福建省科技重点项目(2010Y0010)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 相关作者:严延生翁育伟王金章黄萌林梅清更多>>
- 相关机构:福建省疾病预防控制中心福建医科大学福建省泉州第一医院更多>>
- 发文基金:福建省科技重点项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 4种血清型登革病毒外膜蛋白重组抗原的表达被引量:2
- 2012年
- 目的在大肠杆菌中表达重组1-4型登革病毒外膜蛋白,为研制登革病毒抗体快速检测试剂提供原材料。方法根据基因序列设计、合成引物并经PCR方法扩增1-4型登革病毒部分外膜蛋白基因片段,克隆至表达载体pET30a(+)并在大肠杆菌中诱导表达。小量表达以及纯化后的重组蛋白做SDS-PAGE分析并经WB实验验证其免疫活性。结果酶切消化及电泳结果表明4种重组质粒均构建成功。经IPTG诱导后,4种重组大肠杆菌均可表达相应的重组蛋白。纯化前后的重组蛋白经WB实验表明,4种重组蛋白均能与对应型别的病毒感染者血清反应。结论利用大肠杆菌表达系统,成功表达重组1-4型登革病毒外膜蛋白,4种型别的重组蛋白可被各自血清型的抗体结合,均具有免疫反应活性。
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- 关键词:登革病毒外膜蛋白重组抗原
- 登革病毒IgM抗体快速检测试纸条检测效果的初步研究
- 2012年
- 目的初步评价登革病毒IgM抗体免疫层析试剂条的检测效果。方法应用4种血清型登革病毒重组外膜抗原,组装登革病毒IgM抗体通用型和分型免疫层析试纸条,检测登革病毒IgM抗体,结果与捕获法ELISA比较。同时观察分型试纸条的血清学分型效果。结果以4型抗原混合组装的通用型试纸条检测结果与捕获法ELISA检测结果比较,二者的总体符合率为90.56%,检测结果无显著差异(P>0.05)。在与其它传染病交叉反应测试中,通用型检测试剂较捕获法ELISA具有更低的交叉反应。分型结果表明,除登革I型外,其它型别试纸条均能检出非对应型别的IgM抗体。结论利用登革病毒重组抗原组装的通用型IgM抗体免疫层析试纸条与捕获法ELISA检测效果相近,具有实际应用的潜力,但需要进一步做大样本的评估。而分型试纸条分型效果不佳,需要进一步的改进。
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- 关键词:登革病毒IGM免疫层析血清分型