国家自然科学基金(81060240) 作品数:12 被引量:29 H指数:3 相关作者: 陈艳 邓彦超 刘真群 李磊 尹东 更多>> 相关机构: 新疆医科大学 新疆医科大学第一附属医院 新疆医科大学附属肿瘤医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍对哈萨克族正常食管上皮细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响 被引量:1 2014年 目的探讨N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对哈萨克族正常食管上皮细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响及N-亚硝胺类化合物致癌机制。方法将体外培养的哈萨克族正常食管上皮细胞暴露于不同浓度的MNNG(0,0.75,1.5 and 3μg/ml)培养液中,0μg/ml MNNG为对照组。采用噻唑蓝(MTT)法检测MNNG对哈萨克族食管正常上皮细胞增殖的影响、流式细胞术检测MNNG对细胞周期的影响、AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测MNNG对细胞凋亡的影响。结果暴露于不同浓度的MNNG 24 h后,四组哈萨克族食管正常上皮细胞抑制率分别为0、12.880%、28.414%、44.401%,后三组与对照组0μg/ml比较差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期阻滞在S期和G2/M期,细胞比值分别为(26.000±1.808)%、(29.867±3.769)%、(37.833±3.782)%、(47.100±2.427)%和(10.867±1.747)%、(16.133±1.498)%、(18.533±1.115)%、(14.267±1.848)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);细胞凋亡率分别为(0.533±0.252)%、(1.767±0.252)%、(11.033±2.173)%、(26.767±1.955)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MNNG抑制哈萨克族正常食管上皮细胞增殖、阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡。 尹东 黄思语 邓彦超 陈艳关键词:哈萨克族 食管上皮细胞 细胞周期 利用甲基化芯片及转录组测序方法筛选哈萨克族食管癌DNA异常甲基化谱 2014年 目的:筛选新疆哈萨克族食管鳞癌DNA异常甲基化谱,为深入研究食管癌的发生机制提供线索。方法:采用Illumina Human Methylation 450K甲基化芯片,对6例哈萨克族食管癌组织及其癌旁正常组织进行全基因组甲基化检测,筛选DNA异常甲基化基因;利用Hiseq2000测序平台,对2例哈萨克族食管癌组织及其癌旁正常组织进行RNA水平检测,建立mRNA文库,并与DNA 甲基化结果进行关联分析,筛选DNA异常甲基化谱,同时对这些基因进行生物信息学分析。结果:食管癌组织中含高甲基化基因227个,低甲基化基因6个;癌组织mRNA表达量在0.0312~8192,癌旁正常组织在0.0312~1024。DNA异常甲基化基因与表达谱关联分析,呈负相关关系(即DNA高甲基化、mRNA低表达,或DNA低甲基化、mRNA高表达)的启动子区域基因共20个,包括启动子区域CpG岛高甲基化且表达下调10个位点、10个基因,低甲基化且表达上调11个位点、10个基因。生物信息学分析表明这些基因参与甲酰四氢叶酸分解代谢及调控细胞增殖等生物学过程,涉及一碳代谢通路及诱导细胞凋亡通路等。结论:初步建立了新疆哈萨克族食管癌DNA 异常甲基化谱,为哈萨克族食管癌的发病机制研究提供了新的思路。 陈艳 邓彦超 李磊关键词:DNA甲基化 食管癌 哈萨克族 生物信息学分析 哈萨克族食管正常上皮细胞的原代培养方法 被引量:3 2014年 目的:培养哈萨克族(哈族)成人食管正常上皮细胞,建立能够在体外长期培养的哈族食管上皮细胞系,为上皮细胞的体外研究提供实验材料。方法取哈萨克族食管癌患者正常食管上皮,用0.25%中性蛋白酶(DispaseⅡ)和0.05%胰蛋白酶/0.03% EDTA 联合消化获取哈族食管上皮细胞,使用 EpiCM-2无血清培养基培养,通过细胞形态学和角蛋白免疫组织化学法鉴定培养的食管正常上皮细胞的来源。结果首次培养的原代哈萨克族正常食管上皮细胞经8~10 d 后可融合成片,融合率为80%~90%,细胞呈“铺路石”样生长,细胞角蛋白表达阳性,可连续传代,传代的细胞经3~5 d 可达到80%~90%融合。结论建立的体外分离培养哈族成人食管正常上皮细胞的方法方便可行。 黄思语 阿尔孜古丽.吐尔逊 邓彦超 陈艳关键词:食管 上皮细胞 哈萨克族 原代培养 无血清培养基 新疆哈萨克族食管癌DNA甲基化差异基因的初步研究 2012年 目的探讨新疆哈萨克族食管癌癌组织与癌旁正常组织间差异显著的DNA甲基化基因,初步建立哈萨克族食管癌患者特异的异常甲基化谱。方法采用Illumina公司Human Metylation 450K磁珠芯片,对哈萨克族食管癌癌组织、癌旁正常组织各6例共12个标本进行全基因组甲基化检测,分析二者之间差异显著的甲基化基因,对具有显著差异的甲基化基因进行基因类型(Gene Ontology,GO)分析。结果食管癌癌组织与癌旁正常组织间具有显著差异的DNA甲基化基因共40个,参与多个生物过程,如信号转导、细胞周期调控及细胞凋亡等。GO分析表明,基因CCND1,CCDC88C参与Wnt信号通路,DLL1参与Notch信号转导等。结论差异显著的甲基化基因为深入研究哈萨克族食管癌的发生机制提供了理论依据。 李磊 田薇 邓彦超 陈艳关键词:食管癌 哈萨克族 DNA甲基化 芯片技术 新疆哈萨克族食管癌患者ALDH1L1基因甲基化及其与预后的关系 被引量:5 2014年 目的:探讨新疆哈萨克族食管癌患者ALDH1L1基因甲基化状态及其与食管癌发生及预后之间的关系。方法:采用联合亚硫酸氢钠限制性内切酶分析(COBRA)法检测28例哈萨克族食管癌及癌旁组织标本中ALDH1L1基因启动子区甲基化状况,建立Cox回归模型分析临床病理指标、ALDH1L1基因甲基化水平等因素与预后的关系。结果:28例哈族食管癌患者癌组织和癌旁正常组织的ALDH1L1基因启动子甲基化率分别为71.43%和39.28%,差异有统计学意义(P<0.05)。预后因素分析表明肿瘤浸润程度、TNM分期、淋巴结转移、癌组织ALDH1L1基因甲基化水平是影响哈萨克族食管癌预后的独立危险因素。癌组织ALDH1L1基因无甲基化患者术后生存时间长于完全甲基化患者(P<0.05)。结论:癌组织ALDH1L1基因启动子区甲基化状态与新疆哈萨克族食管癌的发生及预后有关。 黄思语 尹东 邓彦超 陈艳关键词:哈萨克族 食管癌 伊犁地区哈萨克族食管癌高发区饮用水水质多元分析 被引量:1 2015年 为研究饮用水中影响食管癌高发的主要因素,于2012年3月对伊犁地区食管癌高发区居民饮用水中"三氮"(氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮)、Fe、Cu、Zn、Mn、Cd、Pb和Se的含量进行检测,并利用因子分析法进行分析。结果显示,共提取出4个公因子,第一因子为"三氮"因子;第二因子为"抗氧化"因子;第三因子为"免疫毒性"因子;第四因子为"遗传损伤"因子。4个因子的累积贡献率为78.69%。提示"三氮"因子可能与该地区食管癌高发有关。 陈艳 刘真群关键词:微量元素 饮用水 食管癌 新疆哈萨克族食管癌患者LRRFIP1基因甲基化及其与预后关系的研究 被引量:2 2013年 目的探讨新疆哈萨克族食管癌(Esophageal Carcinoma,EC)患者LRRFIP1基因甲基化状态及其与食管癌发生及预后之间的关系。方法采用亚硫酸氢盐修饰联合限制性内切酶分析法(combined bisulfite restriction analysis,COBRA)检测哈萨克族共28例食管癌及癌旁组织标本LRRFIP1基因启动子区甲基化状况,建立Cox回归模型分析临床病理指标及LRRFIP1基因甲基化水平等因素与预后的关系。结果 28例哈族食管癌患者癌组织和癌旁正常组织的LRRFIP1基因启动子甲基化率分别为71.43%和46.43%,差异有统计学意义(P<0.05)。预后因素分析表明肿瘤浸润程度、TNM分期、淋巴结转移是影响哈族食管癌预后的独立危险因素。结论 LRRFIP1基因启动子区甲基化状态与新疆哈族食管癌的发生有密切的关系,但可能与食管癌预后无关。 黄思语 张晨 邓彦超 陈艳关键词:哈萨克族 食管癌 COBRA 哈萨克、汉族食管癌p16基因甲基化及其表达的研究 被引量:2 2011年 目的探讨新疆哈萨克族、汉族食管癌患者p16基因的甲基化状态及其与食管癌发生的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)的方法,检测哈萨克族(36例)、汉族(35例)食管癌患者及正常人群对照组p16基因的甲基化状态,分析其与年龄、性别、淋巴结转移、分化程度及临床病理分期等的关系。结果 36例哈萨克族食管癌癌组织、癌旁组织的甲基化率分别为44.4%、13.9%,正常人群对照组的甲基化率为2.8%;35例汉族食管癌癌组织、癌旁组织的甲基化率分别为42.9%、14.3%,正常人群对照组的甲基化率为2.9%。食管癌癌组织p16基因的甲基化率显著高于癌旁组织和正常人群对照组,差异有统计学意义(P<0.05),p16基因启动子区甲基化与肿瘤分化程度密切相关。结论新疆哈萨克族、汉族食管癌患者中p16基因启动子甲基化与食管癌的发生有密切的关系。 赵燕 陈艳关键词:哈萨克族 汉族 P16基因 甲基硝基亚硝基胍对哈萨克族人群正常食管上皮细胞p16和FHIT基因甲基化及其表达的影响 2014年 目的:探讨N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对哈萨克族人群正常食管上皮细胞p16和脆性组氨酸三联体(FHIT)基因甲基化状态及其表达的影响。方法:体外培养哈萨克族人群正常食管上皮细胞,用含MNNG浓度分别为0.75、1.50和3.00μg/mL的培养基培养24 h,同时设立空白对照组。采用甲基化特异性聚合酶链(MSP)法检测p16和FHIT基因甲基化状态,实时荧光定量PCR(real time PCR)、Western blot法分别检测p16和FHIT mRNA及蛋白表达水平。结果:与对照组比较,各浓度MNNG处理组细胞p16和FHIT基因甲基化状态均保持未甲基化状态不变。各组细胞p16 mRNA和蛋白表达水平与对照组比较均升高,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);0.75μg/mL MNNG处理组细胞FHIT mRNA表达水平低于对照组(P<0.01),而3.00μg/mL MNNG处理组细胞FHIT mRNA表达水平高于对照组(P<0.05),且3.00μg/mL MNNG处理组FHIT蛋白表达水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MNNG可促进哈族人群正常食管上皮细胞p16、FHIT mRNA和蛋白的表达。 尹东 黄思语 陈艳关键词:哈萨克族 食管上皮细胞 P16 新疆哈萨克族和汉族食管癌患者FHIT基因甲基化及其与预后的关系 被引量:10 2012年 目的:探讨和比较新疆哈萨克族和汉族食管癌患者FHIT基因甲基化状态及其与食管癌发生及预后之间的关系。方法:采用甲基化特异性PCR法(methvlation-specific polymerase chain reaction,MSF)测定哈、汉两民族共71例食管癌及癌旁组织标本FHIT基因启动子区甲基化状况,建立Cox回归模型分析临床病理指标及FHIT基因甲基化水平等因素与预后的关系。结果:36例哈族食管癌患者癌组织和癌旁组织的FHIT基因启动子甲基化率分别为58.3%和19.4%,35例汉族食管癌患者癌组织和癌旁组织的FHIT基因启动子甲基化率分别为51.4%和14.3%,两民族癌组织FHIT基因的甲基化率均明显高于癌旁组织(P<0.01);哈、汉民族食管癌患者癌组织之间、癌旁组织之间FHIT基因启动子甲基化率无显著性差异(P>0.05)。预后因素分析表明肿瘤浸润程度、TNM分期、淋巴结转移区域数是影响哈、汉民族食管癌预后的独立危险因素,女性性别是保护因素。结论:FHIT基因启动子区甲基化状态与新疆哈族、汉族食管癌的发生有密切的关系,但可能与食管癌预后无关。 李磊 邓彦超 赵燕 陈艳关键词:哈萨克族 汉族 FHIT基因 甲基化特异性PCR