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江苏省自然科学基金(BK2006055)
作品数:
1
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相关作者:
王勇
戴海萍
陈苏宁
张俊
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中华血液学杂...
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2009
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一株新的急性髓系白血病细胞系SH-2的建立及其鉴定
被引量:1
2009年
目的采用自体骨髓基质细胞与原代白血病细胞加rhIL-3后共培养的方法建立1株新的人急性髓系白血病(AML)细胞系SH-2,并对其生物学特征进行全面鉴定。方法采集1例经联合化疗和异基因外周血干细胞移植未缓解的AML—M2a型患者骨髓,分离单个核细胞,加入含20%胎牛血清的IMDM培养基内置37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱中传代培养,培养过程中保留自体骨髓基质细胞,同时加入细胞因子rhIL-3,长期体外培养成功建立伴有-Y,der(16)t(16;17)(q24;q12),-17,+19和p53突变的AML细胞系SH-2,并通过细胞学、遗传学、免疫学、分子学和小鼠致瘤实验等多种方法对SH-2细胞的生物学特征进行全面鉴定。结果SH-2细胞已在体外持续生长3年余而不需加用生长因子和基质细胞。其EB病毒、支原体检测均为阴性。SH-2细胞具有和原代白血病细胞相同的髓系细胞形态学特点,伴有自然杀伤相关抗原表达的AML免疫表型(CD13^+、CD33^+、CD56^+、CD16/56^+)和45,X,-Y,der(16)t(J6;17)(q24;q12),-17,+19的亚二倍体核型,后者逐渐被伴有上述染色体异常的近四倍体核型所取代.荧光原位杂交(FISH)和多色FISH证实了以上异常,并揭示-17导致1个p53基因丢失。DNA序列分析揭示另1个p53等位基因第5号外显子的576编码子点突变(CAG→CAT)。RT—PCR显示除了表达千细胞因子(SCF)外,其余细胞因子均不表达;不表达多药耐药基因而表达凋亡相关基因,如bcl-2、Fas、GST-π和p21。短串联重复序列PCR证明了SH-2细胞和患者白血病细胞的同源性。SH-2细胞有一定的集落形成能力并能在裸鼠皮下及SCID小鼠内脏成瘤。结论SH-2是一株新的具有明晰生物学背景的AML细胞系,为白血病研究提供了又一有用工具。
仇惠英
薛永权
张俊
戴海萍
潘金兰
吴亚芳
陈苏宁
王勇
沈娟
孙爱宁
吴德沛
关键词:
间质细胞
白细胞介素3
细胞系
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