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连翘酯苷对人工感染传染性支气管炎病毒雏鸡肺组织JAK/STAT信号通路的调节作用被引量：8: 2011年; 探讨连翘酯苷对人工感染传染性支气管炎病毒雏鸡的肺组织JAK/STAT信号通路的调节作用,分别设连翘酯苷预防组高、中、低和治疗组高、中、低6个剂量组,并设利巴韦林阳性对照组、空白对照组和病毒对照组。提取雏鸡肺组织总RNA,用相对荧光定量RT-PCR的方法测定雏鸡体内干扰素-α,JAK,STAT-1mRNA的相对表达量。结果表明连翘酯苷预防组高剂量100 mg/kg、中剂量50 mg/kg和治疗组中剂量100 mg/kg对雏鸡体内干扰素-α的mRNA水平表达有诱生作用(P<0.01),治疗组中剂量显著上调JAK及STAT-1的表达,与JAK/STAT信号通路一些因子的上调相关,其机制部分与肺组织的JAK/STAT信号通路激活和相关信号的表达有关,这是连翘酯苷发生抗病毒作用的机制之一。; 张羽璐李华伟庄英华高飞苑嗣纯王惠川吴国娟; 关键词：连翘酯苷鸡传染性支气管炎病毒干扰素-Α JAK/STAT信号通路

马兜铃酸Ⅰ诱导肾小管上皮细胞凋亡的检测被引量：5: 2011年; 本试验旨在培养小鼠肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs),探讨马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acidⅠ,AAⅠ)诱导小鼠肾小管上皮细胞的凋亡情况。AAⅠ与RTECs反应后,从细胞形态学、DNA Ladder、流式细胞仪3个方面检测AAⅠ诱导RTECs的凋亡情况。AAⅠ作用后,随着浓度的增高,上皮细胞失去上皮细胞表型,在20～80μg/mL作用24h后,细胞都出现晚期凋亡的特征;在20μg/mL AAⅠ的作用下早期凋亡的比率随作用时间的延长而增高。AAⅠ可诱导小鼠原代RTECs产生凋亡,凋亡随着作用时间的延长和药物浓度的增大而加剧。; 彭晓兰董晓凯廖芳芳高磊张中文吴国娟; 关键词：肾小管上皮细胞细胞凋亡

Forsythiaside A Induced IFN-α and Up-regulated the Correlated Factors in JAK-STAT Signaling Pathway in vitro被引量：1: 2012年; [Objective] This study was to investigate the effect of forsythiaside A added in chick embryo kidney cells (CEKs), on the changes in expression of interferon α(IFN-α) and mRNA expression level of correlated factors in JAK-STAT pathway. [Methods] Three levels of forsythiaside (100, 200, 400 μg/ml) were adopted to treat the experimental materials, then the expression levels of IFN-α and correlated factors in JAK-STAT pathway were detected by real-time RT-PCR at the transcriptional level (mRNA) and by Western blot at the translation level(IFN-α protein). [Result] Compared with the control group (untreated group), Application of forsythiaside A not only significantly increased the expression of IFN-α in treated CEKs (P<0.05) , but also up-regulated the expression of STAT1, JAK1, IFNAR1, IFNAR2, IRF1 and IRF7, the correlated factors in JAK-STAT pathway. [Conclusion] Forsythiaside A induced the expression of IFN-α in CEKs, and can positively regulate the JAK-STAT signaling pathway significantly.; 李华伟张中文陆彦马元元张禹吴国娟; 关键词：IFN-Α JAK-STAT

脂质体瞬时转染siRNA抑制肾小管上皮细胞去乙酰化蛋白酶1的表达被引量：3: 2012年; 建立有效的脂质体瞬时转染法,将小干扰RNA(siRNA)转染至小鼠肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs),从而抑制其乙酰化组蛋白酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)的表达。使用阳离子脂质体法瞬时转染小鼠肾小管上皮细胞,用荧光标记siRNA(FAM-siRNA)筛选转染比例,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)确定最优条件并检测不同位点(374,525和822)HDAC1-siRNA的抑制效果,噻唑蓝(MTT)法检测不同时间点HDAC1-siRNA对RTECs增殖的影响,并设立曲古霉素处置组作为试验对照。荧光表达和Real-time PCR结果显示30 pmol siRNA∶1.5μL LipofectamineTM2000为最佳转染条件,HDAC1-374的干扰效果最明显。MTT检测结果显示,HDAC1-374与TSA一致,证实HDAC1-siRNA能有效抑制RTECs的增殖。本试验利用脂质体瞬时转染siRNA法成功抑制了RTECs中HDAC1的表达。; 杨洋吴国娟李培锋

膏芩口服液对内毒素诱导小型猪发热的影响被引量：3: 2011年; 本研究旨在探索膏芩口服液对内毒素发热小型猪的解热效果及机制。40头试验小型猪,随机分为4组:对照组、模型组、安乃近组、膏芩口服液组,每组10头。采用大肠杆菌内毒素(LPS)80μg.kg-1,连续2次,间隔12 h,腹腔注射攻毒复制试验猪发热模型,第1次攻毒6 h后,对照组和模型组灌服生理盐水;安乃近组注射安乃近;膏芩口服液组灌服膏芩口服液,1次.d-1,连续3 d。分别监测每组6头试验猪的基础体温和攻毒给药后1、3、5、24、30、42、54 h肛温,观察临床症状并评分,并在54 h时,各组试验猪前腔静脉采血,检测血清中TNFα-、IL-1、cAMP、PGE2的含量。结果表明,与模型组相比,膏芩口服液组能显著缓解内毒素所引起的小型猪发热临床症状,降低体温;与对照组相比,模型组中TNF-α、PGE2、cAMP、IL-1显著增加(P<0.05);与模型组相比,膏芩口服液组能显著降低血清TNF-α、PGE2、cAMP含量(P<0.05),但对于IL-1作用不显著(P>0.05)。由此可见,膏芩口服液能明显抑制内毒素所引起的小型猪发热,其解热作用的机制可能与抑制血清细胞因子TNFα-的生成,减少发热介质PGE2和cAMP的释放有关。; 云水刘凤华许剑琴刘秋东武聚富吴国娟张中文; 关键词：脂多糖发热

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备被引量：2: 2012年; 试验通过RT-PCR法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)基因并克隆到原核表达载体pet-30a中,转入到BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE和Western blotting分析表达产物的特性。利用Ni柱纯化该重组蛋白,采用NC膜皮下包埋法免疫Balb/C小鼠,取免疫后的脾细胞与SP2/0细胞进行融合后筛选杂交瘤细胞株,检测杂交瘤细胞株的特性并制备单克隆抗体。SDS-PAGE和Western blotting结果表明,该重组蛋白表达正确,约为20ku,能被抗PRRSV的阳性血清特异性识别。超声后用Ni柱纯化,经SDS-PAGE分析可得单一的目的条带。NC膜皮下包埋法免疫效果良好,通过细胞融合、ELISA筛选获得3株能稳定分泌抗PRRSV N蛋白抗体的杂交瘤细胞株(H7、F7、C8),制备出高特异性的针对N蛋白的H7单抗。IFA与Western blot-ting结果显示制备的单抗可与病毒N蛋白产生特异性反应。亚型鉴定为IgG2b型,染色体分析证实杂交瘤细胞染色体数目正确。结果成功实现了N蛋白的原核表达,并获得高特异性的单克隆抗体,为PRRSV N蛋白抗原的检测奠定基础。; 王晶王星星高飞苑嗣纯吴国娟; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白原核表达单克隆抗体

适配体传感器的研究进展被引量：4: 2011年; 适配体作为传统抗体的替代物,在药物残留检测、临床诊断、靶向治疗等许多领域有广范的应用。适配体与生物传感器检测技术相结合,可研制出一系列适配体传感器。介绍了适配体的概念和优点,适配体传感器的种类,如荧光传感器、电化学传感器、比色传感器、SERS(surface enhanced raman scattering)传感器和SPR(surface plasmon resonance)传感器,以及它们的原理、检测限和应用情况,展望适配体传感器在兽药残留检测和动物疾病诊断等方面的应用前景。; 祝文琪高磊王晶王杏周旭平吴国娟; 关键词：适配体传感器

磺胺母核单克隆抗体的制备及其免疫学特性研究: 【目的】制备磺胺母核（SH）单克隆抗体（Monoclonal antibody,mAb）,并对其免疫学特性进行检测。【方法】采用混合酸酐法将本实验室合成的磺胺类药物母核结构药物（SH）偶联于牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋...; 杜玉玲陆彦祝文琪王晶高磊吴国娟; 关键词：磺胺类药物单克隆抗体免疫学特性多残留检测; 文献传递

马兜铃酸肾毒性研究进展2: 马兜铃酸(Aristolochic acid,AA)是从马兜铃属植物中提取的结构相似的硝基菲类化合物,其主要由AAⅠ和AAⅡ组成。马兜铃酸肾病(Aristolochic acid nephropathy,AAN)是指服用...; 高磊吴金栋赵海焦吴国娟; 文献传递

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国家自然科学基金(30972215)

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