国家自然科学基金(31201904)
- 作品数：8 被引量：27H指数：4
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- 相关机构：江苏省农业科学院安徽农业大学南京农业大学更多>>
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- 免疫增强剂对不同肉鸡禽流感疫苗免疫效果探讨被引量：2
- 2013年
- 试验将筛选获得的免疫增强剂与现有商品化禽流感疫苗混合后免疫10-15日龄的白羽肉鸡、黄羽肉鸡或麻鸡，在免疫后的第2、3、4周采血用于检测血凝抑制抗体效价，统计饲料用量，并在各品种鸡达到出栏日龄时，检测出栏重、料肉比和死淘率。结果显示，3种肉鸡免疫含免疫增强剂伴侣的H5亚型禽流感疫苗，抗体产生比常规疫苗提前1周达到710昏，平均HI抗体效价显著高于常规疫苗；不同疫苗免疫鸡与对照鸡在出栏重和料肉比方面无显著差异，在饲养期间无死淘情况。综合上述结果提示，免疫增强剂能显著提高禽流感疫苗在肉鸡的免疫效力，同时对生产性能无明显影响。
- 唐应华陆吉虎吴培培侯凤香刘振兴田震查国飞陈辉侯继波
- 关键词：免疫增强剂H5亚型禽流感疫苗肉鸡
- 免疫增强剂提高禽流感疫苗效力的研究被引量：11
- 2014年
- 为评价免疫增强剂（VA5）对鸡的免疫效力,将不同剂量免疫增强剂与H9禽流感抗原混合后制备疫苗,评价对SPF鸡的免疫效力.根据筛选结果,将最适剂量的免疫增强剂与H9禽流感抗原以共同混合的形式配制疫苗,并将免疫增强剂以伴侣形式与H5或H9禽流感疫苗混匀免疫商品鸡,评价免疫增强效果.结果表明,免疫增强剂与H9疫苗共同混匀,或将免疫增强剂制备成疫苗伴侣形式与H5或H9商品疫苗共同混合免疫商品鸡,均能使H5或H9疫苗免疫后抗体提前1周达到7lg2,免疫后2～3周抗体效价显著高于不含免疫增强剂的常规疫苗组.该免疫增强剂能提高H5和H9亚型禽流感疫苗对鸡的免疫效力,具有较好的应用前景.
- 唐应华陆吉虎吴培培刘振兴田震查国飞陈辉侯继波
- 关键词：免疫增强剂H5亚型禽流感疫苗
- 人工合成禽流感M2e/HA0多肽的免疫原性分析被引量：1
- 2014年
- 为了解流感病毒M2及HA保守肽段的免疫原性,参照流感病毒M2及HA的氨基酸序列分别设计合成多肽并免疫SPF鸡,设H5和H9亚型禽流感灭活疫苗及空白组作对照。对免疫后2、4、6和8周的血清进行HI和ELISA抗体、MDCK细胞的病毒血清法中和抗体效价和间接免疫荧光抗体检测,8周采血结束后用H9病毒进行攻毒检测。结果表明两种多肽疫苗均不产生HI抗体,针对各自多肽的ELISA抗体效价均显著高于H5/H9常规灭活疫苗对照组。M2e/HA0多肽苗免疫血清最高中和抗体效价为1∶16,远低于H9血清中和效价(1∶256)。间接免疫荧光检测结果显示多肽苗(M2e/HA0)组含荧光颗粒的MDCK细胞比例约20%左右,低于H5和H9灭活疫苗组含荧光颗粒细胞数(分别为50%和70%)。H9亚型禽流感病毒攻毒结果表明,两组多肽免疫后都可以有效抑制排毒,其中M2e免疫组抑制效果略好于HA0免疫组。以上结果提示M2e/HA0多肽具有较好的免疫原性,但其免疫原性弱于常规疫苗。
- 陆吉虎唐应华田震刘振兴查国飞陈辉侯继波
- 关键词：禽流感M2HA免疫原性
- 免疫增强剂对禽流感疫苗免疫持续期、安全性和鸡淋巴细胞转化的影响被引量：9
- 2014年
- 在配制H9亚型禽流感疫苗过程中添加免疫增强剂VA5制成VA5-H9疫苗免疫鸡,或将VA5制备成油乳剂以疫苗伴侣形式与商品化H5亚型禽流感疫苗混合(VA5-H5)后免疫鸡,监测鸡的抗体持续期、疫苗安全性和鸡淋巴细胞的转化情况。抗体检测结果表明,VA5与H5或H9亚型禽流感疫苗混用能有效延长抗体持续期4周,H5抗体提前1周达到7lg2。安全性研究表明,以VA5-H9疫苗经一次单剂量、一次2倍剂量和单剂量间隔2周重复免疫这3种方式免疫鸡后,含VA5的疫苗与常规疫苗的吸收类似,说明VA5不影响鸡体对疫苗的吸收。淋巴细胞转化试验结果显示,VA5能提高免疫鸡淋巴细胞转化效率。可知,获得的VA5免疫增强剂能有效延长抗体持续期,且不影响疫苗的安全性,并提高免疫鸡的淋巴细胞转化活性。
- 唐应华陆吉虎吴培培查国飞刘振兴陈辉侯继波
- 关键词：免疫增强剂禽流感疫苗抗体安全性淋巴细胞转化
- H5亚型禽流感病毒HA基因杆状病毒系统的表达及活性鉴定
- 2014年
- 通过PCR方法从人工合成的质粒(232HAc-T)扩增获得全长的HA基因和缺失信号肽及跨膜区的HA基因。将此HA基因克隆至杆状病毒表达系统,构建重组穿梭载体rBac-232HAc和rBac-232HAδST,转染Sf9细胞后获得重组的杆状病毒rAc-232HAc和rAc-232HAδST。重组病毒在Sf9细胞中表达2种重组蛋白232HAc和232HAδST。2种蛋白在SDS-PAGE和Western blot检测中均获得预期目的条带,间接免疫荧光(IFA)检测呈阳性。血凝试验结果显示,232HAc蛋白能够使红细胞凝集,血凝(HA)效价为8log2;而232HAδST的HA效价低于2log2。血凝抑制试验结果表明,232HAc蛋白与H5阳性血清反应良好,效价类似于H5检测抗原对照,但不与其他病毒血清反应。结果提示:2种重组蛋白均能在Sf9细胞中表达,但重组232HAc蛋白能具有较好的血凝性,并能被H5阳性血清特异性抑制。本研究为研发H5亚型禽流感HA蛋白亚单位疫苗提供了生物材料。
- 查国飞唐应华陆吉虎陈辉刘振兴田震侯继波李培英
- 关键词：HA蛋白杆状病毒
- 免疫增强剂提高H9亚型禽流感灭活疫苗在SPF鸡体中细胞因子的免疫应答被引量：7
- 2016年
- 为探讨免疫增强剂(VA5)提高SPF鸡免疫功能的机理,将SPF鸡分别免疫H9亚型禽流感灭活疫苗、含VA5的H9灭活疫苗、含IL-4和/或IFN-γ真核质粒的H9亚型禽流感灭活疫苗,另设空白对照。检测免疫鸡外周血CD4^+、CD8^+T淋巴细胞亚群数目及IL-4和IFN-γ细胞因子含量的变化及血清抗体效价。结果显示,在14日龄、17日龄和21日龄和28日龄,免疫IL-4和H9、IL-4与IFN-γ和H9以及VA5佐剂与H9组的CD4^+淋巴细胞亚群上升快且比例高于其他组,免疫IFN-γ和H9、IL-4与IFN-γ和H9以及VA5增强剂与H9组的CD8^+淋巴细胞亚群上升快且比例高于其他组,IL-4的上升趋势与CD4^+细胞类似,IFN-γ的上升趋势与CD8^+类似。免疫含VA5的禽流感(H9亚型)灭活苗组在免疫后第2周、3周和4周血清HI效价达到7lg2以上,高于其他各免疫组。说明,与直接添加IL-4和IFN-γ的细胞因子质粒组相比,VA5免疫增强剂能够促进SPF鸡外周血淋巴细胞增值,提高CD4^+、CD8^+T淋巴细胞的比例,并诱导IL-4和IFN-γ细胞因子分泌。
- 陆吉虎吴培培张雪花侯继波唐应华
- 关键词：免疫增强剂CD8+T淋巴细胞细胞因子血凝抑制抗体
- 免疫增强剂提高禽用二联苗免疫效力的研究被引量：7
- 2016年
- 为评价免疫增强剂(VA5)对禽用联苗的免疫增强作用,将VA5分别与市售鸡新城疫-传染性法氏囊(新法)二联苗合用免疫SPF鸡和蛋鸡、与新城疫-H9亚型禽流感(新流)二联苗合用仅免疫SPF鸡,评价免疫后的抗体效价和SPF鸡攻毒后的保护效力。结果显示,SPF鸡或蛋鸡免疫含VA5的新法二联苗、新流二联苗后,新城疫血凝抑制(HI)抗体效价比常规苗组提前1周达到6 log2,禽流感HI抗体效价比常规苗组提前1周达到7 log2,法氏囊血清琼扩抗体和中和抗体比常规苗组均提前1周合格,且3种抗体持续高于常规疫苗组。免疫含VA5疫苗组的SPF鸡对新城疫强毒攻毒,以临床症状判断,可达全保护;以囊病变和临床症状判断,对法氏囊的攻毒提供全保护;H9变异株攻毒后不排毒。对上述3种病毒的保护力均高于常规苗。上述结果表明,VA5免疫增强剂能够提高鸡新法二联苗、新流二联苗对鸡的免疫效力,具有很好的应用前景。
- 陆吉虎吴培培张雪花侯继波唐应华
- 关键词：免疫增强剂
- 减蛋下降综合征病毒重组Knob-S基因在杆状病毒系统中的表达及其免疫原性鉴定被引量：2
- 2015年
- 为以杆状病毒系统在Sf9细胞中表达含减蛋下降综合征病毒(EDSV)重组Knob-S蛋白质来制备亚单位疫苗,采用PCR方法从鸭胚繁殖的EDSV尿囊液中扩增Knob-S基因,并克隆到p Fast Bac1中,经转化DH10Bac获得重组r Bac-Knob-S。将r Bac-Knob-S转染Sf9细胞获得重组杆状病毒,利用重组杆状病毒感染Sf9细胞表达重组蛋白质。重组Knob-S蛋白质经Western blotting和间接免疫荧光试验鉴定均为阳性。将重组Knob-S蛋白质制备成疫苗,按1羽0.3 ml(含50μg的重组病毒)免疫6周龄非免海兰褐雏鸡,在免疫后第2周可检测到血凝抑制抗体效价达8.5 lg2,在第3周达到高峰(9.5 lg2),表明重组Knob-S蛋白质具有较好的免疫原性。
- 郑金陈滔陆吉虎高峰候继波黎满香唐应华
- 关键词：真核表达杆状病毒表达系统
