国家自然科学基金(39570286)
- 作品数:6 被引量:29H指数:3
- 相关作者:王献华张丽郝小惠杨方张尚明更多>>
- 相关机构:华北煤炭医学院天津市人民医院华中科技大学更多>>
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- 矽肺患者肺泡巨噬细胞培养上清对人胚肺成纤维细胞c—myc基因表达的影响被引量:3
- 2008年
- 目的探讨矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)培养上清对人胚肺成纤维细胞(HEFB)c—myc基因表达的影响。方法AM分为加尘组(SiO2,30μg/ml)和对照组,培养1、2、6、12、24和36h,收集培养上清。Ⅲ代HEFB用质量分数为0.5%的血清培养液培养48h使大部分细胞处于静止期后,加入SiO2刺激6h的AM培养上清(S6组),用反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)及Westemblot方法观察c—mycmRNA和蛋白的时程变化。然后将各组AM上清与静止状态的HEFB孵育2和7h,观察c—mycmRNA和蛋白表达的变化。结果HEFB在静止状态时c—mycmRNA和蛋白的表达为0,在对照组中,培养不同时间的AM上清刺激了c—mycmRNA及蛋白的表达,以AM培养12h的上清作用最明显,比值分别为0.749±0.088和0.759±0.101。加尘组中各上清也刺激了c—mycmRNA和蛋白的表达,但作用高峰提前,以SiO2刺激6h的上清作用最明显,比值分别0.982±0.147和0.978±0.141。与同期对照相比,SiO2刺激1、2和6h的AM上清诱导mRNA和蛋白表达增多,差异有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。结论SiO2激活的AM培养上清可促进HEFBc—myc基因的表达。
- 孙影伊雪张雪鹏杨方张尚明孙树勋
- 关键词:成纤维细胞
- SiO_2对人肺泡巨噬细胞核因子-κB表达的意义被引量:3
- 2006年
- 目的:探讨二氧化硅(SiO2)对人肺泡巨噬细胞核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)表达的影响。方法:收集硅肺患者肺泡灌洗液中的肺泡巨噬细胞(AM),在体外再次染尘和无血清培养基培养3、6、12、18、24、36h,用免疫组化检测AM中NF-κB的表达。结果:处理组(AM二次染尘,S组)NF-κB的表达明显上调,并且随刺激时间不同表达量不同,于18 h达高峰。处理组NF-κB的表达在3、6、12、18、24、36 h均高于对照组(矽肺患者AM,C组)。结论:SiO2可诱导AM的NF-κB的高表达,提示其在肺纤维化过程中起重要作用。
- 赵静王献华吴秀珍任鹏
- 关键词:二氧化硅
- SiO_2对大鼠肺泡巨噬细胞原癌基因c-sis表达影响的体外研究
- 2003年
- 目的 探讨SiO2 对大鼠肺泡巨噬细胞原癌基因c sis表达的影响以期进一步了解原癌基因c sis在矽肺发病中的作用。方法 采用支气管肺泡灌洗方法获得肺泡巨噬细胞 (alveolarmacrophage ,AM)。体外予SiO2 对AM进行不同时间的处理 ,利用RT PCR方法检测c sismRNA表达 ,结果用计算机自动分析系统进行定量分析。结果 AM中c sis在SiO2 处理后存在高表达 ,处理时间不同其表达量也不同 ,3 0min即有表达 ,1h表达达高峰 ,以后随处理时间的延长表达量逐渐下降 ,各时间点结果与不加SiO2 处理的同期对照组相比差异均有显著性 (P <0 0 1)。结论 SiO2 可诱导AM原癌基因c sis出现高表达 ,提示原癌基因c sis可能参与矽肺纤维化早期的形成。
- 王玉双孙树勋张尚明
- 关键词:肺泡巨噬细胞原癌基因血小板源生长因子矽肺
- 二氧化硅刺激矽肺患者肺泡巨噬细胞介导的人胚肺成纤维细胞增殖及对胶原合成分泌的影响被引量:16
- 2007年
- 郝小惠张丽王献华
- 关键词:二氧化硅
- 矽肺肺泡巨噬细胞对人胚肺成纤维细胞Ⅰ型胶原表达的体外研究被引量:7
- 2007年
- 目的探讨矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)是否通过影响肺成纤维细胞(FB)胶原的表达,参与矽肺纤维化的发生发展。方法收集矽肺患者AM,经SiO2体外刺激18h收集培养上清,与人胚肺FB共同孵育6、12、18、24、36、48、72h,用^3H-脯氨酸掺入检测48h胶原的合成与分泌,免疫细胞化学方法、Western blot方法检测各时间点Ⅰ型胶原表达。结果经SiO2刺激矽肺患者AM培养上清,可使FB中Ⅰ型胶原的表达增高,实验组48h细胞内、外3H-脯氨酸掺入值分别为1259.500±73.879、790.500±70.315,免疫细胞化学染色的积分光密度值为0.341±0.011,Western blot条带扫描灰度值为14.218±0.342,均明显高于空白对照组及AM对照组,差异有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。结论SiO2可通过AM介导影响FB中Ⅰ型胶原表达,参与肺纤维化的形成。
- 郝小惠王献华张丽杨方
- 关键词:成纤维细胞
- 过氯酸铵对大鼠肺组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达的研究被引量:2
- 2007年
- 目的探讨过氯酸铵(AP)对大鼠肺组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响。方法大鼠气管内一次性注入AP染毒,AP染毒剂量分低、中、高3个剂量组(48、96、192mg/kg),同时设阴性对照组(生理盐水)和阳性对照组(博来霉素5mg/kg)。分别于第3、7、14、28天处死大鼠。通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达水平。结果高剂量组第7、14、28天(1.93±0.41、3.50±0.90、2.33±1.12)以及中剂量组第28天(2.58±0.86)Ⅰ型胶原mRNA表达水平分别明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);低剂量组第14、28天和高剂量组第14天Ⅰ型胶原mRNA表达水平(1.99±0.67、1.85±0.67、3.50±0.90)比同组第3天明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05)。第14、28天中剂量组(1.80±0.51、2.16±0.87)和高剂量组(2.60±1.00、1.46±0.36)m型胶原mRNA表达水平比阴性对照组明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01);高剂量组第14天(2.60±1.00)和中剂量组第28天(2.16±0.87)Ⅲ型胶原mRNA表达比第3天明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论AP可使大鼠肺组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达明显升高,但AP是否具有致肺纤维化作用,仍需进一步深入研究。
- 孙敬智宋明芬彭开良杨磊
- 关键词:过氯酸铵胶原肺纤维化