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国家自然科学基金(30571246)

作品数:6 被引量:23H指数:3
相关作者:李多川赵培宝任爱芝周庆新徐荣燕更多>>
相关机构:山东农业大学聊城大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 2篇会议论文

领域

  • 6篇农业科学
  • 3篇生物学

主题

  • 4篇蛋白
  • 4篇基因
  • 3篇蛋白激酶
  • 3篇真菌
  • 3篇农杆菌
  • 3篇纤细
  • 3篇镰刀
  • 3篇镰刀菌
  • 3篇菌寄生真菌
  • 3篇激酶
  • 3篇寄生
  • 3篇寄生真菌
  • 3篇插入突变
  • 3篇串珠镰刀菌
  • 2篇突变
  • 2篇突变体
  • 2篇农杆菌介导
  • 2篇限制性内切酶
  • 2篇内切
  • 2篇内切酶

机构

  • 8篇山东农业大学
  • 5篇聊城大学

作者

  • 6篇赵培宝
  • 6篇李多川
  • 3篇任爱芝
  • 2篇周庆新
  • 1篇徐后娟
  • 1篇郭芳先
  • 1篇徐荣燕
  • 1篇张亚波
  • 1篇李安娜
  • 1篇刘连盟

传媒

  • 2篇植物病理学报
  • 2篇中国植物病理...
  • 1篇中国生物防治
  • 1篇微生物学通报
  • 1篇菌物学报
  • 1篇基因组学与应...

年份

  • 3篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2008
  • 3篇2007
6 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
菌寄生真菌纤细齿梗孢一丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶基因OPK1的克隆及序列分析被引量:1
2010年
Using degenerate PCR and TAIL-PCR,a protein kinase gene OPK1(Genebank accession No.:EU417815) was cloned from mycoparasite fungi Olpitrichum tenellum.OPK1 has an open reading frame of 2 031 bp interrupted by two introns(108 bp,84 bp) and putatively encodes a protein of 676 aa.Phylogenetic analysis indicated that OPK1 was most similar to other serine-threonine protein kinase in fungi.Southern blot analysis indicated that OPK1 is present as a single copy in the genome.RT-PCR showed it could be transcribed both in the phase of spore germination and hyphal growth.
赵培宝任爱芝李多川
关键词:蛋白激酶基因菌寄生真菌有丝分裂原活化蛋白激酶细胞内信号转导可逆磷酸化
链格孢ATMT转化体系的构建及弱毒突变株验证被引量:9
2009年
本文利用来自质粒pUCATPH的构巢曲霉色氨酸合成基因trpC的启动子(PtrpC)、终止子(TtrpC)和潮霉素磷酸转移酶抗性基因(hph)以及植物表达载体pROKⅡ成功构建了适用于丝状真菌的根癌农杆菌介导转化的双元载体pROKIIHPH,并转化根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404,建立了根癌农杆菌LBA4404介导的链格孢Alternaria alternata分生孢子转化体系;再从乙酰丁香酮(AS)浓度、不同的共培养时间、受体菌分生孢子浓度和农杆菌菌液浓度对A. alternata转化效率的影响对体系进行优化。结果确定了根癌农杆菌菌液体积为200mL(OD600=0.15),A. alternata分生孢子浓度为106个/mL,在A. tumefaciens的预培养时期以及与A. alternata共培养时期分别加入200μmo1/LAS,共培养时间48h,转化率达120~200个/105分生孢子。在所筛选的约800个转化子中获得了1株毒性明显低于野生菌sd1的弱毒突变株t108,通过PCR验证推测其毒力降低可能由于T-DNA插入阻断了基因的表达。该实验结果为与突变相关基因的研究以及弱毒株t108的进一步研究和利用提供了实验材料,也为深入研究链格孢sd1菌株的基因功能奠定了基础。
徐后娟徐荣燕李多川
关键词:链格孢根癌农杆菌双元载体
限制性内切酶介导的串珠镰刀菌插入突变和致病性突变体的分离被引量:6
2007年
For studying on pathogenicity mechanism of Fusarium moniliforme,REMI was used to transform protoplasts of FT1 strain with the vector pUCATPH,which contained hygromycin B-resistant gene.More than 300 transformants had been obtained,most of them were quite stable after five rounds of successive culture.25 mutants of morphology and 2 weak pathogenicity mutants were gained by REMI.PCR amplification showed that the hygromycin B-resistant gene had integrated into genomes of the two pathogenicity mutants.The optimum conditions of preparing protoplasts were: the mycelia growing in PDB medium for 14 h,lywallzyme was used to digest the mycelia at 100 r/min,30℃ for 4 h,and 0.7 mol/L NaCl was used as the osmotic stabilizer.
赵培宝周庆新郭芳先李多川
关键词:插入突变限制性内切酶突变体串珠镰刀菌生物基因组
菌寄生真菌纤细齿梗孢FUS3/KSS1类MAPK基因的克隆和序列分析
2010年
采用RACE技术和TAIL-PCR相接合,克隆得到菌寄生真菌纤细齿梗孢的一个丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶基因,命名为omk1(GenBank accesion No.EU479712),其cDNA编码区1068bp,编码355个氨基酸的多肽;omk1基因编码区包含2个内含子,分别长57bp和73bp,内含子边界符合GT-AG规则。序列比对和分析显示该基因属于FUS3/KSS1类MAPK基因;RT-PCR显示该基因在孢子萌发和菌丝生长阶段均表达。该基因的克隆将为进一步研究该菌识别寄主信号的分子机理奠定基础。
赵培宝任爱芝李多川
关键词:蛋白激酶基因克隆
限制性内切酶和农杆菌介导的串珠镰刀菌插入突变与致病性突变体的分离
利用限制性内切酶介导的整合(REMI)和农杆菌介导的转化技术(ATMT)转化串珠镰刀菌(Fusarium verticillioides)FT1菌株,以研究其致病的分子机制。以含有潮霉素磷酸转移酶基因的质粒 pUCATP...
赵培宝周庆新任爱芝郭芳先李多川
文献传递
串珠镰刀菌一丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶基因FPK1的克隆与序列分析
依据几种丝状真菌丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶基因保守序列设计兼并引物,采用 RT-PCR, 3′RACE、5′RACE 技术扩增得到串珠镰孢菌(Fusarium verticillioide)的一蛋白激酶 CDNA 全长 (G...
赵培宝李多川
关键词:蛋白激酶RT-PCRRACE
文献传递
根癌农杆菌介导的轮枝镰孢菌遗传转化及T-DNA插入突变体的筛选被引量:9
2008年
建立并优化了农杆菌介导转化轮枝镰孢菌Fusarium verticillioides获得T-DNA插入突变体的体系,在镰孢菌孢子浓度106个/mL、农杆菌OD600=0.15-0.20、乙酰丁香酮浓度为200μmol/mL的条件下共培养36h转化率最高,可达60-120个/106个孢子。共获得转化子1000多个,连续转接5代能够稳定遗传。PCR验证潮霉素B抗性基因已整合进转化子基因组DNA中,部分转化子表现为生长和形态异常。该转化体系的建立为研究该菌的致病机制和功能基因分析奠定了基础。
赵培宝周庆新任爱芝李多川
关键词:转化率转化子
纤细齿梗孢丝氨酸蛋白酶cDNA克隆及其序列分析和表达被引量:1
2010年
纤细齿梗孢Olpitrichum tenellum是一种寄生在轮枝镰孢菌Fusarium verticillioides上的活体营养菌寄生真菌。丝氨酸蛋白酶在菌寄生过程可能起到重要作用。根据丝状真菌丝氨酸蛋白酶的同源保守序列设计简并引物,通过RT-PCR及RACE的方法,克隆得到1845bp的全长cDNA片段。其可读框为1554bp(GenBank登录号为EU368754),编码517个氨基酸的蛋白质。比对分析发现该蛋白是一种分泌型的丝氨酸蛋白酶,属于丝氨酸蛋白酶S8家族的枯草杆菌蛋白酶subtilisin,具有典型的信号肽-前肽-成熟肽的结构。将该基因可读框除去信号肽插入酵母表达载体pPIC9K,转化毕赤酵母Pichia pastoris GS115,在甲醇诱导下成功分泌出具有生物活性的重组蛋白酶,诱导120h后酶活性可达153U/ml。重组蛋白酶经DEAE-Sepharose层析进行纯化,SDS-PAGE分析其分子量为39kD。其反应的最适温度为60℃,最适pH为8。
刘连盟张亚波李安娜李多川
关键词:菌寄生真菌丝氨酸蛋白酶CDNA克隆毕赤酵母
共1页<1>
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