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人腺病毒41型纤维丝状包涵体免疫电镜研究被引量：1: 2013年; 为明确人腺病毒41型(Adenovirus type 41,Ad41)形态发生过程中形成的纤维丝状包涵体(Fibrillous inclusion body,FIB)是否含有Ad41的长纤维(Long fiber,LF)蛋白与短纤维(Short fiber,SF)蛋白。我们分别原核表达和纯化Ad41LF、SF的球部(Knob)蛋白,分别命名为LFK与SFK。以LFK和SFK分别免疫BALB/c小鼠,分别获得LFK抗血清和SFK抗血清。Western blot、间接免疫荧光和免疫负染结果表明,LFK抗血清和SFK抗血清分别与LF和SF结合,LFK抗血清和SFK抗血清之间无交叉反应,可以应用于免疫电镜标记。通过Ad41抗血清、腺病毒纤维单克隆抗体4D2、LFK抗血清与SFK抗血清分别对FIB进行免疫电镜胶体金标记,表明Ad41抗血清、腺病毒纤维单克隆抗体4D2、LFK抗血清与SFK抗血清均能标记FIB,说明FIB中含有Ad41长纤维蛋白和短纤维蛋白。; 宋敬东邹小辉王敏屈建国鲁茁壮洪涛; 关键词：免疫电镜技术

肠道病毒71型感染细胞的超微病理研究: 2014年; 目的研究肠道病毒71型（Enterovirus 71,EV71）对宿主细胞的超微病理损伤及病毒在细胞内的定位.方法以EV71接种RD-A细胞,收获细胞制作超薄切片,对超薄切片进行透射电子显微镜观察.结果EV71导致的宿主细胞病理变化包括,细胞质内产生大量双层膜或多层膜的囊泡结构、形成包涵体结构、细胞核变性、线粒体变性、内质网扩张及细胞降解.病毒颗粒存在于细胞质内、囊泡结构中、膜性结构表面、包涵体内部、内质网池样结构内及髓样结构中.结论 EV71能够导致宿主细胞产生显著的超微结构变化,病毒颗粒位于多种细胞结构内.; 宋颖宋敬东许文波王敏屈建国洪涛; 关键词：肠道病毒属病理学

马尔堡病毒形态特征研究: 2014年; 马尔堡病毒(Marburg virus)和埃博拉病毒(Ebola virus)属于丝状病毒科(Filoviridae)成员。该科病毒可导致严重的丝状病毒出血热(Filovirus hemorrhagic fever,FHF),具有成为生物恐怖武器和生物战剂的潜能。为对马尔堡病毒的形态特征进行总结,以期为我国丝状病毒的电镜鉴定提供信息。本研究通过透射电子显微镜技术对马尔堡病毒形态进行观察,以明确其病毒形态特征。研究结果表明,负染后的马尔堡病毒呈现多形性(Pleomorphism),病毒颗粒呈直径均一、长度不等的棒状或丝状及眼镜蛇样、球形、分支状。我国至今尚无分离到丝状病毒的报道,对该病毒的监测、预警具有重要意义。透射电子显微镜技术是鉴定丝状病毒的重要方法之一,明确丝状病毒的形态特征有助于该类病毒的电镜鉴定。; 宋敬东屈建国洪涛; 关键词：马尔堡病毒病毒形态

病变细胞定位超薄切片方法的建立被引量：3: 2013年; 目的建立一种针对感染病毒病变细胞的定位超薄切片方法。方法选取适于进行定位切片的细胞培养皿作为包埋模具，以人腺病毒5型（humanadenovirustype5，Ad5）、A／HN／SWL3／09（H1N1）流感病毒分别感染HEK293细胞和MDCK细胞为模型，当细胞出现病变时，原位包埋细胞，通过修块暴露病变细胞，并针对病变细胞进行超薄切片，以透射电子显微镜观察病变细胞的超薄切片。结果通过定位超薄切片技术成功对目标病变细胞进行切片，病变细胞的切片上可以容易地观察到病毒颗粒。结论建立了一种针对病变细胞的定位超薄切片方法，该方法定位准确、能够快速检测病变细胞，提高了电镜检测效率。; 宋敬东屈建国洪涛; 关键词：显微镜检查细胞系超微结构

人腺病毒41型(HAdV-41)在293TE细胞中的形态发生研究被引量：1: 2014年; 为研究人腺病毒41型(Human adenovirus type 41,HAdV-41)的形态发生过程,将其接种于293TE细胞,收获细胞制作超薄切片并染色,通过透射电子显微镜进行观察。结果显示HAdV-41可以通过非网格蛋白陷窝、网格蛋白陷窝及直接穿入的方式进入细胞;细胞微绒毛可参与HAdV-41进入细胞的过程;进入细胞的HAdV-41包裹于囊泡内、溶酶体内或游离于细胞浆内;HAdV-41最终以游离状态靠近细胞核核孔,并释放核糖核蛋白(Ribonucleoprotein,RNP)进入细胞核;子代HAdV-41最先出现在细胞核内;在HAdV-41复制过程中出现纤维丝状包涵体、致密包涵体及条索状致密包涵体,包涵体结构与HAdV-41的形态发生过程有关;最终,HAdV-41以裂解细胞方式释放。本研究揭示了HAdV-41形态发生的部分过程,进一步丰富了HAdV-41的生物学信息。; 宋敬东王敏邹小辉屈建国鲁茁壮洪涛

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中国疾病预防控制中心青年科研基金(2013A105)