国家自然科学基金(30370341) 作品数:13 被引量:54 H指数:4 相关作者: 王阁 王东 李增鹏 郑继军 许文 更多>> 相关机构: 第三军医大学大坪医院 第三军医大学 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的起源分析 被引量:18 2006年 目的观察原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的活化、分布、来源和免疫表达特征。方法应用HE染色、免疫组化S-P方法观察94例肝细胞癌(HCC)和12例肝内胆管细胞癌(ICC)和10例混合型肝癌的肝干细胞情况,用5例肝硬化和4例正常肝组织为对照。结果在原发性肝癌不同病理组织类型中干细胞免疫标志均有不同程度的表达,均可观察到肝干细胞向肝癌细胞的转化,以混合型肝细胞癌中肝干细胞免疫表型表达率最高(P<0·05)。结论不同病理组织类型的肝癌组织中均存在不同分化状态和不同来源的肝干细胞,可能由于肝干细胞(hepaticstemcell,HSC)分化不全或分化异常所致。 王阁 索金友 邓婧 杨进 郑继军 王红中 胡庆 李增鹏 肖华亮 王东关键词:原发性肝癌 肝干细胞 癌发生 免疫组织化学 Effect of MEK1 inhibitor PD98059 on the signal transduction of Tec in HepG2 hepatoma cells 被引量:1 2007年 Objective: To investigate the effect of MEK1 inhibitor PD98058 on Tec and ERK2 in HepG2 hepatoma cells. Methods: The expression of mRNA and protein of Tec and ERK2 in HepG2 cells was detected by immunocytochemistry as- say. After various concentration of PD98059 treatment, the expression of Tec and ERK2 mRNA in HepG2 cells was detected by RT-PCR and Western blotting. Results: Tec and ERK2 expressed highly in HepG2 cells. PD98059 obviously inhibited the expression of mRNA and protein of Tec and ERK2 in a dose-dependent manner, in which 40 μmol/L of PD98059 exhibited the strongest inhibiting effect. Conclusion: PD98058, as MEK1 inhibitor, can inhibit Tec, block the signal route of Ras/Raf/ERK and to impede the signal transduction in HepG2 cells. Tec may be the signal protein in the upper stream of Ras/Raf/ERK in hepatocarcinoma cells and is supposed to interact with the signal way of Ras/Raf/ERK. Jijun Zheng Chuan Chen (Co-First Author) Ge Wang Jing Deng Jin Yang Hongzhong Wang Minzhi Zhang Qiong Li Wen Xu Qing Hu Zengpeng Li Dong Wang关键词:PD98059 TEC ERK2 HEPATOCARCINOMA 干细胞 肿瘤干细胞与肝细胞癌发生关系研究进展 被引量:4 2007年 越来越多的实验结果证实肿瘤起源于干细胞,诸如白血病、乳腺癌、脑肿瘤等已成功分离出肿瘤干细胞,有关肝干细胞与肝癌的研究较为成熟,理论上应存在肝癌干细胞,但因缺乏特异性标志物,相关的肝癌干细胞分离尚未成功。 许文 王阁关键词:干细胞 肿瘤干细胞 肝细胞癌 癌发生 TEC酪氨酸激酶上下游作用分子研究进展 被引量:1 2006年 邓婧 王阁关键词:分子研究 蛋白酪氨酸激酶 信号转导途径 生物学效应 肝癌组织 造血细胞 原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的分析(英文) 被引量:1 2008年 背景:近年来,有观点认为原发性肝癌的发生机制可能为肝干细胞分化不全或分化异常所致。目前,肝干细胞研究正处于起步阶段,对人原发性肝癌的"干细胞起源"学说尚需进一步验证。目的:观察原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的活化、分布、来源和免疫表达特征。设计:观察对比实验。单位:解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心。对象:实验于2003-09/2004-07在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心完成,选用94例肝细胞癌和12例肝内胆管细胞癌和10例混合型肝癌石蜡包埋组织,同时选用5例肝硬化和4例正常肝组织作为实验对照,均取自病理科存档资料。肝癌组织均为患者首次肝癌切除手术时采取,包括肿瘤组织和癌旁组织,患者均无化疗和放射治疗史,并对受检项目知情同意。实验主要抗体均购自SantaCruz公司。方法:采用苏木精-伊红染色、免疫组织化学SP方法(检测的免疫标志有鼠抗人细胞角蛋白19单克隆抗体、鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体、鼠抗人细胞角蛋白8&18单克隆抗体、鼠抗人c-kit单克隆抗体、鼠抗人Thy-1单克隆抗体、鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体)观察各病变类型肝干细胞免疫标志表达情况。主要观察指标:各病变类型肝干细胞免疫标志表达情况。结果:在原发性肝癌不同病理组织类型中干细胞免疫标志均有不同程度的表达,均可观察到肝干细胞向肝癌细胞的转化,以混合型肝细胞癌中肝干细胞免疫表型表达率最高(P<0.05)。正常组和肝硬化组干细胞免疫表型特征为阴性。结论:不同病理组织类型的肝癌组织中均存在不同分化状态和不同来源的肝干细胞。 陈川 王阁 索金友 郑继军 张志敏 李琼 许文 雒喜中 邓婧 王红中 李增鹏 王东关键词:原发性肝癌 肝干细胞 癌发生 免疫组织化学 改进性DEN诱发大鼠肝癌模型的建立与病理形态学研究 被引量:13 2007年 目的建立改进性二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱发大鼠原发性肝癌模型,探讨肝癌形成过程的病理变化特点。方法用1‰DEN溶液间断喂养Wistar大鼠诱发肝癌,对大鼠肝脏不同诱癌阶段的病理变化和超微结构进行动态观察。结果16周以后诱癌组大鼠成癌率为96%(24/25),大鼠肝癌癌变过程大致经过肝细胞损伤期、肝细胞增生硬化期和肝细胞癌变期等3个时期,不同时期肝细胞的核、核仁、细胞质内糖原以及细胞质内细胞器的病理形态学改变有一定规律,观察到肝细胞吞噬细胞现象。结论该模型是动态研究肝癌发生的理想动物模型。诱癌间歇期不会改变DEN诱癌的进程。肝细胞癌变过程中存在自噬(autophagy)机制。 张志敏 王阁 陈川 许文 李琼 胡庆 王东 李增鹏关键词:二乙基亚硝胺 肝癌 超微结构 病理 Tec激酶区作用蛋白RAI16的筛选和结构功能分析 被引量:4 2006年 目的筛选与Tec激酶结构域相互作用的蛋白分子,并获得其蛋白质结构及功能信息。方法通过酵母双杂交技术筛选作用蛋白,利用相应的计算机软件及数据库,对筛库所得蛋白进行生物信息学分析。结果筛选得到1种Tec激酶区作用蛋白RAI16,其cDNA序列由2863个核苷酸组成,编码759aa蛋白质,具有多个功能基序,其中包括3个酪氨酸磷酸化位点。结论推测RAI16蛋白与细胞分化有关,很可能在肝癌细胞的诱导分化信号转导转录中与Tec协同发挥重要作用。 邓婧 王阁 杨进 郑继军 王红中 胡庆 王东 李增鹏关键词:酵母双杂交 PD98059对肝癌HepG2细胞Tec信号转导作用的初步研究 被引量:3 2006年 目的探讨MEK1抑制剂PD98059对肝癌细胞株HepG2细胞中Tec(tyrosinekinaseexpressedinhepatocellu-larcarcinoma)及ERK2作用。方法免疫细胞化学方法检测Tec、ERK2在HepG2细胞中的表达;用RT-PCR和Westernblot方法检测,不同浓度PD98059处理细胞后,HepG2细胞中的Tec、ERK2mRNA及蛋白表达。结果Tec、ERK2在HepG2细胞中呈高表达,PD98059明显影响HepG2细胞Tec、ERK2mRNA以及蛋白表达,呈剂量依赖性,40μmol/LPD98059细胞抑制最明显。结论Tec可能是肝癌细胞内Ras/Raf/ERK信号转导途径上游的信号蛋白,与Ras/Raf/ERK信号转导通路存在着某种信号联系。 郑继军 王阁 邓婧 杨进 王红中 胡庆 李增鹏 王东关键词:PD98059 TEC ERK2 肝癌 信号转导 微RNA18与B细胞易位基因2在肝癌细胞中差异表达相关性的研究 被引量:4 2009年 目的研究微RNA18(miR18)对肝癌细胞HepG2基因表达谱的影响,预测其靶基因,初步探讨miR-18与抗增殖基因B细胞易位基因2(BTG2)两者在肝癌发生过程中差异表达的相关性。方法利用基因表达谱芯片技术筛选HepG2的微RNA差异表达谱,应用生物信息学方法预测表达明显上调的miR-18的靶基因,初步筛选出直接调控的靶基因为抗增殖基因BTG2;应用RT-PCR和Northernblot法分析BTG2正常与肝癌组织中的表达情况。结果生物信息学分析结果显示miR-18分子调控的下游靶基因有609个,涉及细胞增殖、分化和凋亡、转录调节等众多生理和病理过程;抗增殖基因BTG2在肝癌组织和细胞中呈明显低表达。结论miR-18在肝癌细胞中表达明显上调,并可能负性调控抗增殖基因BTG2在肝癌细胞中的表达,两者共同在肝癌细胞增殖方面发挥着重要作用。 李琼 王阁 张志敏 杨志祥 单锦露 陈川 许文 雒喜忠 王东关键词:肝细胞 基因表达调控 细胞增殖 微RNA 肝癌粘附转移中相关整合素的作用研究现状 被引量:3 2006年 郑继军 王阁关键词:肝癌 整合素 肿瘤细胞