国家自然科学基金(30070230)
- 作品数：35 被引量：76H指数：5
- 相关作者：李少林吴永忠王树斌彭志平任庆兰更多>>
- 相关机构：重庆医科大学重庆医科大学附属第一医院贵州省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 超顺磁性氧化铁标记反义寡脱氧核苷酸探针在转染细胞磁共振成像中的应用被引量：6
- 2008年
- 目的制备超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针,探讨其应用于转染细胞磁共振(MR)成像的可行性。方法采用化学交联法将SPIO标记于c-erbB2癌基因的ASODN制成ASODN探针,原子力显微镜检测探针形态,高效液相凝胶色谱法检测联接率和生物活性,聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测稳定性。将ASODN探针转染高表达c-erbB2癌基因的SK-Br3肿瘤细胞株,普鲁士蓝染色后于光学显微镜下观察细胞内铁分布,原子吸收光谱法测定细胞内铁含量,MR扫描观察细胞信号强度变化情况。结果制备的ASODN探针近似球形,粒径在25～40nm间,分散均匀,联接率为100%,仍保持原有生物活性,稳定性好。转染ASODN探针后的SK-Br3细胞胞浆内可见多少不等的蓝色铁颗粒,细胞内铁含量明显高于未转染ASODN探针的其他各组细胞(P均<0.01);MR扫描显示其信号强度最弱,信噪比值明显低于其他各组细胞(P均<0.05)。结论成功制备SPIO标记ASODN探针,该探针能有效进入SK-Br3细胞内,明显降低MR扫描下的转染细胞信号强度。
- 文明李必波欧阳羽蒋明东罗弋李少林
- 关键词：磁共振成像超顺磁氧化铁反义寡脱氧核苷酸靶向对比剂
- EGF偶联白蛋白靶向纳米载体在荷瘤裸鼠体内分布的研究被引量：5
- 2008年
- 目的:本研究旨在探讨125I-EGF-BSA靶向纳米载体在荷人乳腺癌SK-BR3裸鼠体内的分布。方法:采用超声乳化-化学交联方法制备牛血清白蛋白纳米载体,经过羧和反应将与白蛋白纳米载体表面的活性氨基与EGF进行偶联反应,制备EGF偶联白蛋白纳米载体。在裸鼠体内进行荷人乳腺癌实验,将荷瘤裸鼠随机分为3个实验组,125I-BSA非纳米载体组(直接在BSA上标记125I),125I-EGF-BSA靶向纳米载体组和125I-BSA纳米载体组,检测不同时间点各组织的放射分布。结果:125I-EGF-BSA靶向纳米载体的瘤/血比值和瘤/肌肉比值明显高于其它两个给药组,差异有统计学意义(P<0.05)。125I-EGF-BSA靶向纳米载体在荷瘤裸鼠体内的放射性瘤/血比值和瘤/肌肉比值随时间逐渐升高,在2h达峰值,后略有下降。做方差分析,同一时间点125I-EGF-BSA靶向纳米载体的放射性瘤/血比值和瘤/肌肉比值均高于其他两个给药组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。25I-EGF-BSA靶向纳米载体在肝、脾、肺等器官分布明显低于其它两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:125I-EGF-BSA靶向纳米载体对裸鼠体内的人乳腺癌SK-BR3肿瘤具有明显的靶向性,而肝、脾、肺等器官的分布少。
- 王树斌袁飞彭志平李少林孙世良罗弋宋琳
- 关键词：EGF牛血清白蛋白
- ^(99)Tc^m-ASON-EGF的制备及其药代动力学研究被引量：3
- 2006年
- 目的研究99Tcm-ASON-EGF药物的制备及其在健康兔体内的药代动力学特征。方法制备99Tcm-ASON-EGF,用放射性计数法测定兔血药浓度变化;采用3p97软件处理数据,根据AIC值、R2值、1/c与F检验,判断药物客观符合的房室模型;随后,求出其分布半衰期、消除半衰期、中央室分布容积、总表观分布容积、总清除率;最后用三氯醋酸法测定其血浆蛋白结合率。结果99Tcm-ASON-EGF的最佳房室模型是二室模型,其分布半衰期是5.28min;消除半衰期是89.23min;中央室分布容积是67.8ml;总表观分布容积是915.6ml;总清除率是7.1ml/min。与人血浆孵育1.5h后,血浆蛋白结合率为10.69%。结论99Tcm-ASON-EGF在健康兔体内的转运过程符合二室模型,具有良好的药代动力学特征。
- 黄家君董孟杰谢娟李少林
- 关键词：药物代谢动力学表皮生长因子反义寡核苷酸
- c-af-1反义寡核苷酸转染对人卵巢癌SKOV_3细胞增殖的抑制作用被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨c-raf-1基因反义寡核苷酸转染对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用及其分子机制。方法:实验分3组:正常对照组、c-raf-1正义治疗组、c-raf-1反义治疗组。脂质体转染后不同时间分别进行M TT试验、集落形成试验、荧光显微镜检测、蛋白质荧光强度测定,以观察不同条件处理后各组细胞的增殖、凋亡、蛋白质表达有无差别。结果:反义治疗组与正义治疗组比较:转染72h OD值分别0.272与1.307(P<0.05);克隆形成率分别为30.6%与75.0%(P<0.05);凋亡率分别为19.7%与9.2%(P<0.05),同时明显地下调P74蛋白质的表达水平(P<0.05)。结论:c-raf-1反义寡核苷酸对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖有明显的抑制作用。
- 吴永忠任庆兰李少林
- 关键词：反义寡核苷酸卵巢癌C-RAF-1
- c-erbB-2反义寡核苷酸对人卵巢癌SKOV_3细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨c-erbB-2基因反义寡核苷酸转染对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用及其分子机制。方法实验分空白对照组、正常对照组、c-erbB-2正义对照组及c-erbB-2反义治疗组。脂质体转染后不同时间分别进行MTT试验、集落形成试验、荧光显微镜检测、蛋白质荧光强度测定,以观察不同条件处理后各组细胞的增殖、凋亡、蛋白质表达有无差别。结果反义治疗组与正义对照组比较:转染72hOD值分别为0.201与1.298(P<0.01);克隆形成率分别为26.5%与76.5%(P<0.05);凋亡率分别为21.3%与7.5%(P<0.05),同时明显地下调c-erbB-2蛋白质的表达水平(P<0.05)。结论在卵巢癌的基因治疗中,c-erbB-2反义寡核苷酸能明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖。
- 吴永忠任庆兰李少林
- 关键词：SKOV3细胞反义寡核苷酸卵巢癌C-ERBB-2基因
- EGFR靶向纳米载体荷载c-erbB2反义寡脱氧核苷酸对人乳腺癌SK-BR3细胞的体外研究
- 2009年
- 目的:探讨利用表皮生长因子偶联牛血清白蛋白纳米载体介导c-erbB2反义寡脱氧核苷酸以增加人乳腺癌SK-BR3细胞对其的摄取.方法:采用超声乳化-化学交联及羧和反应制备EGF偶联白蛋白靶向纳米载体.99mTc通过乙酰双半胱氨酸标记于c-erbB2反义寡脱氧核苷酸,研究其稳定性,结合靶基因的特异性,并探讨人乳腺癌SK-BR3细胞对其的摄取及滞留.结果:EGF靶向纳米载体包载99mTc-乙酰双半胱氨酸-c-erbB2反义寡脱氧核苷酸组的摄取率及滞留率均高于正义寡脱氧核苷酸组和无义寡脱氧核苷酸组.同时99mTc-乙酰双半胱氨酸-c-erbB2反义寡脱氧核苷酸使用纳米载体荷载组的摄取率及滞留率均高于未使用纳米载体组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:EGF靶向纳米载体能够提高乳腺癌SK-BR3细胞对99mTc-乙酰双半胱氨酸-c-erbB2反义寡脱氧核苷酸的摄取和滞留,能达到更好的靶向作用.
- 袁飞王树斌彭志平易发平卜友泉宋方洲李少林
- 关键词：EGFR牛血清白蛋白C-ERBB2
- Bcl-2与HER-2反义寡核苷酸联合转染对人舌鳞癌Tca8113细胞的干预作用被引量：1
- 2006年
- 目的探讨Bcl-2与HER-2基因反义寡核苷酸(ASODN)联合转染对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的干预作用及其分子机制。方法实验分成正常对照组、Bcl-2正义干预组、HER-2正义干预组、Bcl-2反义干预组、HER-2 反义干预组、Bcl-2与HER-2基因反义寡核苷酸联合干预组,共6组。脂质体转染后不同时间分别进行电镜观察、 RT-PCR检测,以观察不同条件处理后各组细胞的凋亡、Bcl-2与HER-2基因表达有无差别。结果 Bcl-2与HER-2 基因反义寡核苷酸联合干预组,转染后出现凋亡小体和各期凋亡细胞;Bcl-2基因表达下降36％,HER-2基因表达下降51％。联合转染作用优于单反义基因转染作用。结论 Bcl-2与HER-2基因反义寡核苷酸联合转染能够促进肿瘤细胞凋亡并下调Bcl-2与HER-2基因的表达。
- 季平吴永忠张福军李少林
- 关键词：BCL-2HER-2基因反义寡核苷酸联合转染
- ^(99m)Tc-ASODN-EGF的小鼠体内分布和兔药动学被引量：1
- 2005年
- 目的:研究c-erbB2反义寡脱氧核苷酸(ASODN)探针99mTc-ASODN-EGF的体内分布和药动学特性。方法:小鼠尾静脉注射99mTc-ASODN-EGF 370 kBq(10μC i).150μL-1,于0.5,1,2,4,8,24 h取血、肝、脾、肾等组织器官,测定每分钟放射性计数(cpm),并准确称重,计算每克组织百分注射剂量率(%ID.g-1)。兔经左侧耳缘静脉注射99mTc-ASODN-EGF 1110 kBq(30μC i).2 mL-1,于1,3,5,10,15,20,25,30,40,60,120,240,360 m in从右侧耳缘静脉采血约0.2 mL,测定cpm,准确称重,计算每克血液每分钟放射性计数,用3P97软件计算药动学参数。结果:99mTc-ASODN-EGF在小鼠肝、肾、脾和肺的放射性分布较高,1 h的%ID.g-1分别为22±8,7.4±2.0,46±28和13±7。在心、脑、骨和肌肉的放射性分布很低。兔药动学参数符合二室模型,t12α为(0.32±0.07)h,t12β为(9±3)h,Vc为(1.2±0.8)cpm.kg-1,Cl为(0.061±0.023)cpm.h-1。结论:99mTc-ASODN-EGF的组织器官分布和药动学特性能满足临床显像的要求,可用于肿瘤靶基因的显像。
- 谢娟李少林张玉诺刘方欣
- 关键词：药动学
- 脂质体-c-erbB-2反义寡核苷酸对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用被引量：3
- 2003年
- 目的 探讨c erbB 2反义寡脱氧核苷酸 (ASODN )对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法 将 15只裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型 ,然后随机分成 3组予以不同条件处理 :对照组 (腹腔注射转染液和脂质体 ) ,正义治疗组 (腹腔注射脂质体 c erbB 2 -SODN ) ,反义治疗组 (腹腔注射脂质体 c erbB 2 -ASODN )。治疗期间定期观测裸鼠体重和肿瘤体积 ,计算抑瘤率及肿瘤缩小率。利用RT -PCR技术比较治疗后各组肿瘤组织中c erbB 2基因水平。结果 反义治疗组与正义治疗组的抑瘤率分别为 71.2 %和 7.6% ,反义治疗组肿瘤缩小率为 2 2 .7% ,与正义治疗组相比较有显著性差异。各组裸鼠体重变化无明显差异。RT -PCR结果显示反义治疗组c erbB 2表达水平降低约 61.0 %。结论 脂质体 c erbB 2 -ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤有一定的治疗作用 ,可能成为日后卵巢癌基因治疗的重要途径。
- 吴永忠任庆兰李少林
- 关键词：反义寡脱氧核苷酸C-ERBB-2基因卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤
- 分子影像学中的肿瘤反义基因显像被引量：4
- 2007年
- 分子影像学是在分子水平针对活体特征和生物进程的一种成像技术，相对于传统的影像学，它偏向于了解疾病的基础变化、基因分子水平的异常，而不是对由这些分子改变所构成的最终结果进行成像。所以，它最突出的特点，就是用影像手段非创伤性地对活体内参与生理和病理过程的分子进行定性或定量的可视化观察。在分子成像中，制备特异性高亲和力的靶向探针是显像的关键因素，也是进行分子影像学研究的先决条件。研究显示，采用反义基因技术制备的癌基因特异性探针，能够提高探针在肿瘤组织内的靶，非靶比值，经相应的成像系统扫描，可从影像上实现对基因表达的有效检测，从而对肿瘤作出早期、特异性的诊断，因此成为生命科学关注的一个焦点。
- 文明柏玮李少林
- 关键词：分子影像学基因显像肿瘤反义分子水平病理过程
