国家自然科学基金(30571170)
- 作品数：5 被引量：52H指数：5
- 相关作者：张晓东郭新梅陈耀锋梁荣奇杨凤萍更多>>
- 相关机构：北京市农林科学院农业生物技术研究中心西北农林科技大学青岛农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 玉米淀粉分支酶基因的克隆与RNAi表达载体的构建被引量：7
- 2007年
- 利用网络数据库http://jura.wi.mit.edu/bioc/siRNAext/,确定玉米淀粉分支酶SBEⅡb的部分基因序列作为RNAi的目标序列,通过RT-PCR方法从玉米自交系‘综31’中分别成功克隆出了玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因的部分序列及其启动子序列,从大肠杆菌中成功克隆了木糖异构酶基因xylA作为筛选标记,构建了含有35S驱动的木糖异构酶基因和sbeⅡb启动子驱动的含有sbeⅡb目标序列的反向重复序列的表达载体pBAC413,并对玉米自交系实施转化。经PCR检测转基因玉米再生植株,初步判定目的序列已经成功整合到玉米再生植株的基因组中。
- 郭新梅张晓东梁荣奇杨凤萍陈耀锋
- 关键词：玉米淀粉分支酶直链淀粉
- 以木糖异构酶基因为筛选标记的玉米遗传转化被引量：11
- 2007年
- 利用木糖异构酶基因作为筛选标记可以在含有不同浓度木糖的培养基上筛选出玉米再生植株,其中50%～100%木糖浓度的总体筛选效果较好,但不同玉米基因型之间筛选的最佳浓度差异很大。通过DNA点杂交、PCR及PCR-Southern印记法检测表明,木糖异构酶基因已经整合到转基因植株中。以木糖作为筛选剂,可以减小潜在的生物安全隐患。
- 郭新梅张晓东梁荣奇张立全陈耀锋
- 关键词：木糖木糖异构酶筛选标记基因玉米
- RNAi沉默淀粉分支酶基因SBEI对玉米直链淀粉合成的影响被引量：7
- 2010年
- 淀粉分支酶(SBE)是淀粉合成的限速酶。为了研究SBEI沉默对直链淀粉合成的影响,克隆了玉米(Zeamays)淀粉分支酶SBEI基因片段,构建了SBEI的RNAi表达载体pBAC418,用基因枪将其导入玉米自交系幼胚愈伤组织,经木糖筛选获得了7株转化再生植株。利用FAD2 intron和xylA基因探针对T0代再生玉米植株进行DNAdotblot和PCR-Southern检测,证实5株为阳性植株,其中4株正常结实。SBEI基因沉默对阳性再生玉米株系籽粒的含油量没有显著影响;蛋白质含量显著高于受体对照;总淀粉含量与对照相比无显著差异,转基因株系直链淀粉含量平均提高了9.8%。
- 郭新梅宋希云张晓东
- 关键词：直链淀粉玉米RNA干扰
- 不同基因型玉米幼胚愈伤组织的培养特性被引量：19
- 2007年
- 为了研究不同基因型玉米自交系幼胚愈伤组织的培养特性,选取19个玉米自交系(属于5个杂种优势类群)为试验材料,以授粉后10～12 d的玉米幼胚为外植体,研究不同基因型和培养基对玉米幼胚愈伤组织诱导率的影响。结果表明,供试材料均能通过幼胚愈伤诱导培养形成愈伤组织,其中11个自交系的愈伤组织能分化获得再生植株。Reid、旅大红骨和其他种质3个杂种优势类群中的B73、黄C、478,综31,178、501、先早17、旱21等8个自交系具有较好的幼胚培养特性和植株再生特性,愈伤组织诱导率高,且愈伤整齐、大小适中、植株再生率高,适宜作为受体材料进行遗传转化。幼胚在附加4 mg／L 2,4-D且去掉水解酪蛋白和L-脯氨酸的N6改良培养基上,幼芽及根的数量少、出愈率高、愈伤组织质地好,并明显减少了幼胚自发性芽分化的趋势,有利于保持愈伤组织胚性、提高再生植株频率,为玉米自交系幼胚诱导的适宜培养基。
- 郭新梅张晓东韩立新陈耀锋
- 关键词：玉米幼胚愈伤诱导
