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广西医疗卫生重点科研课题(2011086)
广西医疗卫生重点科研课题(2011086)
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 相关作者:刘爱群孙明辉肖胜英葛莲英更多>>
- 相关机构:广西医科大学广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金:广西医疗卫生重点科研课题广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人结肠癌放射抗拒性细胞株的建立被引量:2
- 2013年
- 目的应用连续照射的方法建立人结肠癌放射抗拒细胞株SW480-R,为研究人结肠癌放射抗拒的机制提供模型。方法用2Gy剂量的X射线照射人结肠癌SW480细胞株,每天1次,每周5d,分别照射不同周期后,按照细胞存活率筛选出放射抗拒细胞株SW480-R,并检测细胞的倍增时间。以细胞克隆形成实验检测细胞的放射敏感性,MTT法检测照射后不同时间点的细胞存活分数,流式细胞仪检测细胞的细胞周期分布,并分别与亲代结肠癌细胞株进行比较。结果经2Gy照射3周后细胞仍有存活,可作为放射抗拒细胞株的模型。SW480-R细胞株的倍增时间明显长于亲代SW480细胞株(P<0.05),SW480-R细胞株的放射抗拒性增加,照射后12h的细胞存活率较SW480细胞株显著增高(98.40%vs92.81%,P<0.001)。流式细胞仪检测细胞周期显示,SW480-R细胞株的细胞周期分布与SW480细胞株不同,G2/M期明显增高。结论人结肠癌细胞株SW480每天经X射线照射2Gy,连续照射3周后可以得到具有放射抗拒细胞株SW480-R。此细胞株具有稳定的放射抗拒性,且与亲代细胞株有不同的细胞周期分布。
- 孙明辉肖胜英刘爱群葛莲英
- 关键词:结肠肿瘤放疗细胞株
- DNA-PK/AKT/GSK3β通路与结肠癌细胞的放射抗拒性被引量:1
- 2013年
- 目的探索结肠癌细胞株SW480在长期分割放疗下获得放射抗拒性的可能机制。方法经不同剂量0 Gy、2 Gy、5 Gy、10 Gy单次X射线照射后,以RT-PCR法检测结肠癌亲本细胞SW480和放射抗拒性细胞SW480-R中CCND1mRNA的表达;Western blot法检测DNA-PK/AKT/GSK3β通路中两种细胞株cyclin D1、CDK4、Rb、p-Rb-Ser795、AKT、p-AKT-Ser473、GSK3β、p-GSK3β-Ser9、DNA-PKcs、p-DNA-PKcs蛋白的表达。结果经单次X射线照射0 Gy、2 Gy、5 Gy、10 Gy后,RT-PCR法检测显示SW480-R细胞中CCND1 mRNA的表达明显低于SW480的表达(P<0.05),其相对表达水平分别为0.31±0.02、0.32±0.03、0.34±0.05、0.44±0.04;Western blot法检测显示SW480和SW480-R中的cyclin D1、CDK4、Rb、p-Rb-Ser795、AKT、p-AKT-Ser473、p-GSK3β-Ser9、DNA-PKcs及p-DNA-PKcs蛋白的表达含量在两种细胞中显著不同,SW480-R的蛋白表达明显高于SW480(P<0.05),而GSK3β蛋白的表达含量SW480-R却低于SW480(P<0.05)。结论经过长期分割放疗的结肠癌细胞获得的放射抗拒性可能与激活DNA-PK/AKT/GSK3β通路中cyclin D1蛋白过表达介导的DNA损伤反应(DDR)的改变有关。
- 肖胜英葛莲英刘爱群孙明辉
- 关键词:CYCLIN分割放疗放射抗拒性BLOT法