国家重点基础研究发展计划(2006cb500706)
- 作品数：15 被引量：91H指数：6
- 相关作者：陈生弟杨红旗丁健青王刚陆国强更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院上海交通大学健康科学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 阿尔茨海默病早期诊断的血液生物标记物研究进展被引量：4
- 2012年
- 目前研究发现:①在认知功能损害前10年,阿尔茨海默病(AD)的病理生理进程已经开始,该部分人群称之为临床前AD;②在轻度认知功能障碍(MCI)患者随访中发现,部分患者可进展为AD,对这些人群进行早期诊断和干预,可能有效遏制或延缓其进展为AD。目前,AD早期诊断的研究主要聚焦在颅脑影像学及体液生物标记两方面,其中血液生物标记因标本获取简便,与AD病理过程联系较紧密,诊断敏感度及特异度较高而倍受关注,本文就早期诊断AD潜能的血液生物标记物研究进展进行综述。
- 徐旭华汤荟冬陈生弟
- 关键词：阿尔茨海默病生物学标记血液
- 内向整流钾通道6.2亚基对鱼藤酮诱导PC12细胞毒性的调节作用及其相关信号通路的实验研究
- 2012年
- 目的:探讨ATP敏感性钾离子通道亚基内向整流钾通道(Kir)6.2过表达对鱼藤酮诱导的大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞毒性作用的调节作用及其相关信号通路。方法:转染Kir6.2质粒于PC12细胞48 h后,分别采用细胞免疫荧光和Western blot方法观察Kir6.2的表达,然后用水溶性四氮唑盐(WST-1)法检测3组细胞(正常对照组、转染组、空载体组)在500 nmol/L鱼藤酮处理24 h后的细胞活力;Western blot检测胞内蛋白激酶C(PKC)及磷酸化PKC(p-PKC)的变化。结果:细胞免疫荧光及Western blot结果显示转染组Kir6.2在细胞中表达较正常组和空载体组明显增高,WST-1检测发现转染组细胞活力较其他2组增高(P<0.05);Western blot结果显示鱼藤酮处理后p-PKC较处理前表达量增加,且转染组p-PKC表达量较其他2组均增高(P<0.05)。在Kir6.2过表达的PC12细胞中,p-PKC的活性上调,且不被PKC抑制剂所抑制。结论:Kir6.2过表达可拮抗鱼藤酮诱导的PC12细胞毒性,且这一神经保护作用与PKC信号通路相关,尤其是p-PKC。
- 刘小坤王刚田立鹏张煜盛呈雨陈生弟
- 关键词：ATP敏感钾通道鱼藤酮
- 氯化锂抑制β-淀粉样蛋白诱导细胞Tau蛋白磷酸化被引量：5
- 2008年
- 目的探讨GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl)在β-淀粉样蛋白25～35片断(Aβ25-35)诱导的细胞Tau蛋白磷酸化中的作用及机制。方法MTT法观察不同浓度的LiCl(1、5、10、20mmol.L-1)单独作用24h,对SH-SY5Y细胞存活率的影响;20μmol.L-1的凝聚态Aβ25-35作用于SH-SY5Y细胞不同时间点,蛋白免疫印迹法研究Tau蛋白磷酸化位点(Ser199、Ser396及Tau1)水平的变化;LiCl(20mmol.L-1)预处理细胞1h后,观察Aβ的作用有无变化及可能的作用机制。结果不同浓度的LiCl作用24h后,MTT法示细胞存活率无明显变化(P>0.05);20μmol.L-1Aβ25-35作用不同时间点后,Tau蛋白在Ser396、Ser199位点的磷酸化水平在3h逐渐增加,6h达到最高峰,12h后又逐渐下降,在这3个时间点的增加量均具有统计学意义(P<0.05),而对非磷酸化Tau1没有影响(P>0.05);LiCl预处理可抑制Aβ25-35的作用(P<0.05),并可诱导失活形式的GSK-3β在Ser9位点的磷酸化(p-GSK-3βSer9)表达增高。结论GSK-3β参与了Aβ25-35诱导细胞Tau蛋白磷酸化的作用,LiCl可通过诱导失活形式的p-GSK-3βSer9表达增高而抑制GSK-3β的活性,进而抑制Aβ诱导的细胞Tau蛋白磷酸化。该实验为研究AD的发病机制及探索有效治疗药物提供了重要的理论基础。
- 孙治坤杨红旗陆国强丁健青陈生弟
- 关键词：Β-淀粉样蛋白氯化锂阿尔采末病GSK-3Β
- 尼古丁对Aβ25-35诱导学习记忆障碍小鼠的治疗作用被引量：5
- 2009年
- 目的探讨nAChR激动剂尼古丁对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的学习记忆障碍小鼠模型的治疗作用以及可能的作用机制。方法小鼠侧脑室注入凝聚态Aβ25-354.5μl。次日,用药组给予尼古丁0.2和2 mg.kg-1(ip,bid×7d),对照组及模型组ip生理盐水。给药结束4 d后(造模成功后11 d),进行各组行为学及皮层、海马组织乙酰胆碱酯酶(AChE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)活性指标的检测。结果定位航行实验发现,训练d 4,模型组小鼠的上台潜伏期和游泳距离明显高于对照组和0.2、2 mg.kg-1尼古丁治疗组(P<0.01);空间搜索实验发现,实验d 5撤除平台,模型组在平台所在象限(第Ⅱ象限)中游泳的时间百分比明显低于对照组(P<0.01)和0.2及2 mg.kg-1尼古丁治疗组(P<0.05);模型组在平台所在象限(第Ⅱ象限)中游泳的距离百分比明显低于对照组(P<0.01),但与0.2及2 mg.kg-1尼古丁治疗组无差别(P>0.05)。酶活性检测发现尼古丁治疗组的AChE及ChAT的活性较对照组明显升高(P<0.01);尼古丁治疗组(2 mg.kg-1)MDA的活性较模型组明显降低(P<0.01),尼古丁治疗组(0.2 mg.kg-1)的活性较模型组无改变(P>0.05);尼古丁治疗组的GSH活性较模型组明显升高(P<0.01)。结论尼古丁能够改善Aβ25-35诱导痴呆小鼠的学习记忆功能障碍,该作用与其增强ChAT的活性以及抗氧化应激有关。
- 任汝静王刚潘静朱亮张施孙小康陈红专陈生弟
- 关键词：尼古丁学习记忆
- 姜黄素对帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元损伤的保护作用被引量：13
- 2007年
- 目的研究姜黄素对由MPTP诱发的帕金森病小鼠模型的脑保护作用及其可能机制。方法应用免疫组织化学染色法和蛋白质印迹法(Western blotting)分别观察姜黄素干预前后帕金森病小鼠中脑黑质-纹状体系统中酪氨酸羟化酶、胶质纤维酸性蛋白阳性神经元数目的变化,以及酪氨酸羟化酶、诱导型一氧化氮合酶和胶质纤维酸性蛋白表达水平的变化。结果MPTP组小鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶和胶质纤维酸性蛋白阳性神经元数目明显减少,与正常对照组及治疗组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。经不同剂量(5mg/kg、50mg/kg和150mg/kg)的姜黄素干预治疗后,小鼠中脑纹状体中的酪氨酸羟化酶蛋白表达水平(相对灰度值)明显升高,而黑质中诱导型一氧化氮合酶和胶质纤维酸性蛋白表达水平明显降低,与MPTP组比较差异均有统计学意义(P<0.05);MPTP组与溶剂对照组(MPTP+DMSO)之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论姜黄素可以有效地拮抗MPTP诱导的帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的丢失,其机制可能与姜黄素降低黑质多巴胺能神经元活性氧含量以及抑制炎症反应等作用有关。
- 潘静丁健青陈生弟
- 关键词：姜黄素帕金森病酪氨酸单氧化酶神经胶质原纤维酸性蛋白质
- PI3K／Akt途径在Aβ诱导细胞凋亡过程中的作用被引量：17
- 2009年
- 目的:探讨凝聚态β-淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导细胞凋亡过程中PI3K/Akt转导通路的作用。方法:MTT法检测Aβ25-35作用不同时间后PC12细胞活力的变化;Annexin V-PI双染检测Aβ25-35作用不同时间后PC12细胞的凋亡情况;Western blotting检测Aβ25-35作用不同时间后p-AktSer473、p-GSK-3βSer9的水平变化。结果:20μmol/LAβ25-35作用不同时间(30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h)后,MTT结果显示细胞活力均明显下降(P<0.05);Annexin V-PI结果显示,Aβ25-35作用后均可引起细胞凋亡(P<0.05);Western blotting结果表明,Aβ25-35作用于细胞后,p-AktSer473和p-GSK-3βSer9的表达均出现迅速的下调(P<0.05),在作用3 h时两者的表达出现迅速的上升,在作用6 h时又出现表达的下调,两者在该时间段的变化趋势相符。p-AktSer473在Aβ25-35作用于细胞12 h后出现逐渐回升趋势,但在48 h时仍没有达到正常水平;而p-GSK-3βSer9的表达在Aβ25-35作用于细胞12 h后出现迅速的升高(P<0.05),而后逐渐恢复到正常水平。结论:PI3K/Akt信号通路可能参与了Aβ诱导的细胞损伤,本研究为AD的发病机制及选择合适的药物作用时点提供了新思路。
- 孙治坤潘静杨红旗梁梁丁健青陈生弟
- 关键词：淀粉样Β蛋白细胞凋亡PI3K/AKT信号通路阿尔茨海默病
- GDNF对多巴胺能神经元作用机制的研究进展被引量：6
- 2006年
- 胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)是神经保护治疗帕金森病(Parkinson's d isease,PD)的一种神经营养因子,越来越多的在体和离体实验研究显示GDNF是中脑多巴胺(dopam inergic neuron,DA)能神经元的有效存活因子。GDNF受体是由结合在细胞质膜外的糖基化磷酯酰基(glycosyl-phosphatidylinositol,GPI)和GDNF功能性孤儿受体酪氨酸激酶Ret蛋白质组成。特异性的GDNF与其受体结合后,激活其胞内部分c-Ret,经由不同的第二信使来传递信号发挥作用。主要可能的机制有顺式作用和反式作用。而探索GDNF促进中脑黑质DA能神经元再生修复的可能机制,为进一步深入研究GDNF的作用机制提供科学依据。
- 潘静陈生弟
- 关键词：胶质细胞源性神经营养因子多巴胺能神经元
- 促红细胞生成素对Aβ25-35诱导的细胞tau蛋白磷酸化的抑制作用被引量：1
- 2009年
- 目的探讨促红细胞生成素（Epo）对凝聚态β淀粉样蛋白25—35片断（Aβ25-35）诱导的SH—SY5Y细胞tau蛋白磷酸化的影响。方法MTT法观察不同浓度的Epo（0、5、10、20、50U1单独作用24h对SH—SY5Y细胞存活率的影响；20μmol／L的凝聚态Aβ25-35作用于SH—SY5Y细胞不同时间点（0min、30min、1h、3h、6h、12h、24h1后，Western blot法检测tau蛋白磷酸化（Ser199、Ser396及taul）水平的变化；观察不同浓度的Epo（5、10、20u）预处理细胞3h后对Aβ25-35作用的影响以及P13K／Akt抑制剂LY294002（50μmol／L）预处理细胞1h后EpO抑制作用受到的影响。结果不同浓度的Epo作用24h后，MTT示细胞存活率无明显变化。20μmol／L的Aβ25-35作用不同时间点后，tau蛋白Ser396、Ser199位点的磷酸化水平3h时开始增加，6h达到最高峰，12h后又逐渐下降，24h时仍维持较高水平，与0min、30min时比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；而总的tau蛋白没有任何变化。5、10、20U Epo预处理均可有效地抑制Aβ25-35引起的Ser396、Ser199位点的磷酸化，与正常对照组比较，差异均有统计学意义（氏0．05）。LY294002预处理细胞后，Epo的作用受到抑制。结论Epo可通过P13K／Akt途径对Aβ25-35诱导的tau蛋白磷酸化发挥抑制作用，本研究为研究AD的发病机制及探索新的有效治疗药物提供了重要的理论基础。
- 孙治坤杨红旗陆国强丁健青陈生弟
- 关键词：Β淀粉样蛋白TAU蛋白磷酸化促红细胞生成素阿尔茨海默病
- K252a通过抑制MLK3的活化保护多巴胺能神经元
- 目的研究K252a对6-羟基多巴胺（6-OHDA）单侧损毁诱发的帕金森病（PD）大鼠模型的脑保护作用及其可能机制。方法将100只SD大鼠随机分为假手术组、6-OHDA模型组、6-OHDA+DMSO及6-OHDA+K252...
- 潘静王志全洪桢孙治坤陈生弟
- 关键词：K252A6-羟基多巴胺帕金森病神经保护
- 文献传递
- 红景天甙对帕金森病模型小鼠PI3K/蛋白激酶B信号转导途径的影响被引量：13
- 2008年
- 目的研究红景天甙对帕金森病(PD)小鼠脑组织中PI3K/蛋白激酶B(PKB)信号转导途径的影响及其神经保护作用的机制。方法30只C57BL雄性小鼠随机分为PD组、红景天甙组和正常对照组,每组10只。用蛋白印迹法检测小鼠纹状体中Akt/pAkt(ser473)及其下游糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)/磷酸化糖原合成酶激酶-3β[pGSK-3β(ser9)]、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、BAD和Bcl-2的表达。结果红景天甙组及正常对照组纹状体pAkt(ser473)表达(0.5487±0.01376,0.5055±0.0524)比PD组(0.3069±0.08734)显著增高(均P<0.05);pGSK-3β(ser9)蛋白表达(0.6959±0.3327)较PD组(0.4884±0.02257)显著增高(P<0.05)。红景天甙组的Bcl-2/BAD比值(1.2669±0.231)明显高于PD组(0.4583±0.088)(P<0.05)。红景天甙组小鼠纹状体中活化的Caspase-3蛋白(0.0874±0.0109)比PD组(0.1409±0.089)明显下降(P<0.05)。结论红景天甙能使PI3K/PKB信号转导途径中Akt在ser473位点以及GSK-3β在ser9位点的磷酸化程度增高、上调Bcl-2/BAD比值、抑制Caspase-3蛋白的活化,发挥神经保护作用。
- 张宇红叶民汪锡金王刚杨红旗马建芳王志全陈生弟
- 关键词：红景天甙帕金森病P13K蛋白激酶B
