国家林业局948项目(2007-G572)
- 作品数:2 被引量:26H指数:2
- 相关作者:蒋颖张尔利蒋玉文程君生毛开荣更多>>
- 相关机构:中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金:引进国际先进农业科技计划北京市自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 猪瘟病毒E2基因噬菌体展示多肽库的构建及表位鉴定被引量:12
- 2010年
- 本研究通过建立CSFV噬菌体展示多肽库,并对其进行生物淘选,以期获得E2蛋白上新的抗原表位。选择CSFV石门株(SM)和疫苗株(HCLV)为代表株,采用噬菌体展示技术,以T7select415-1b为载体,分别构建了CSFV SM株和HCLV株E2基因噬菌体展示多肽库(SM-E2库和HCLV-E2库)。通过生物淘选和噬菌体原位杂交技术,采用7株猪瘟单克隆抗体和1株猪瘟高免血清分别对构建的SM-E2库和HCLV-E2库进行抗原表位筛选。结果共筛选到了5条与E2蛋白高度同源的序列,在E2蛋白上的同源区域分别为TAVSPTTLR、YYEP、TTWKEYSH、GGQ(V)VK和PDGLPHY。结果表明,TAVSPTTLR、YYEP和TTWKEYSH序列与目前已知E2蛋白表位一致,说明它们是E2蛋白上的优势表位;GGQ(V)VK和PDGLPHY序列与预测表位一致,推测是E2蛋白上潜在的抗原表位。
- 徐和敏王琴徐璐范学政
- 关键词:猪瘟病毒E2蛋白抗原表位
- 布鲁菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用被引量:14
- 2009年
- 用BCSP31作为布鲁菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁菌种间特异性标志,建立了布鲁菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,M28,M16;犬种RM6/66;绵羊种63/290;猪种S2,rS2,S1330)不同种来源的布鲁菌菌体和基因组进行鉴定,结果牛种菌能扩增大小分别为494,223,178bp3条带,羊种菌能扩增出大小分别为733,223,178bp3条带,犬种菌能扩增出大小分别为223,178bp2条带,绵羊种菌能扩增出大小分别为976,223,178bp3条带,猪种菌能扩增出大小分别为285,223,178bp3条带,均与预期一致;而作为对照的大肠杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌和都柏林沙门菌,均未扩增出任何条带。结果表明,本研究所建立的方法具有良好的特异性,能够区分不同种源的布鲁菌,可用于布鲁菌种属的快速鉴定和流行病学调查。
- 丁家波张存帅彭小兵蒋颖程君生张尔利蒋玉文毛开荣
- 关键词:布鲁菌多重PCR
- 猪瘟病毒RT-LAMP快速诊断方法的建立
- 针对CSFV的保守区设计并筛选出一套RT-LAMP引物,以石门株为标准毒株,采用梯度稀释法对各反应要素进行优化,最终确定CSFV RT-LAMP的反应体系为:4mM镁离子浓度,0.8M甜菜碱,1.4mM dNTP mix...
- 陈蕾范学政王琴徐璐赵启祖
- 关键词:CSFVRT-LAMP
- 文献传递