国家自然科学基金(81160085)
- 作品数：10 被引量：29H指数：4
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- 枸杞多糖对胎儿卵巢组织冷冻保存的影响被引量：7
- 2012年
- 背景:抗氧化剂的应用对于提高卵巢组织冻存后的活力起着很重要的作用。目的:通过观察冷冻保存的胎儿卵巢组织异种移植到裸鼠肾被膜下的发育情况,探索枸杞多糖在卵巢组织冷冻保存中的作用。方法:实验分为4组。①新鲜移植组:取材后的新鲜胎儿卵巢组织直接进行移植。②冻存对照组:冷冻保护液为基液。③β-巯基乙醇组:冷冻保护液为基液添加100μmol/Lβ-巯基乙醇。④枸杞多糖组:冷冻保护液为基液添加400mg/L枸杞多糖。对冷冻复温后的胎儿卵巢皮质块进行祼鼠的肾被膜下移植,并于移植后12周取材。结果与结论:各组在移植物的存活率上差异无显著性意义(P>0.05)。在卵泡计数上冷冻对照组最低(P<0.05)。在卵泡的存活率上,各组间差异均有显著性意义,其中以冷冻对照组最低,枸杞多糖组最高。β-巯基乙醇组和枸杞多糖组卵巢超微结构较冷冻对照组保存的好。提示400mg/L的枸杞多糖和100μmol/L的β-巯基乙醇有利于卵巢组织的冷冻保存,并可显著提高冷冻卵巢组织移植后的存活率。
- 蔡玉芳王燕蓉孔斌崔岫沈新生
- 关键词：胎儿卵巢异种移植枸杞多糖裸鼠
- FSH对胎儿卵巢组织玻璃化冻存及冻融后短时培养的影响
- 2012年
- 目的通过对FSH干预下的胎儿卵巢玻璃化冷冻及解冻后短暂培养,观察FSH对卵泡储备的影响。方法将20周流产胎儿卵巢皮质切割成体积为5mm×4mm×2mm和10mm×4mm×2mm的皮质片,在玻璃化液、解冻液和培养液中添加10μg FSH.mL-1,通过两步渗透平衡法,将卵巢皮质进行玻璃化冻存。解冻后培养4.5h,通过卵泡形态学观察、不同发育期卵泡构成比和卵泡直径观察评价玻璃化冻存和解冻后的FSH干预下的培养效果。结果①不同发育阶段卵泡构成比及卵泡直径在冻融组之间及冻融组与新鲜组之间相比差异无统计学意义;②冻融组和冻融-培养组之间相比较,培养组卵泡直径增大,差别有统计学意义(P<0.05)。结论冻融过程的FSH添加不影响人胎儿卵巢大皮质片的玻璃化冻存及早期卵泡的构成比,但是体外添加FSH培养4.5h可使一定量的原始卵泡发育至早期初级卵泡阶段。
- 王艳盛陈杰黑长春王燕蓉马文智孙苗蔡玉芳王国平
- 关键词：胎儿卵巢玻璃化冻存FSH
- 卵泡刺激素与卵泡刺激素及黄体生成素共同干预对玻璃化冻存小鼠卵巢组织血管内皮生长因子表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织卵泡刺激素(FSH)及FSH和黄体生成素(LH)共同干预,观察冻融卵巢组织的形态学改变以及两种激素干预对冻存卵巢组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,寻找最佳的提高冻融卵巢组织卵泡存活及VEGF表达的激素干预方式。方法 4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组(CG),玻璃化冻存对照组(VCG),300IU/L FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),以及150IU/L FSH+150IU/L LH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH+LH),每组30个卵巢样本。通过常规组织学、Western blotting技术,观察并分析各组卵巢组织形态结构改变及VEGF蛋白表达量;通过荧光定量PCR技术(Real-time PCR)检测VEGF mRNA表达情况。结果 OG-FSH+LH组正常卵泡百分比最高,且显著高于OG-FSH组(P<0.05);VEGF蛋白表达量在OG-FSH+LH组显著高于OG-FSH组(P<0.05);荧光定量PCR检测结果表现为VEGF mRNA表达量在OG-FSH+LH组最高,其次为OG-FSH组,最低是VCG组(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH+LH的干预方式较单独FSH干预具有更高正常卵泡百分比和更佳的VEGF蛋白表达。
- 陈杰常青杨延周裴秀英黑常春于佳孙苗王燕蓉
- 关键词：卵泡刺激素黄体生成素血管内皮生长因子实时定量聚合酶链反应小鼠
- 小鼠卵巢玻璃化冻存不同时段FSH干预对Cx43表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的通过在玻璃化冻存不同阶段给予小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)干预,观察FSH对缝隙连接蛋白Connexin-43(Cx43)表达的影响,从而寻找最佳的FSH干预途径。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0.3 IU/mL FSH干预玻璃化冻存组,包括全程添加FSH组(OG-FSH)、冻存前添加FSH组(FG-FSH)以及冻存后添加FSH组(LG-FSH)。通过形态学、免疫组织化学技术及Western-blot技术观察并分析各组卵巢组织Cx43蛋白表达情况。结果正常卵泡百分比为玻璃化冻存数量最低,全称FSH干预玻璃化冻存组最高(P<0.05),全程添加FSH组(OG-FSH)最高,而其他组间正常卵泡百分比间的比较差异无统计学意义。各组间Cx43蛋白表达量从高到低,依次为全程添加FSH组(OG-FSH)、冻存前添加FSH组(FG-FSH)、冻存后添加FSH组(LG-FSH)、新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG),且差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH更有利于卵巢组织形态结构的保持以及Cx43蛋白的表达。
- 陈杰王燕蓉裴秀英张晓光孙苗常青马春骥盛优静
- 关键词：小鼠卵巢FSH玻璃化冻存CX43
- 小鼠卵巢玻璃化冻存后异体移植对卵巢衰竭模型鼠卵巢功能的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究新鲜与玻璃化冻存幼鼠卵巢异体异位移植对卵巢早衰(POF)小鼠卵巢储备功能的影响。方法以正常小鼠为对照组,使用一次性环磷酰胺150 mg/kg腹腔注射,白消安20 mg/kg皮下注射,建立小鼠卵巢早衰模型,于造模30 d后进行幼鼠新鲜或玻璃化冻存卵巢的肾被膜下移植。通过对移植后30 d各组卵巢组织常规HE染色、血清促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、抑制素B(INHB)、抗苗勒管激素(AMH)变化,观察卵巢玻璃化冻存后异体移植对化学性卵巢功能损伤卵泡储备功能有无挽救作用。结果无论是损伤模型组还是损伤后卵巢移植组,血清FSH、LH浓度明显高于正常对照组(P<0.05),AMH、INHB浓度明显低于正常对照组(P<0.05)。但卵巢移植组与模型对照组比较,各血清激素指标均有所改善,尤其是玻璃化冻存卵巢移植组,血清FSH、LH浓度明显降低(P<0.05),AMH、INHB上升。结论新鲜与玻璃化冻存幼鼠卵巢异体异位移植可以有效改善POF小鼠卵巢功能。
- 杨旭黑长春张晓光陈杰王燕蓉
- 关键词：玻璃化冻存卵巢储备功能
- 小鼠卵巢玻璃化冻存过程中FSH干预对卵泡形态及整合素αvβ5表达的影响
- 2013年
- 目的观察促卵泡刺激素(FSH)对整合素αvβ5(αvβ5 Integrin)表达的影响,以便提供FSH干预可提高卵巢玻璃化冻存效率的有关依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢分为:新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻融对照组(VCG)、0.3 IU·mL-1FSH干预玻璃化冻融组(FSH-VG),通过形态学、免疫组织化学技术观察并分析各组正常卵泡百分比及卵巢组织整合素αvβ5蛋白表达情况。结果正常卵泡百分比、αvβ5蛋白表达为FSH-VG最高,与VCG比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠卵巢玻璃化冻存中的FSH干预有助于卵泡结构的维持及整合素αvβ5蛋白的表达。
- 贺晓亮陈杰张红吴昊王燕蓉马文智于佳孙苗张宁
- 关键词：小鼠卵巢促卵泡刺激素玻璃化冻存
- 小鼠卵巢玻璃化冻存过程中FSH干预对VEGF及VEGFR-2表达的影响被引量：7
- 2013年
- 目的通过在玻璃化冻存不同时段给予小鼠卵巢组织重组人促卵泡刺激素(rFSH)干预,观察rFSH对VEGF以及VEGFR-2表达的影响,探索卵巢玻璃化冻存过程中最佳的FSH保护途径。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0.3IU.mL-1FSH干预玻璃化冻存组,包括全程添加FSH组(OG-FSH)、冻存前添加FSH组(BG-FSH)以及冻存后添加FSH组(AG-FSH)。通过形态学技术观察正常卵泡百分比;采用免疫组织化学技术观察卵巢不同细胞VEGF以及VEGFR-2的表达;通过Western-blot方法观察并分析不同玻璃化冻存时段的FSH干预对卵巢VEGF以及VEGFR-2蛋白表达量的影响。结果正常卵泡百分比、VEGF及VEGFR免疫组织化学和Western-blot检测结果组间比较差异均有统计学意义。其中,OG-FSH组各项检测指标均高于其他各组(P<0.05),且BG-FSH、AG-FSH组与FCG相似,高于VCG组(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH干预有利于提高正常卵泡数,以及VEGF、VEGFR-2蛋白的表达。
- 陈杰张宁王燕蓉裴秀英黑常春马会明常青马文智蔡玉芳孙苗
- 关键词：小鼠卵巢FSH玻璃化冻存VEGFVEGFR-2
- 黄体生成素干预对体外培养小鼠卵巢VEGF和Survivin表达的影响
- 2012年
- 目的探索黄体生成素(LH)对小鼠卵巢体外培养后血管内皮生长因子(VEGF)和存活素(Survivin)表达的影响。方法将从8周龄小鼠新鲜取材的半卵巢分别在无LH(培养对照组)和添加LH(0.15IU.mL-1)干预下培养3、6、12、24h后通过免疫组化法观察半卵巢VEGF、Survivin的表达。结果培养组VEGF、Survivin表达比新鲜对照组降低且呈逐渐降低趋势;在培养3、6、12h阶段,LH 0.15干预后VEGF阳性表达高于培养对照组(P<0.05);3h和12h Survivin的表达均高于培养对照组(P<0.05)。结论 LH体外干预可上调小鼠卵巢的VEGF、Survivin表达,VEGF和Survivin表达呈正相关。
- 张晓光张庭元杨旭陈杰王燕蓉裴秀英
- 关键词：黄体生成素存活素小鼠卵巢体外培养
- 小鼠卵巢自体及异体移植前的尿促性素体外干预对卵泡存活的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨卵巢移植前采用尿促性素(menotrophin)体外干预对小鼠半卵巢移植后卵泡存活的影响。方法 ICR雌性小白鼠随机分为5组:(1)新鲜卵巢组织自体移植组(新鲜自体移植组),卵巢摘除后直接移植至自体肾被膜下;(2)自体移植干预组,卵巢摘除后先在含尿促性素液体中体外培养3h,之后移植至自体肾被膜下;(3)自体移植无干预组,卵巢摘除后在不含尿促性素的液体中体外培养3h,之后移植至自体肾被膜下;(4)异体移植干预组,卵巢摘除后在含尿促性素的液体中体外培养3h,之后移植至异体肾被膜下;(5)去势对照组。术后72h观察移植物存活率与移植物内正常卵泡计数,术后1个月观察各组动物的动情周期恢复情况、移植物的发育情况,测定血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)和雌二醇水平。结果移植后72h,新鲜自体移植组和自体移植干预组存活卵泡数明显高于自体移植无干预组与异体移植干预组(均为P<0.01)。新鲜自体移植组、自体移植干预组和自体移植无干预组动物的动情周期恢复率均为100%,明显高于异体移植干预组的67%(均为P<0.05)。动情周期恢复所需时间以新鲜自体移植组和自体移植干预组最短。自体移植干预组的卵泡数多于自体移植无干预组,但均低于新鲜自体移植组。与去势对照组比较,其他4组的FSH值均较低(均为P<0.01),雌二醇值均较高(均为P<0.01),其中新鲜自体移植组和自体移植干预组的雌二醇水平高于自体移植无干预组和异体移植干预组(均为P<0.01)。结论对移植卵巢给予尿促性素体外培养可提高移植后的卵泡存活率,是提高卵巢移植效果的有效途径。
- 孙静李婧李霞王燕蓉
- 关键词：卵巢移植小鼠尿促性素卵泡卵泡刺激素
- 小鼠卵巢玻璃化冻融过程中重组人卵泡刺激素干预对血管内皮生长因子(VEGF)及整合素αvβ3表达的影响被引量：9
- 2015年
- 目的:观察重组人卵泡刺激素(r FSH)对小鼠卵巢血管内皮生长因子(VEGF)以及整合素αvβ3表达的影响。方法:将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、300 IU/L r FSH干预玻璃化冻存组(r FSH-VG)。通过对冻融卵巢内各级卵泡计数、免疫组织化学观察VEGF和整合素αvβ3在卵巢不同细胞中的定位,Western blotting检测VEGF、整合素αv和整合素β3蛋白表达量。结果:各级卵泡计数、VEGF及整合素β3的蛋白表达均为r FSHVG组优于VCG组(P<0.05),整合素αv的表达组间均无统计学差异(P>0.05)。结论:玻璃化冻融过程中添加r FSH可以上调VEGF及整合素β3蛋白的表达。
- 张红马文叶杨延周裴秀英吴昊常青马会明马文智孙苗于佳蔡玉芳王红燕黑常春赵承军王燕蓉
- 关键词：玻璃化冻存整合素ΑVΒ3
