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国家自然科学基金(30571399)

作品数:6 被引量:5H指数:1
相关作者:赵德明周向梅尹晓敏李玉荣杨建民更多>>
相关机构:中国农业大学河北农业大学华南农业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金北京市科委基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 5篇生物学
  • 4篇农业科学

主题

  • 4篇蛋白
  • 3篇朊蛋白
  • 3篇基因
  • 2篇地鼠
  • 2篇星形
  • 2篇星形胶质
  • 2篇星形胶质细胞
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光定量
  • 2篇实时荧光
  • 2篇实时荧光定量
  • 2篇特异
  • 2篇特异性
  • 2篇细胞
  • 2篇奶牛
  • 2篇奶牛生殖系统
  • 2篇金黄地鼠
  • 2篇克隆
  • 2篇胶质
  • 2篇胶质细胞

机构

  • 6篇中国农业大学
  • 3篇河北农业大学
  • 1篇华南农业大学
  • 1篇潍坊出入境检...

作者

  • 6篇赵德明
  • 4篇尹晓敏
  • 4篇周向梅
  • 3篇李玉荣
  • 2篇张太翔
  • 2篇杨建民
  • 1篇韩利方
  • 1篇孔小明
  • 1篇霍桂桃
  • 1篇于博
  • 1篇田国华
  • 1篇田国宁
  • 1篇张金玲
  • 1篇宁章勇
  • 1篇白瑜

传媒

  • 2篇中国兽医学报
  • 2篇中国兽医杂志
  • 1篇河北农业大学...
  • 1篇Scienc...
  • 1篇中国畜牧兽医...

年份

  • 6篇2008
  • 1篇2006
6 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
金黄地鼠(Mesocricetus auratus)朊蛋白基因的克隆及其原核表达
2008年
采用RT-PCR技术从金黄地鼠(Mesocricetus auratus)脑组织获得朊蛋白基因(Prion protein nucleic acid,PRNP)开放阅读框(Open reading frame,ORF),截去其N端信号肽(66 bp)和C端GPI锚定位点(69 bp)形成朊蛋白编码区PRNPx;将编码区重组于融合表达质粒Pet-DsbA中,并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中经IPTG诱导表达,并经Western-blot验证。结果表明,金黄地鼠PRNP基因ORF区全长为765 bp,编码254个氨基酸的前体蛋白,核苷酸序列与已发表金黄地鼠序列(M14054)同源性为99.87%,其第116个氨基酸发生了同义突变由GCT变为GCC;朊蛋白在大肠杆菌得到高效表达,产物是相对分子质量为47 000的融合蛋白。
李玉荣霍桂桃周向梅尹晓敏赵德明
关键词:金黄地鼠朊蛋白基因克隆原核表达
PrP106-126对大脑皮质神经元和星形胶质细胞朊蛋白基因表达的影响
2008年
采用实时荧光定量RT-PCR的方法,对PrP106-126处理的大脑皮质神经元和星形胶质细胞模型进行了朊蛋白基因表达相对定量的研究。大脑皮质神经元经PrP106-126处理后,与SCR处理组和对照组相比,基因表达量明显下降。PrP106-126处理的星形胶质细胞与对照组和SCR处理组相比,朊蛋白基因的表达量显著升高。该试验结果为深入了解TSEs的分子致病机制和正常朊蛋白的功能提供了基础数据。
宁章勇赵德明杨建民周向梅于博孔小明尹晓敏
关键词:星形胶质细胞基因表达传染性海绵状脑病
Westernblot检测奶牛生殖系统朊蛋白的分布
2008年
张太翔田国宁张金玲田国华赵德明
关键词:生殖系统传染性海绵状脑病慢性消耗性疾病朊蛋白奶牛牛海绵状脑病
Influence of PrP 106―126 on expression of laminin and fibronectin in astrocyte
2008年
Astrogliosis is a hallmark of prion disease, but the metabolic alterations of astrocytes remain poorly documented. A synthetic peptide corresponding to amino acid 106―126 of the human prion protein (PrP) has been shown to be toxic to neurons. In this study, the effects of PrP 106―126 on astrocytes were investigated in vitro. The proliferation of astrocytes was significantly (P < 0.05) increased when grown in media conditioned with PrP 106―126 (80 μmol/L) from microglia. The expression of laminin (LN) and fibronectin (FN) was examined at both mRNA and protein levels. The results showed that ex- posure of astrocytes to PrP 106―126 enhanced the expression of LN and FN. The increase of FN in astrocyte cultures required cytokines previously released by activated microglia. This study reveals the expression of LN and FN affected by PrP106―126.
LI YuRongGUAN LeLuoYANG JianMinZHOU XiangMeiYIN XiaoMinZHAO DeMing
关键词:纤连蛋白PRP星形胶质细胞
大鼠睾丸支持细胞体外培养及FSH对其增殖的影响被引量:5
2008年
为探索睾丸支持细胞体外纯化培养的方法,并观察不同水平FSH对支持细胞增殖能力的影响,本研究采用胶原酶Ⅰ和胰蛋白酶序贯两步消化法和低渗处理法分离、纯化睾丸支持细胞,Fas-L免疫荧光法对纯化后的支持细胞进行鉴定。取培养第2代第2天已完全贴壁的支持细胞,在其培养液中添加不同浓度FSH,培养16 h后,MTT法检测FSH对支持细胞增殖能力的影响。结果表明,该方法培养的支持细胞纯度高,且FSH的添加可显著促进支持细胞的增殖(P<0.01),为支持细胞高效制备提供可行性。
李玉荣白瑜尹晓敏周向梅韩利方赵德明
关键词:睾丸支持细胞增殖
朊蛋白在奶牛生殖系统特异性表达的研究
利用实时荧光定量RT-PCR技术,采用GAPDH基因做内参照,对奶牛生殖系统的12个不同部位组织提取总RNA,进行PrP基因表达的定量研究。结果发现,雌雄奶牛的生殖系统各部分组织都有PrP基因表达,其中雌性奶牛的卵巢、子...
张太翔赵德明
关键词:实时荧光定量RT-PCR
文献传递
金黄地鼠Dpl基因克隆及其组织特异性表达的研究
2008年
本文成功克隆了金黄地鼠Dpl(PrP-like protein doppel,Doppel)基因,并采用实时荧光定量PCR法对其组织特异性表达进行了研究。根据已发表家鼠Dpl基因序列设计引物,采用PCR直接扩增金黄地鼠(Hamster)的Dpl基因CDs区,序列测定和分析表明金黄地鼠的Dpl基因CDs区全长537 bp,编码178个氨基酸的前体蛋白,不存在基因多态性。经基因序列对比分析,金黄地鼠与其他10种属哺乳动物Dpl基因有较高同源性,均为70.8%以上,且与鼠科Dpl序列的同源性最高(86%)。实时定量PCR结果表明,在所检测组织中,Dpl mRNA在睾丸表达量最高,其次为脾脏、心脏、骨髓和脑,其在肝脏、肺脏、肾脏和肌肉中的表达低于检测水平;成年动物与未成年动物相比,在睾丸组织的表达量,成年鼠显著高于未成年鼠;在成年鼠脑组织检测不到Dpl mRNA的表达。本研究对金黄地鼠Dpl基因序列进行分析测定,并对其在不同组织的生理表达进行了定量,以期为其功能的进一步研究提供基础数据。
李玉荣周向梅尹晓敏杨建民赵德明
关键词:金黄地鼠DPL克隆实时荧光定量PCRMRNA表达
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