)分布的影响 ;并观察山莨菪碱干预后的变化。结果 PAF浓度大于0 1mg/L作用 4 8h内观察到细胞脱落和破裂。 10mg/LPAF 12 0min内可使RPMVEC单层通透性增高、F actin解聚 ,山莨菪碱可抑制上述变化。结论 PAF引起RPMVEC脱落和破裂呈时间和剂量依赖性 ;PAF引起内皮单层通透性的增高的机制与F actin解聚密切相关 ;山莨菪碱可抑制PAF引起RPMVEC细胞脱落、单层通透性增高和F actin解聚 。
- 王应灯孙耕耘
- 关键词：山莨菪碱血小板活化因子肺微血管细胞形态学细胞骨架
- G蛋白偶联受体失敏的分子机制被引量：4
- 2003年
- G蛋白偶联受体(GPCRs)受到激动剂持续刺激时易发生失敏.受体内化是GPCRs失敏重要分子机制.GPCRs在G蛋白偶联受体激酶(GRKs)、第二信使调节激酶等作用下发生磷酸化,磷酸化的GPCRs与抑制蛋白(arrestins)结合后导致受体与G蛋白失偶联,并通过胞吞由细胞膜表面向膜内转移,从而因GPCRs的内化而表现为失敏.
- 肖贞良夏前明钱桂生
- 关键词：失敏G蛋白偶联受体磷酸化内化胞吞
- 脂多糖对大鼠肺微血管内皮细胞[Ca^(2+)]_i和Gq蛋白的影响及山莨菪碱的干预被引量：2
- 2002年
- 目的 :观察脂多糖对大鼠肺微血管内皮细胞 (RPMVECs) [Ca2 + ]i 和Gq蛋白的影响及山莨菪碱的干预作用。方法 :分离、培养并鉴定Wistar大鼠RPMVECs;应用Fura - 2 /AM法测定RPMVECs[Ca2 + ]i;流式细胞仪技术测定RPMVECsGq蛋白。结果 :①LPS作用于RPMVECs 30min和 90min后 ,[Ca2 + ]i 显著高于对照组 ;Gq蛋白显著低于对照组。②山莨菪碱可抑制LPS的上述作用。结论 :①LPS致RPMVECs[Ca2 + ]i 增加和Gq蛋白下降 ;②山莨菪碱通过抑制LPS诱导RPMVECs[Ca2 + ]i 增加和Gq蛋白下降的作用而保护其内皮屏障功能。
- 方传彪孙耕耘白莉
- 关键词：脂多糖肺微血管内皮细胞山莨菪碱钙离子
- 脂多糖对大鼠肺微血管内皮细胞G蛋白偶联受体激酶的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 :鉴定大鼠肺微血管内皮细胞 (RPMVEC)G蛋白偶联受体激酶 (GRK)的亚型 ,并观察脂多糖(LPS)的影响。方法 :在体外分离、培养RPMVEC的基础上 ,采用Westernblot方法检测GRK2和GRK3。结果 :LPS组和LPS +山莨菪碱组GRK2表达明显高于正常对照组 ;RPMVEC无GRK3表达。结论 :LPS引起RPMVEC膜GRK2表达增加可能与促进 β肾上腺素受体 (β受体 )内化 ,从而导致 β -受体下调有关 ,而与GRK3无关 ;
- 孙耕耘肖贞良王应灯
- 关键词：G蛋白偶联受体激酶脂多糖类
- G蛋白偶联受体激酶活性调控与细胞炎性损伤被引量：14
- 2003年
- G蛋白偶联受体激酶 (Gprotein coupledreceptorki nases,GRKs)不仅调节G蛋白偶联受体 (GPCR)磷酸化、介导受体脱敏 ,使信号效应降低或消失 ,而且也调节G蛋白和靶细胞骨架 ,同时它还受到蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)、肌动蛋白和细胞内第二信使钙离子等调节。组织细胞表面存在多种GPCR如血小板活化因子 (PAF)受体、组胺受体、凝血酶受体等 ,介导炎性介质所致细胞损伤的信号转导作用。GRKs磷酸化GPCR 。
- 王应灯孙耕耘
- 关键词：炎性介质
- G蛋白偶联受体激酶2参与血小板活化因子致肺微血管内皮细胞损伤的机制被引量：10
- 2004年
- 目的 探讨G蛋白偶联受体激酶 2 (GRK2 )参与血小板活化因子 (PAF)诱导大鼠肺微血管内皮细胞 (PMVEC)损伤的机制。方法 在体外分离、培养PMVEC的基础上 ,采用微滤器检测PAF作用于PMVEC前后单层通透性的变化 ;用流式细胞仪检测F 肌动蛋白 (F actin)的变化 ;并用Westernblot方法检测PMVEC的GRK2表达 ,用佛波酯刺激PMVEC以观察GRK2的变化及其对单层通透性和F actin的影响。结果 10mg·L- 1 剂量的PAF在 12 0min内可使PMVEC单层通透性增高、F actin解聚 ,GRK2表达明显高于正常对照组 ,佛波酯刺激PMVEC可使GRK2表达进一步增高并可抑制PMVEC单层通透性增高和F actin解聚。结论 PAF作用后可引起PMVEC单层通透性增高和GRK2表达增加 ,且PMVECF actin解聚与单层通透性增高密切相关 ,GRK2表达增加可抑制PMVEC单层通透性增高和F actin解聚 ,减轻PAF对PMVEC的损伤。
- 孙耕耘王应灯
- 关键词：PAF血小板活化因子肺微血管内皮细胞G蛋白偶联受体激酶
