国家自然科学基金(81160018)
- 作品数：10 被引量：32H指数：4
- 相关作者：庞丽娟李锋李丽司军强马克涛更多>>
- 相关机构：石河子大学石河子大学医学院第一附属医院石河子市人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 钙激活氯通道对大鼠脑基底动脉舒缩活动的影响被引量：2
- 2014年
- 本文旨在观察钙激活氯通道（calcium-activated Cl^- channels, CaCCs）在大鼠脑基底动脉舒缩活动中的作用。应用压力肌动图技术观察给予不同药物干预后大鼠脑基底动脉血管段直径的变化。结果显示：（1）脑基底动脉管腔内压力为0-100 mmHg时，压力诱发引起的脑血管舒缩活动的比例为78.6% （n = 28），且血管的收缩比舒张反应更快。（2）脑基底动脉管腔内压力为60 mmHg时，振幅平均值为（62.6 ± 6.4） μm （n = 22），频率平均为（8.0 ± 2.3） 次/5 min （n = 22）。（3）在细胞外液无钙时，血管段舒缩活动减弱。（4）在细胞外液加入L-型钙通道阻断剂尼莫地平，血管段舒缩活动减弱。（5）在细胞外液加入CaCCs通道阻断剂尼氟灭酸（niflumic acid, NFA）和NPPB [5-nitro-2-（3-phenylpropylamine）benzoic acid]，压力诱发的血管舒缩活动减弱，并使脑基底动脉血管保持持续舒张。以上结果提示，管腔内压力诱发的脑基底动脉血管舒缩活动与细胞外钙内流及CaCCs作用相关。
- 王蕊李丽马克涛司军强
- 关键词：钙激活氯通道脑基底动脉
- TRPC1与Orai1的相互作用参与人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导的钙内流及一氧化氮生成
- 2018年
- 本研究旨在探讨Ca^(2+)感受蛋白经典瞬时感受器电位蛋白1(canonical transient receptor potential channel 1,TRPC1)与钙释放激活钙通道调节分子1(calcium release-activated calcium modulator 1,Orai1)的相互作用在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)钙敏感受体(Ca-sensing receptor,Ca R)介导的Ca^(2+)内流和一氧化氮(NO)生成中的作用。取2~3代HUVECs,单独或联合用Ca R激动剂精胺[Spermine,激活钙库活化的钙通道(store-operated calcium channels,SOC)和受体活化的钙通道(receptor-operated calcium channels,ROC)]、ROC模拟剂12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA)+Ca R负性变构调节剂Calhex231(阻断SOC,激活ROC)、PKC抑制剂Ro31-8220(激活SOC,阻断ROC)以及经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967(激活SOC,阻断ROC)处理。用免疫荧光技术检测HUVECs中TRPC1和Orai1的蛋白表达、共定位;用免疫共沉淀法检测TRPC1和Orai1之间的相互作用模式;随后用TRPC1和Orai1干扰质粒联合转染HUVECs,采用荧光探针同时检测HUVECs中[Ca^(2+)]i和NO生成的变化。结果显示,HUVECs中TRPC1和Orai1蛋白表达共定位于胞膜。与Spermine+Ca^(2+)组相比,Calhex231+TPA+Spermine+Ca^(2+)组、Ro31-8220+Spermine+Ca^(2+)组和Go6976+Spermine+Ca^(2+)组HUVECs中定位于胞浆中的TRPC1、Orai1蛋白表达均显著降低,二者的结合也减少。免疫共沉淀结果显示,Calhex231+TPA+Spermine+Ca^(2+)组、Ro31-8220+Spermine+Ca^(2+)组和Go6976+Spermine+Ca^(2+)组TRPC1/Orai1和Orai1/TRPC1相对比值百分数均明显低于对照组以及Spermine+Ca^(2+)组(均P<0.05),表明Orai1和TRPC1相互作用均减弱。联合转染质粒敲低TRPC1和Orai1显著降低Spermine+Ca^(2+)组、Calhex231+TPA+Spermine+Ca^(2+)组、Ro31-8220+Spermine+Ca^(2+)组和Go6976+Spermine+Ca^(2+)组的HUVECs中[Ca^(2+)]i和NO生成。以上结果提示,TRPC1与Orai1以二元复合物的形式激活SOC和ROC,介导Ca^(2+)内流及NO生成。
- 王腊梅唐娜钟华庞丽娟张春军何芳
- 关键词：钙敏感受体一氧化氮
- 钙敏感受体介导的人脐静脉内皮细胞钙内流及一氧化氮生成过程中TRPCI与STIM1的相互作用被引量：1
- 2017年
- 目的探讨经典瞬时受体电位通道1（TRPC1）与基质相互作用分子1（STIM1）在钙敏感受体（CaR）介导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）钙离子（Ca2＋）内流和一氧化氮（NO）生成中的相互作用。
方法取华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科健康孕产妇剖宫产新生儿的新鲜脐带，原代培养HUVEC并传代。将所得HUVEC分别与CaR激动剂精胺[激活钙池操纵性钙通道（SOC）和受体操纵性钙通道（ROC）]、ROC模拟剂12－O－十四烷酰佛波醇－13－乙酸酯（TPA）＋CaR负性变构调节剂Calhex231（阻断SOC阻、激活ROC）、蛋白激酶C（PKC）抑制剂Ro31－8220及经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967（激活SOC、阻断ROC）共孵育。采用免疫荧光技术检测HUVEC中TRPC1与STIM1的蛋白表达，免疫共沉淀法检测TRPC1与STIM1之间的相互作用。取2～3代HUVEC进行分组，将构建的TRPC1、STIM1干扰质粒（shTRPC1、shSTIM1）联合转染HUVEC即shTRPC1＋shSTIM1组 （实验组）、vehicle－shTRPC1＋vehicle－shSTIM1组 （空质粒组）和对照组，将3组细胞分别加入上述4种不同的药物进行干预。采用荧光探针Fura－2/AM检测HUVEC细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）的变化，NO荧光探针DAF－FM负载方法同步检测HUVEC中NO生成的变化。
结果（1） HUVEC中TRPC1与STIM1的蛋白表达：激光共聚焦显微镜下观察，正常对照组HUVEC中TRPC1和STIM1蛋白的表达呈阳性，二者共定位于胞浆。Calhex231＋TPA＋精胺＋Ca2＋组、Ro31－8220＋精胺＋Ca2＋组和Go6976＋精胺＋Ca2＋组HUVEC中定位于胞浆中的TRPC1、STIM1均减少，二者结合也减少。（2） HUVEC中TRPC1与STIM1的相互作用：Calhex231＋TPA＋精胺＋Ca2＋组、Ro31－8220＋精胺＋Ca2＋组和Go6976＋精胺＋Ca2＋组STIM1/TRPC1和TRPC1/STIM1的相对比值的百分数分别为（25.98±2.17）%和（44.10±4.01）%、（20.85±1.01）%和（46.31±3.47）%、（23.88±2.05）%和（39.65±2.91）%�
- 王腊梅钟华唐娜庞丽娟张春军何芳
- 关键词：内皮细胞脐静脉受体钙敏感一氧化氮
- TGF-β/Smad信号通路与食管癌上皮间质转化的研究进展被引量：1
- 2013年
- 国内外的多项研究显示,在消化系统肿瘤中普遍存在上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)现象,并与浸润转移及预后差密切相关。已有研究发现转化生长因子-β(TGF-β)在诱发EMT过程中起重要作用,而Smads蛋白是TGF-β下游关键的信号蛋白分子,是将TGF-β信号从细胞外转导到细胞核内的关键因子。本文就食管癌上皮-间质转化与TGF-β/Smad信号通路关系的研究进展作一综述。
- 李秋香李锋谢建新庞丽娟
- 关键词：上皮-间质转化食管癌TGF-ΒSMAD
- 新疆哈萨克族食管鳞癌中TGF-β1、p-Smad2/3的表达及意义被引量：9
- 2013年
- 目的探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、p-Smad 2/3蛋白在新疆哈萨克族食管鳞癌组织和癌旁正常黏膜组织中的表达及意义。方法选取96例食管鳞癌石蜡组织及46例癌旁石蜡组织制成组织芯片,采用免疫组化EnVision两步法检测TGF-β1、p-Smad 2/3的表达。结果 TGF-β1和p-Smad 2/3蛋白在食管鳞癌组织中阳性率分别为89.6%(86/96)、80.2%(77/96),与癌旁组织阳性率47.8%(22/46)、50.0%(23/46)相比,差异均有统计学意义(P<0.001),与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、有无淋巴结转移及临床分期无相关性(P>0.05);食管鳞癌组织中TGF-β1、p-Smad 2/3的表达呈正相关,差异均有统计学意义(r=0.344,P<0.05)。结论 TGF-β1及p-Smad 2/3可能在新疆哈萨克族食管鳞癌的发生中起重要作用。
- 李秋香庞丽娟蒋金芳梁伟华谢建新李锋
- 关键词：鳞癌TGF-Β1组织芯片
- TGF-β1/Smad信号通路的激活对招募间充质干细胞在血管损伤中的表达变化及意义被引量：5
- 2014年
- 探讨转化生长因子-β1(Transforming growth factor,TGF-β1)在介入性血管损伤后新生内膜的形成过程中发挥的作用以及TGF-β1对间充质干细胞(MSCs)可能与新生内膜的发生发展存在的关系。本实验通过建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型,检测动脉损伤后不同时间点新生内膜中各蛋白的表达变化,以探讨TGF-β1/Smad信号通路的活化与内膜增生以及TGF-β1与MSCs招募的关系。以计算机图像分析系统计算损伤血管内膜增生程度的变化,免疫组化En Vision二步法检测血管损伤后7、14、21 d时新生内膜中TGF-β1、P-Smad2/3、Nestin及Ki-67的蛋白表达。结果显示:(1)大鼠颈动脉球囊损伤后不同时间点血管内膜增生程度不同,损伤后7 d开始形成少量内膜,14d显著增多,21 d达最大厚度;(2)TGF-β1、P-Smad2/3于新生内膜中的表达含量变化与Ki-67阳性指数正相关;(3)Nestin在损伤血管内的表达阳性指数与TGF-β1的表达量正相关。由此可知,TGF-β1对血管损伤后内膜增生的促进作用可能通过Smad经典信号通路,且在损伤过程中,TGF-β1的分泌可能招募循环中的MSCs至损伤血管处,共同参与损伤后的血管重塑。
- 魏翠蕾邹泓段军仓刘克坚赵伟王成燕蒋金芳梁伟华王毅训庞丽娟李锋
- 关键词：球囊损伤再狭窄间充质干细胞
- 新疆石河子市2010年胃癌发病和死亡流行特征被引量：5
- 2014年
- [目的]了解2010年石河子市胃癌发病与死亡的流行特征,为胃癌的预防控制提供科学依据。[方法]根据石河子市肿瘤登记处2010年登记的恶性肿瘤发病及死亡资料,统计和分析胃癌的粗发病率、粗死亡率、年龄别发病率、年龄别死亡率、男女性发病率、中标率及世标率。[结果]2010年石河子市胃癌新发病例100例,死亡病例44例,胃癌粗发病率为17.44/10万（男性25.63/10万,女性9.14/10万）,中标率为9.34/10万,世标率为12.86/10万。胃癌粗死亡率为7.67/10万（男性12.12/10万,女性3.16/10万）,中标率为3.79/10万,世标率为5.45/10万。胃癌发病率和死亡率均为男性高于女性,且发病率从50岁以后快速上升,并随着年龄的增长而增高（χ2趋势发病=186.163,P〈0.05）,在75~岁年龄组达到高峰,为196.83/10万;胃癌死亡率在60岁以后随着年龄的增长而升高（χ2趋势死亡=79.405,P〈0.05）,在85岁以上年龄组达到高峰,为97.34/10万。[结论]石河子市胃癌发病和死亡水平较低,应重点对男性及50岁以上的人群开展早诊早治,有效降低石河子市胃癌流行水平。
- 庞丽娟李述刚陈云昭贾丽萍李慧张学飞姜新华李锋
- 关键词：胃癌发病
- 2-APB对自发性高血压大鼠脑微动脉平滑肌细胞缝隙连接的影响被引量：2
- 2014年
- 为探讨正常血压Wistar大鼠(Wistar rat,WR)和自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertensive rat,SHR)脑微动脉段平滑肌细胞电生理学及偶联力的异同,并观察2-氨基乙基二苯硼酸酯(2-Aminoethoxydiphenyl borate,2-APB)对脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接的影响。应用全细胞膜片钳技术方法,观察2-APB对WR和SHR脑微动脉段上平滑肌细胞膜电容(Cinput)、膜电导(Ginput)和膜电阻(Rinput)的影响。结果显示,(1)SHR收缩压明显高于正常WR,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)SHR脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput和Ginput高于WR,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)2-APB可以浓度依赖性的降低脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput和Ginput(或者增加Rinput)。(4)2-APB抑制WR和SHR脑微动脉段上平滑肌细胞Ginput的IC50分别为0.21μmol/L和0.83μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)2-APB浓度≥100μmol/L时,WR和SHR脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput、Ginput或Rinput与单个平滑肌细胞十分接近。由此可知,SHR较WR脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接耦联力增强,2-APB可以浓度依赖地抑制WR和SHR脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接,且对SHR的抑制效力较强。
- 王洋马克涛张雯李丽赵磊魏丽丽司军强
- 关键词：自发性高血压大鼠平滑肌细胞
- STIM2、TRPC3在人脐静脉内皮细胞外钙敏感受体介导的钙内流和NO生成中的作用被引量：3
- 2014年
- 目的:研究Ca2+感受蛋白基质相互作用分子2(STIM2)及瞬时型感受器电位3(TRPC3)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞外钙敏感受体(CaR)介导钙内流和NO生成中的作用。方法:1免疫荧光技术检测HUVEC中STIM2和TRPC3的蛋白表达。2利用转染技术将构建的STIM2干扰质粒(STIM2shRNA)和TRPC3干扰质粒(TRPC3shRNA)分别转染入HUVEC,实时定量RT-PCR和Western blot检测STIM2shRNA、TRPC3shRNA转染后的抑制效率。3取2~5代细胞随机分组:实验组(即精胺+Ca2++shSTIM2-002组和精胺+Ca2++shTRPC3-004组),其余两组分别为对照组(Control组,即精胺+Ca2+组),空质粒组(Vehicle组,即精胺+Ca2++Vehicle组),分别将上述4组细胞与CaR激动剂孵育,各组用荧光探针Fura-2/AM、DAF-FM负载方法同步测定[Ca2+]i和NO生成的变化。结果:1免疫荧光技术检测显示STIM2和TRPC3两者均表达于HUVEC胞浆。2实时定量RT-PCR及Western blot检测结果显示:与Control组相比,shSTIM2-002和shTRPC3-004干扰后,STIM2和TRPC3mRNA的表达均明显降低(抑制率分别为88.2%和74.0%,P<0.05);STIM2和TRPC3蛋白的表达亦明显降低(抑制率分别为79.9%和71.8%)(P<0.05)。3[Ca2+]i△ratio值和NO净荧光强度值的测定结果显示:与精胺+Ca2+组的[Ca2+]i、NO净荧光强度值相比,精胺+Ca2++ShSTIM2-002组、精胺+Ca2++ShTRPC3-004组及精胺+Ca2++Vehicle组均无显著差异(均P>0.05)。结论:STIM2和TRPC3均未单独参与CaR介导的Ca2+内流和NO的生成过程。
- 王静钟华赵慧王腊梅庞丽娟孙志萍何芳
- 关键词：人脐静脉内皮细胞
- 转化生长因子β1在大鼠血管损伤后对间充质干细胞分布及血管内膜增生的作用
- 目的:通过复制大鼠颈总动脉球囊损伤模型,观察损伤后血管内膜的形态变化并检测新生内膜中间充质干细胞（MSCs）标记物的表达情况及外周血和骨髓中MSCs的含量,探究大鼠血管内膜损伤后TGFβ1对MSCs分布及血管内膜增生的影...
- 王成燕
- 关键词：TGFΒ1间充质干细胞球囊损伤新生内膜
- 文献传递
