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表达人端粒酶逆转录酶小干扰RNA的增殖腺病毒对肝癌细胞的抑制作用被引量：1: 2008年; 目的观察表达人端粒酶逆转录酶小干扰RNA（hTERT—siRNA）的增殖腺病毒（ZD—hTERT）对人肝癌Bel-7402细胞增殖及凋亡影响。方法ZD—hTERT、增殖腺病毒ZD—EGFP、表达hTERT—siRNA的增殖缺陷腺病毒Ad—hTERT、增殖缺陷腺病毒Ad—EGFP分别感染人肝癌Bel-7402细胞。Western blot法检测E1A表达；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Western blot法检测hTERT表达；噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞存活；结晶紫染色法检测细胞毒作用；原位末端标记法（TUNEL）检测凋亡。结果感染ZD—hTERT、ZD-EGFP的Bel-7402细胞表达E1A；抑制hTERT表达作用依次为ZD—hTERT〉Ad—hTERT〉ZD—EGFP〉Ad—EGFP；抑制Bel-7402细胞生长及细胞毒作用依次为ZD—hTERT〉ZD—EGFP=Ad—hTERT〉Ad—EGFP。感染ZD—hTERT、ZD—EGFP、Ad—hTERT、Ad—EGFP的Bel-7402细胞凋亡率（％）分别为（88．1±2．2）、（39．2±2．1）、（42．1±5．1）、（7．5±2．1），ZD—hTERT诱导凋亡作用最高（P〈0．01）。结论表达hTERT—siRNA的增殖腺病毒能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞hTERT基因表达，进而抑制其增殖，促进其凋亡。; 徐为刘俊杰宋文哲毛立军高超韩东裴冬生郑骏年; 关键词：腺病毒 HTERT基因

增殖及非增殖腺病毒载体介导的RNA干扰对肾癌细胞杀伤作用被引量：6: 2007年; 目的比较荷载Ki67基因小于扰RNA(Ki67-siRNA)的增殖腺病毒ZD55-Ki67及非增殖腺病毒Ad-Ki67对肾癌细胞的杀伤作用。方法MOI=10的ZD55-Ki67、Ad-Ki67感染肾癌786-0细胞,2d后收集细胞,蛋白印迹法检测E1A表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹法、免疫细胞化学法检测Ki67表达;原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡。4 d后噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,7 d后结晶紫染色法检测细胞毒性作用。结果感染ZD55-Ki67的786-0细胞表达E1A,感染Ad-Ki67的细胞不表达E1A。ZD55-Ki67、Ad-Ki67感染的786-0细胞Ki67 mRNA表达率分别为(37.9±2.3)%、(64.1±1.9)%;Ki67蛋白表达率分别为(42.5±2.4)%、(60.1±2.2)%;Ki67染色阳性率分别为(20.8±2.8)%、(32.3±2.5)%;786-0细胞存活率分别为(22.2±3.0)%、(60.4±3.4)%;凋亡率分别为(53.0±3.7)%、(35.3±2.5)%,两种病毒处理之间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论ZD55-Ki67抑制786-0细胞Ki67表达及增殖、诱导凋亡及细胞毒性作用均显著优于Ad-Ki67。增殖腺病毒介导的RNA干扰杀伤肾癌细胞作用优于非增殖腺病毒。; 郑骏年毛立军温儒民刘俊杰李望薛松孙晓青韩瑞发马腾骧; 关键词：腺病毒 RNA干扰肾癌

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江苏省自然科学基金(BK2006036)