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重庆市自然科学基金(2005BB5031)
重庆市自然科学基金(2005BB5031)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
王丕龙
张滨
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2009
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RNA干扰Hsp70基因表达抑制胃癌细胞增殖
被引量:2
2009年
目的构建Hsp70的短发夹状RNA(shRNA),检测其在胃癌细胞株SGC-7901中对Hsp70基因表达的抑制作用以及对肿瘤细胞增殖的影响。方法根据Hsp70编码基因,设计并合成2对反向重复序列,同时设计1对与目的基因不相匹配的重复序列作为对照组分别定向克隆至载体pTZU6+1的U6转录启动子下,构建重组质粒phsp1-siRNA,phsp2-siRNA及对照组质粒phsp3-siRNA,分别转染胃癌细胞株SGC-7901,采用RT-PCR和Western blot检测phsp-siRNA对Hsp70基因表达的抑制作用。利用AlamarBlue法检测转染后对胃癌细胞生长的影响。结果酶切电泳分析和DNA测序证实重组质粒phsp-siRNA构建成功;证实phsp1-siRNA和phsp2-siRNA对内源性Hsp70基因的表达有明显的抑制作用,同时phsp1-siRNA和phsp2-siRNA转染组细胞的生长较对照组受到明显抑制。结论构建的重组质粒phsp1-siRNA和phsp2-siRNA能特异而有效抑制内源性Hsp70基因在SGC-7901细胞中的表达,并对细胞生长有明显抑制作用。
张滨
姜政
李彦
向廷秀
陶小红
王丕龙
关键词:
RNA干扰
HSP70
短发夹状RNA
SGC-7901
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