上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划(98BR029)
- 作品数：20 被引量：135H指数：5
- 相关作者：王健民江千里周虹江汕温丽敏更多>>
- 相关机构：第二军医大学南京医科大学南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金：上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 异基因造血干细胞移植的几个重要问题被引量：1
- 2002年
- 王健民
- 关键词：异基因造血干细胞移植骨髓外周血脐带血
- 无血缘关系供体外周血造血干细胞移植治疗白血病的临床研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :观察无血缘关系供体外周血造血干细胞移植 (PBSCT)治疗白血病的疗效及其并发症的防治。 方法 :用 HL A配型完全相合的无关供体移植治疗白血病 3例。预处理方案为 :例 1采用环磷酰胺 (CTX) +全身照射 (TBI) ;例 2采用 CTX+TBI+抗胸腺细胞球蛋白 (ATG) ;例 3采用 CTX+TBI+ATG+依托泊苷 (VP16 )。 3例患者输入单个核细胞数 (/ kg)分别为5 .90× 10 8、6 .43× 10 8和 6 .0 1× 10 8,CD34 +细胞 (/ kg)分别为 6 .34× 10 6、2 .6 2× 10 6和 2 .30× 10 6;急性移植物抗宿主病(GVHD)预防采用霉酚酸酯 (MMF)联合环孢素 A (Cs A)和短程甲氨蝶呤 (MTX)方案。 结果 :3例患者均顺利造血重建 ,无 1例发生 度或 度以上急性 GVHD;例 1患者移植后 180 d细胞遗传学复发 ,停用 Cs A后 2个月 Ph染色体消失 ,且出现局限性慢性 GVHD;例 2患者移植后 2 2 0 d出现局限性慢性 GVHD;例 3患者移植后 30 0 d有复发趋势 ,停用 Cs A 2周后完全缓解。结论 :无关供体 PBSCT可用于治疗白血病 ;MMF联合 Cs A和短程 MTX可用于预防无关供体移植急性 GVHD的发生。
- 宋献民王健民侯军杨均仪杨颖丁晓勤龚胜蓝
- 关键词：造血干细胞移植外周血白血病
- 异基因外周血干细胞移植治疗急性白血病的疗效及卫生经济学分析被引量：2
- 2002年
- 目的 :评估异基因外周血干细胞移植治疗急性白血病的疗效与卫生经济效率。 方法 :回顾性分析 2 0例缓解期急性白血病患者行人类白细胞抗原 (HL A )相合外周血干细胞移植 (移植组 )病例资料 ,另对应每例患者各选取 2例常规化疗病例(化疗组 )作对照 ,比较两组病例的预后及经济费用。 结果 :移植组 3年生存率、复发率分别为 (6 5 .3± 12 .4) %和(15 .6± 7.1) %,化疗组分别为 (2 9.5± 8.2 ) %和 (6 7.2± 5 .8) %,统计学分析有显著性差异 (P<0 .0 1) ,而比较两组病例的 3年治疗费用无明显差异 (P>0 .0 5 ) ;计算成本效果比 ,异基因外周血干细胞移植挽回 1例死亡所耗费成本为 48.7万元 ,明显低于常规化疗的 6 7.4万元。 结论 :异基因外周血干细胞移植疗效好 ,经济效率高。
- 倪雄王健民章卫平许小平宋献民侯军童书鹏闵碧荷
- 关键词：细胞移植外周血异基因急性白血病卫生经济学
- 外周血干细胞移植中出血性膀胱炎的病因与防治被引量：19
- 2002年
- 目的 :观察外周血干细胞移植 (PBSCT)中出血性膀胱炎 (HC)的发病情况 ,探讨其发病原因及防治效果。方法 :1996年 5月至 2 0 0 2年 5月采用 PBSCT治疗各类血液病 80例 ,其中异基因移植 5 0例 ,自体移植 30例。预处理方案为 CTX 12 0mg/ kg(+VP16 2 0 mg/ kg) +TBI 6 .5～ 8.0 Gy。 HC的预防随机分成 2组 :A组 (38例 )采用常规水化、碱化 ;B组 (4 2例 )在常规水化、碱化基础上加用美司钠 ,用法为 CTX后 0、4、8h各静推 1次 ,每次剂量为每日 CTX总量的 2 0 %。结果 :80例患者中共有 10例出现 HC(12 .5 %) ,均为迟发性 , 度 5例 , 度 4例 , 度 1例。 A组有 8例出现 HC(2 1.1%) ;B组仅有 2例 HC(4 .8%,P<0 .0 5 ) ;异基因移植组有 9/ 5 0出现 HC(18.0 %) ,自体移植组仅有 1/ 30 (3.3%,P<0 .0 5 ) ;急性移植物抗宿主病(GVHD)阳性组出现 HC为 7/ 2 0 (35 .0 %) ,而阴性组仅为 2 / 30 (6 .7%,P<0 .0 5 )。 5例病毒感染者中 3例发生 HC。治疗上除充分补液、碱化尿液和加强利尿外 ,加用前列腺素 E1 脂微球制剂 (L ipo PGE1 ) ,有病毒感染者予阿昔洛韦或更昔洛韦治疗。全部病例经上述处理均获痊愈。结论 :HC的发生除 CTX等药物损害外 ,还与 GVHD及病毒感染有关 ;在常规水化、碱化基础上加用美司钠可有效降低
- 郭超章卫平王健民倪雄丁晓勤
- 关键词：病因造血干细胞移植外周血出血性膀胱炎美司钠
- D-氨基酸氧化酶/D-丙氨酸系统杀伤K562e细胞的作用机制探讨被引量：7
- 2002年
- 目的 :探讨 D-氨基酸氧化酶 (DAAO) / D-丙氨酸 (D - Ala)系统用作自杀基因治疗白血病的作用机制。方法 :以 D- Ala杀伤稳定表达 DAAO和绿荧光蛋白 (GFP)的高致瘤性 K 5 6 2 e单克隆细胞 KDf Gd、KDf GC,应用 MTT法检测细胞存活率 ,并用酚红氧化法测定培养上清 H2 O2 和 L owry法测定细胞蛋白数量 ,流式细胞仪测定细胞 GFP的荧光强度。结果 :在 2 5 m mol/ L D-Ala作用下 2 4 h即可完全杀死 KDf Gd细胞 ,当 D- Ala为 2 0 mmol/ L 时延长作用时间至 4 8h,杀伤率由 6 4 %增加至 96 .8% ,而D- Ala≤ 15 mm ol/ L 时杀伤率增加不明显。低于 2 0 m mol/ L,D- Ala对 K5 6 2 e几乎无杀伤作用。培养上清的 H2 O2 变化与杀伤转基因细胞作用相一致。 结论 :DAAO/ D- Ala系统可能是通过产生 H2 O2 发挥杀伤转基因 K5 6 2
- 翟勇平王健民张雨生吕书晴
- 关键词：D-氨基酸氧化酶过氧化氢白血病
- 粒细胞集落刺激因子联用激素和(或)免疫抑制剂动员供体小鼠外周血造血干细胞对其免疫系统的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联用激素和(或)免疫抑制剂动员供体小鼠外周血造血干细胞对其免疫系统的影响。方法:根据对供体C57BL/6小鼠动员方案不同分为4组,G-CSF组(250μg/kg,连用4 d),G-CSF(250μg/kg,共4 d)+甲泼尼龙组(100 mg/kg,第3天),G-CSF(250μg/kg,共4 d)+甲泼尼龙(100 mg/kg,第3天)+环孢素A组(100 mg/kg,第3天)和PBS对照组。观测动员后供体小鼠T淋巴细胞对BALB/c小鼠脾细胞的单向混合淋巴细胞反应(MLR),ELISA法测定供体鼠脾细胞培养上清中细胞因子IFN-γI、L-4、TGF-β1的水平,RT-PCR半定量测定IFN-γI、L-4的mRNA水平。结果:3个实验组MLR刺激效率分别为42%、21%和39%,与PBS对照组的68%相比有显著性差异(P<0.01);各实验组与PBS对照组相比,培养上清中IFN-γ表达明显减低,IL-4、TGF-β1明显增高(P<0.01),而各实验组之间无显著差异;RT-PCR半定量测定发现IFN-γmRNA表达明显减低,IL-4明显增高(P<0.01)。结论:G-CSF联用激素和(或)免疫抑制剂动员供体小鼠外周血造血干细胞可降低其T淋巴细胞异基因反应性,改变其细胞因子分泌类型,可能易于诱导受体免疫耐受。
- 曹永彬王健民解琳娜江千里高磊邱慧颖周虹
- 关键词：粒细胞集落刺激因子造血干细胞移植
- YCD基因修饰对小鼠P388白血病的体内治疗作用研究被引量：3
- 2003年
- 目的 :以P388/DBA小鼠白血病模型 ,探讨新型自杀基因YCD的体内治疗作用。方法 :用逆转录病毒载体将YCD基因导入 ,筛选P388 YCD eGFP细胞克隆 ,以P388 eGFP和野生性 (wt)P388细胞为对照。 (1) 3组细胞腹腔接种给DBA小鼠 (n =5 ) ,5× 10 6/只 (下同 ) ,观察致病性 ;(2 ) 3组细胞腹腔接种给DBA小鼠 (n =5 ) ,分别以 5 FC治疗 2周 ,观察疗效 ;(3) 2组× 5只小鼠腹腔接种P388 YCD eGFP ,5 FC 5 μmol/L·d-1× 2d或PBS治疗 ,根据小鼠存活时间推算杀伤效率。以流式细胞仪、冰冻切片和HE切片检测各脏器中白血病细胞的分布和变化。结果 :基因导入对细胞的生物学特性影响不显著 ;5 FC治疗 2周 ,YCD组小鼠存活 (17.8± 1.89)d ,而eGFP组和wtP388组分别存活 (7.8± 1.10 )d和 (7.7± 1.15 )d (P <0 0 5 ) ;5 FC治疗 2d的杀伤率达 99.6 %。结论 :YCD转基因细胞在体内可被 5 FC有效杀灭 ,该系统具有应用前景。
- 江千里王健民温丽敏张雨生江汕胡晓霞周虹
- 关键词：修饰小鼠P388白血病
- 西司他丁钠+亚胺培南消除细胞培养中细菌污染的研究被引量：5
- 2004年
- 目的 :研究西司他丁钠 +亚胺培南 (泰能 )清除细胞培养中细菌污染的可行性。 方法 :将 1 5批细胞培养中已发生细菌污染的细胞 ,用含泰能 1 0～ 1 0 0 μg/ ml的 PBS洗涤 3次 (PBS用量逐次递增 ) ,第 3次洗涤之前将细胞悬浮于含 1 0 0 μg/ m l泰能的完全培养液 1 .5 ml中 37℃孵育 30 min;然后细胞移入含 1 0 0 μg/ m l泰能的完全培养液中培养 ,更换含 1 0 0 μg/ ml泰能的完全培养液 1次 / d,共 3d。结果 :成功消除 1 4批细菌感染 ,另 1批加用万古霉素后亦获成功。结论 :泰能可以有效消除细胞培养中的细菌污染 。
- 江千里王健民江汕许育温丽敏周虹闵碧荷
- 关键词：西司他丁钠亚胺培南细胞培养细菌污染细胞生长
- 纯化的自体CD34^+细胞移植治疗恶性血液病临床对照观察
- 2004年
- 目的 分析CD34+ 纯化自体造血干细胞移植治疗恶性血液病的临床疗效。方法 11例病人进行了CD34+ 纯化自体造血干细胞移植 ,8例患者进行了未分选的自体造血干细胞移植 ,动员方案为CTX+Vp 16联合G CSF。CD34+ 细胞分选采用CliniMACS系统。结果 分选后CD34+ 细胞纯度达到(88.99± 6 .88) % ,回收率达到 (6 9.0 6± 17.0 7) %。 11例分选患者感染率为 (5 / 11例 ) ,复发率为 (1/ 11例 ) ,死亡率为 (3/ 11例 )。外周血中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L时间为 (11± 1)天 ,血小板 >2 0× 10 9/L为(13± 3)天 ,8例未行CD34+ 分选患者的感染率 (4/ 8例 ) ,复发率为 (3/ 8例 ) ,死亡率为 (5 / 8例 )。外周血中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L时间 (11± 1)天和血小板 >2 0× 10 9/L(14± 4 )天。结论 利用CliniMACs系统体外进行外周血CD34+ 细胞的富集与纯化纯度、回收率均满意 ,自体移植后造血功能重建顺利 ;与对照相比造血重建时间、感染率无显著差别 。
- 周芳王健民章卫平冯曹波宋献民周虹龚胜篮丁小芹
- 关键词：CD34^+干细胞移植自体
- 经典方法与LaSRT法测定绿色荧光蛋白标记重组病毒滴度的研究被引量：17
- 2003年
- 目的以带有绿色荧光蛋白(GFP)标记基因的重组逆转录病毒为例,对经典方法与批量快速病毒滴度法(LaSRT)测定病毒滴度进行比较研究。方法(1)经典方法:于6孔培养板分别接种NIH3T3细胞2×105/孔,培养12 h 后分别以0.5 ml、50 μl和5 μl带有GFP 标记基因的病毒感染,聚凝胺终浓度为8 μg/ml,48 h后以流式细胞仪检测细胞eGFP+率。病毒滴度(TU/ml)=(2×105×细胞eGFP+率)/病毒原液体积。(2)LaSRT法:NIH3T3 细胞以5 000/孔接种于96 孔板,12 h后更换成完全培养液90 μl/孔,以8孔为一组,第1 孔中加入病毒液10 μl,此后每孔依次10∶1 倍比稀释,聚凝胺终浓度为8 μg/ml,48 h后以浓度自高到低的方向,在荧光倒置显微镜下确定计量孔(第n孔),计数孔中的阳性细胞数m。病毒滴度(TU/ml)=m×10n+1。(3)对7批病毒以LaSRT法研究,探讨冻存/复苏过程对重组病毒滴度的影响。结果经典方法测定的重组病毒滴度为(1.54±0.38)×106 TU/ml,LaSRT法测定的病毒滴度为(1.33±0.57)×106 TU/ml,两者无统计学差异(P>0.05)。LaSRT法可以大批量、快速地测定以GFP为标记基因的重组病毒滴度。单次冻存/复苏后的病毒滴度为冻存前的(18.1±9.9)%(n=7)。结论LaSRT法和经典方法测定以GFP为标记基因的重组病毒滴度,结果无统计学差异;
- 江千里王健民江汕温丽敏周虹
- 关键词：绿色荧光蛋白
