国家自然科学基金(81160008) 作品数:13 被引量:63 H指数:5 相关作者: 丁毅鹏 孙娟 周小曼 李元明 鲍传裕 更多>> 相关机构: 海南省人民医院 海南医学院 南华大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
转录组测序分析COPD患者外周血单个核细胞lncRNA表达差异 被引量:1 2020年 目的:筛选慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者外周血单个核细胞中异常表达的lncRNA。方法:收集本院3例COPD病人与3例正常人对照外周血,分离单个核细胞,提取RNA后进行转录组测序,根据P<0.05且|log2FC|>1计算两组样本的表达差异,绘制差异lncRNA热图与火山图。通过Lncpro数据库可能预测差异lncRNA调控的mRNA,并进行GO功能与KEGG信号通路聚类。结果:COPD组和对照组两组间满足P<0.05且|log2FC|>1差异条件的lncRNA共计67个,其中上调33个,下调34个。靶基因主要富集的GO功能:多细胞生物过程的调控功能、发展过程的调控功能、结构体形态发生功能、系统发展功能与发展过程功能。靶基因主要富集的KEGG信号通路:多物种凋亡通路、TGF-β信号通路、补体和凝血级联通路、结肠直肠癌通路与细胞凋亡通路。结论:本研究结果提供了COPD外周血单个核细胞中lncRNA表达变化的一般情况与可能调控功能与通路,可能有助于阐明COPD的潜在机制。 李全妮 赵洁 杨益秀 孙娟 孙娟 柳建芳 周小曼 丁毅鹏关键词:转录组测序 单个核细胞 辛伐他汀治疗慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压疗效观察 被引量:21 2014年 目的观察辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺动脉高压(PAH)患者的治疗效果。方法选择COPD合并PAH患者80例,随机分为治疗组和对照组各40例。对照组予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上口服辛伐他汀,治疗前和治疗3个月后观察第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)和用力肺活量(FVC)、肺动脉平均压(PAPm)、肺动脉收缩压(PAPs)、血清C-反应蛋白(CRP)和一氧化氮(NO)等水平的改变情况。结果治疗3个月后,两组FEV1%和FVC较治疗前均升高,但治疗组较对照组更明显,差异均有统计学意义(P<0.05);两组PAPm、PAPs、血清CRP均较治疗前明显下降、血清NO较治疗前明显升高,治疗组较对照组更显著,其差异均有统计学意义(P<0.05)。结论辛伐他汀能明显改善COPD合并PAH患者的肺功能,并可能通过抑制炎症反应、增加NO含量、改善内皮功能等机制降低肺动脉高压。 孙娟 丁毅鹏关键词:辛伐他汀 慢性阻塞性肺疾病 高血压 肺动脉高压 新活素治疗慢性肺源性心脏病合并心力衰竭临床观察 被引量:9 2014年 目的观察新活素(冻干重组人脑利钠肽)治疗肺源性心脏病并心力衰竭患者的临床疗效。方法选择60例肺源性心脏病心力衰竭患者,采用随机数字表法随机分为治疗组和对照组各30例。对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用新活素,治疗前和治疗5 d后观察两组的疗效及肺动脉平均压(PAPm)、肺动脉收缩压(PAPs)、血浆中氨基末端B型利钠肽前体(NT-pro BNP)水平、左室射血分数(LVEF)、心脏指数(CI)等指标变化。结果治疗5 d后,治疗组总有效率为96.67%,显著优于对照组的80%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后对照组的PAPm、PAPs较治疗前无明显改善,而治疗组的PAPm、PAPs则较前降低;血NT-pro BNP水平两组均降低,治疗组较对照组更明显,差异有统计学意义(P<0.01);CI、LVEF两组均有改善,但治疗组较对照组更明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论新活素能明显降低肺源性心脏病心力衰竭患者的肺动脉压等右心负荷以及改善LVEF、CI等左心功能,降低血浆NT-pro BNP水平,治疗效果明显,无明显副作用,可用于肺心病心衰治疗。 孙娟 丁毅鹏关键词:冻干重组人脑利钠肽 肺源性心脏病 心力衰竭 充血性 CSE诱导支气管上皮细胞分泌外泌体miR-186促进肺成纤维细胞增殖 被引量:2 2021年 目的:研究香烟提取物(cigarette smoke extract,CSE)对支气管上皮细胞16HBE外泌体miR-186表达量的影响,以及16HBE来源的外泌体miR-186对肺成纤维细胞增殖的影响。方法:收集CSE处理的16HBE细胞上清中外泌体miR-186,用于MRC-5细胞培养;使用qPCR检测外泌体miR-186的表达;使用CCK-8检测MRC-5细胞增殖能力;使用双荧光素酶验证miR-186与Bcl2L11基因的靶向结合,使用Western blot检测Bcl2L11的表达。结果:透射电镜观察到16HBE细胞上清外泌体直径约100 nm的球形结构形态;CSE处理明显促进外泌体miR-186的表达;CSE诱导的外泌体miR-186能促进MRC-5细胞增殖;miR-186与Bcl2L11存在靶向结合关系;miR-186 mimic明显抑制了Bcl2L11的表达。结论:CSE诱导的16HBE细胞外泌体miR-186通过靶向结合Bcl2L11基因,在成纤维细胞增殖中起到重要作用。 徐冬川 何蝉伊 林琦 丁毅鹏关键词:香烟提取物 外泌体 Mir-141靶向结合ZEB1调控肺成纤维细胞的增殖和凋亡 被引量:1 2019年 目的:研究mir-141在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)单个核细胞表达的意义,证明其对纤维细胞增殖凋亡的影响及靶向锌指蛋白E盒结合同源异形盒1蛋白(zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)的可能。方法:收集在我院40例COPD急性期,80例COPD稳定期病人和110例正常人对照的单个核细胞,RT-PCR检测mir-141并统计分析。构建mir-141 mimic,转染肺成纤维细胞,RT-PCR检测mir-141表达情况,CCK8检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Targetscan预测ZEB1与mir-141的靶向关系,并使用RT-PCR与western blot进行验证。结果:COPD急性期与稳定期单个核细胞mir-141的表达显著高于正常对照组,而在COPD急性期显著高于COPD稳定期。使用mir-141 mimic转染后,mir-141显著上调,细胞活性明显促进,细胞凋亡率下降。Targetscan数据库预测ZEB1与mir-141有结合位点,双荧光素酶实验证实ZEB1与mir-141存在结合位点结合。使用mir-141 mimic转染后,ZEB1 mRNA与蛋白表达均下调。结论:COPD中高表达的mir-141可能通过靶向结合ZEB1促进肺成纤维细胞增殖,抑制凋亡。 杨益秀 孙娟 周小曼 李全妮 吴慈冰 赵洁 柳建芳 冯琼 丁毅鹏关键词:COPD 增殖 凋亡 RNA测序探讨COPD患者外周血单个核细胞环状RNA表达差异 被引量:3 2021年 目的:通过RNA测序技术检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)差异环状RNA并阐述其可能的功能与调控机制。方法:分别采集5例COPD患者与5名正常人外周血,分离单个核细胞,进行去线性化得到环状RNA,并建库测序,以变化倍数Foldchange绝对值≥2且P<0.05统计分析差异环状RNA,并通过来源基因功能与信号通路聚类分析环状RNA可能的功能与通路。结果:测序鉴定到1 215个环状RNA,具有显著差异的环状RNA共计187个,其中上调107个,下调80个;环状RNA来源基因功能富集最明显的功能是:细胞过程、细胞与结合。环状RNA来源基因变化最明显的前3个通路分别是:非同源末端连接通路、铁死亡通路与FoxO信号通路。结论:RNA测序发现了COPD中显著变化的环状RNA,以及环状RNA可能调控的功能与通路,为从环状RNA这个新角度理解COPD的发病机制提供理论依据。 张君 张君 孙娟 詹峰关键词:COPD 测序 Expression and clinical significance of miR-186 in serum exosomes of patients with chronic obstructive pulmonary disease 2020年 Objective:To study the expression of miR-186 in serum exosomes of patients with chronic obstructive pulmonary disease,and to explore its clinical significance with chronic obstructive pulmonary disease.Methods:The peripheral blood sera of 53 COPD patients and 53 normal persons in our hospital were collected.Extraction of exosomes and electron microscopy to identify the characteristics of exosomes.RT-PCR method was used to detect the miR-186 expression level in serum exosomes.And statistical analysis of the expression difference between the COPD group and the normal group,alysis of the correlation between miR-186 and FEV1%predicted value,and ROC curve analysis of the diagnostic value of serum exosome miR-186 in COPD.Results:The relative expression of miR-186 in serum exosomes of COPD group was 3.24±0.14,which was significantly higher than that of normal control group 1.03±0.04(t=15.47,P<0.001).The expression level of miR-186 was negatively correlated with the predicted FEV1%of COPD patients(r=-0.5024,p<0.0001).The area under the ROC curve between miR-186 and COPD patients was 0.8409(95%confidence interval:0.6875-0.9943).Conclusion:The high expression of miR-186 in serum exosomes may be a risk factor and may be used as a diagnostic indicator of COPD. Yu-Fei Xie Jie Zhao Yi-Xiu Yang Juan Sun Xiao-Man Zhou Jian-Fang Liu Qiong Feng Yi-Peng Ding关键词:COPD EXOSOMES MIRNA 骨髓间充质干细胞移植在急性肝衰竭中的应用效果及对IL-10水平的影响研究 被引量:10 2020年 目的:探讨骨髓间充质干细胞移植在急性肝衰竭中的应用效果及对IL-10水平的影响。方法:采用差速离心法完成骨髓间充质干细胞分离及培养。制备大鼠急性肝衰竭动物模型。建模成功后随机将大鼠分为模型对照组(n=15)和治疗组(n=15),比较各组肝功能、炎症因子水平及肝脏组织切片HE染色。结果:①电子显微镜结果显示:分离制备的细胞多呈梭形生长,有粗大的突起,且细胞培养后5 d可见细胞成纤维样生长并向瓶底克隆;传代后细胞呈长梭形、纺锤形,未见细胞分化;流式细胞仪结果表明:分离制备的细胞中CD29+占99.5%、CD44+占96.4%、CD90+占96.70%,而CD45+仅为0.60%,说明获得的细胞纯度较高,符合骨髓间充质干细胞特性;②治疗组移植后ALT、AST、TBIL水平均低于模型对照组(P<0.05);治疗组移植后ALB水平高于模型对照组(P<0.05),治疗组与模型对照组ALT、AST、TBIL水平均高于假手术组(P<0.05);③治疗组移植后炎症因子TNF-α、IL-6及IL-10水平均低于模型对照组(P<0.05);④假手术组未参与建模,HE染色下肝细胞分布均匀、饱满,未见炎症反应;假手术组HE染色下肝小叶结构严重破坏,肝细胞膨胀、肿大,可见大量炎症细胞浸润;治疗组HE染色下肝细胞受到破坏,存在部分炎症细胞聚集,肝细胞略微肿大。结论:骨髓间充质干细胞移植用于肝衰竭中能提高肝功能水平,能降低IL-10水平,减轻肝脏局部炎症细胞聚集,从而缓解肝脏组织病理损伤。 李文武 鲍传裕 李元明(指导)关键词:骨髓间充质干细胞 急性肝衰竭 白细胞介素10 炎症因子 miR-186在慢性阻塞性肺疾病患者血清外泌体中表达与临床意义 被引量:6 2020年 目的:研究miR-186在慢性阻塞性肺疾病患者血清外泌体中的表达,探讨其与慢性阻塞性肺疾病(COPD)的临床意义。方法:收集本院53例COPD患者与53例正常人对照外周血血清,抽提外泌体并进行电镜鉴定外泌体特征,RT-PCR方法检测血清外泌体中miR-186的表达量并统计分析COPD组与正常组表达差异,分析miR-186与FEV1%预计值相关性,以及ROC曲线分析血清外泌体miR-186在COPD的诊断价值。结果:透射电镜观察到血清外泌体直径约100 nm的球形结构形态;COPD组血清外泌体中miR-186相对表达量明显高于正常对照组(t=15.47,P<0.001);miR-186表达水平与COPD患者的FEV1%预计值呈负相关(r=-0.5024,P<0.0001);miR-186区分COPD患者与正常人的ROC曲线下面积为0.8409(95%置信区间:0.6875~0.9943)。结论:血清外泌体中miR-186高表达可能是危险因素,可能作为COPD的诊断指标。 谢羽飞 赵洁 杨益秀 孙娟 孙娟 柳建芳 周小曼 丁毅鹏关键词:COPD 外泌体 MIRNA 生物标记 lncRNA SNHG3在慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞表达与临床意义 被引量:6 2020年 目的研究lncRNA SNHG3在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞表达,探讨其与慢性阻塞性肺疾病临床意义。方法收集120例COPD病人与110例正常人对照单个核细胞,RT-PCR方法检测外周血单个核细胞中lncRNA SNHG3的表达量并统计分析COPD组与正常组表达差异,COPD肺功能轻度、中度、重度与极重度组之间的表达差异。结果COPD组外周血单个核细胞中SNHG3相对表达为(1.52±0.52),低于正常对照组(2.51±0.59)(P<0.001)。肺功能轻度组外周血单个核细胞中SNHG3相对表达为(2.16±0.23),高于中度组(1.55±0.10)(P<0.001)、重度组(1.19±0.11)(P<0.001)、极重度组(0.89±0.06)(P<0.001)。此外,lncRNA SNHG3可以靶向结合并调控miR-186的表达。结论慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中lncRNA SNHG3表达量低可能是COPD的危险因素,这或许能够作为COPD患者严重程度的指标之一。lncRNA SNHG3/miR-186调控网络可能在COPD的发生发展过程中起到重要作用。 徐建光 赵洁 杨益秀 陈飞 黄良 李秀宽 郭多见 孙娟 孙娟 柳建芳 周小曼 石慧芳 丁毅鹏关键词:COPD 单个核细胞