转基因生物新品种培育专项(2008ZX08006-003) 作品数:31 被引量:59 H指数:4 相关作者: 马红 汪亮 付博 李忠秋 张冬杰 更多>> 相关机构: 黑龙江省农业科学院 东北农业大学 东北林业大学 更多>> 发文基金: 转基因生物新品种培育专项 国家自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
猪GPAT基因SNPs位点分析和表达规律的研究 被引量:1 2012年 为了进一步探索谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶GPAT基因与肉质、风味性状的关系,采用PCR-SSCP方法分析其遗传多态性、采用Real time PCR方法分析其组织表达规律。在外显子1和14寻找到了3个单核苷酸多态位点,结果表明,各等位基因在民猪、大白、长白、杜洛克、北京黑猪和野家杂交猪中的分布存在着极显著的差异(P<0.01)。GPAT在所检测的12种组织中均表达,其中肝脏中表达量最高。研究结果为肉质和风味性状分子标记的确定提供了基础。 杨俊静 李海涛 张冬杰 杨秀芹 刘娣关键词:民猪 PCR-SSCP REAL-TIMEPCR 卵泡抑素对牛胚胎早期发育的影响 2012年 利用添加外源性卵泡抑素或抑制卵泡抑素基因表达的方法,以牛受精胚胎为研究对象,结果显示,胚胎阶段适当的添加卵泡抑素,可以加快胚胎发育,不但提高卵裂率,还可以在受精后7d提高囊胚发育率,这其中10μg/L的卵泡抑素为最佳添加量,达到35%的囊胚率。研究还发现,早期阶段沉默卵泡抑素基因,不会影响囊胚率,与处理组无显著差别。结果表明,可能在早期的胚胎发育的最初阶段,卵泡抑素并不是必须的,但如果外源性的添加适量的卵泡抑素可以在正常的基础上提高发育率。 郭镇华 刘娣 马红 李忠秋 付博 张东杰 汪亮 冯艳忠 唐晓东 张淼 王欣 张海波关键词:卵泡抑素 胚胎 线菌酮对猪卵母细胞孤雌发育影响的研究 <正>引言随着胚胎工程技术的发展,目前已得到了多种克隆和转基因动物,如牛,羊,猪等,但克隆效率仍然很低。因此人们希望了解胚胎早期发育的机理,改善胚胎早期发育的环境条件,受体卵母细胞激活方法作为核 马红 李忠秋 郭镇华 刘娣关键词:放线菌酮 卵母细胞 孤雌发育 文献传递 转猪MC4R基因小鼠模型的建立与检测 2013年 为了进一步探讨黑素皮质素4受体(melanocortin-4 receptor,MC4R)基因对动物采食量和生长性能的影响,本研究利用基因重组和显微注射的方法建立了转猪MC4R基因的小鼠模型。采用PCR扩增、克隆测序的方法对每代转基因小鼠进行阳性鉴定,然后采用常规测定方法对F3代转基因阳性鼠与同期阴性对照鼠的体重和采食量进行了测定。结果显示:成功构建了转猪MC4R基因小鼠模型,阳性鼠与阴性鼠相比,体重和采食量均略有增加,但未达到显著水平(P>0.05)。据此推测体内超表达MC4R基因并不能像敲除掉该基因一样显著地改变机体性能。 张冬杰 汪亮 刘娣 解宇 尹雪 李斌关键词:转基因小鼠 采食量 体重 猪黑素皮质素受体-4基因在成纤维细胞中的沉默研究 被引量:1 2012年 黑素皮质素受体-4(melanocortin receptor-4,MC4R)、黑素皮质素受体-3(melanocortin receptor-3,MC3R)、瘦素(Leptin)和缩胆囊素受体(cholecystokinin A receptor,CCKAR)基因均是与采食量相关的功能基因,为了研究这4个基因之间可能存在的互作关系,本研究采用RNAi方法,将体外培养的成纤维细胞中的MC4R基因沉默,然后采用Real-time PCR方法对Leptin、MC3R和CCKAR基因的表达变化情况进行了研究。结果表明,MC4R被沉默后,Leptin、MC3R和CCKAR的表达水平均没有发生显著变化。 张冬杰 汪亮 刘娣关键词:采食量 MC4R RNAI REAL-TIME 培养基中能量底物对猪胚胎发育的影响 被引量:2 2010年 旨在探讨丙酮酸和乳酸对猪(Susscrofa)胚胎早期发育的影响,将NCSU-23培养基中的5.56mmol/L葡萄糖替换为0.2mmol/L丙酮酸、5.7mmol/L乳酸,并将此培养基命名为mNCSU-23。根据实验设计,孤雌胚及核移植胚转移到mNCSU-23或NCSU-23中培养。激活第2天统计孤雌胚及核移植胚中的5~8细胞胚胎数。激活第6天统计孤雌胚及核移植胚囊胚形成率及囊胚细胞数。实验结果表明,mNCSU/NCSU处理组的5~8细胞胚胎数及囊胚数显著高于对照组(P<0.05);单纯使用mNCSU培养猪胚胎时,囊胚率最低,发育结果最差(P<0.05)。本研究证实,在体外培养前两天,用乳酸和丙酮酸代替培养基中的葡萄糖对胚胎发育有利。 付博 房庆昌 任亮 汪亮 孙洪涛 别墅 马红 刘娣关键词:孤雌胚 MC4R与Leptin、MC3R和CCKAR基因的互作研究 2012年 为了研究4个与采食量相关功能基因可能存在的互作关系,采用基因重组的方法构建了黑素皮质激素受体-4(MC4R)基因的真核表达载体,采用脂质体法将该表达载体转染入成纤维细胞,瞬时转染24 h后,采用Real-timePCR的方法检测和分析了Leptin、黑素皮质激素受体-3(MC3R)和猪缩胆囊素受体(CCKAR)基因mRNA的表达变化情况。结果表明,在成纤维细胞中,过表达MC4R基因后,Leptin、MC3R和CCKAR基因的mRNA水平均无显著变化。据此推测,MC4R基因与其他3个基因虽都参与调节动物的采食量,但很可能是通过不同的调控路径来发挥功能的。 张冬杰 汪亮 刘娣关键词:MC4R REAL-TIMEPCR 过表达 13/17罗伯逊易位猪NCOA1基因的多态性与产仔性状的相关分析 2010年 柏蒙蒙 侯永刚 孙泰雷 吴明明 孙金海关键词:候选基因 产仔性状 罗伯逊易位 母猪 多态性 雌激素受体 放线菌酮处理对猪孤雌激活及体细胞核移植胚胎发育的影响 本研究是为了确定放线菌酮在猪卵母细胞孤雌激活和体细胞核移植中的作用。实验一,对比了体外成熟的猪卵母细胞经电激活结合6-二甲氨基嘌呤或细胞松弛素B或放线菌酮处理对孤雌胚胎发育的影响;实验二,研究了放线菌酮预处理卵母细胞后再... 马红 付博 赵金凤 李忠秋 房庆昌 仁亮 刘娣关键词:放线菌酮 孤雌激活 体细胞核移植 文献传递 民猪CIRP基因的克隆与冷诱导研究 被引量:3 2012年 采用生物信息学结合RT-PCR的方法,克隆民猪的冷诱导RNA结合蛋白(Cold inducible RNA-binding protein,CIRP)基因,获得3个变异体序列。猪CIRP变异体1基因cDNA长1 278 bp(GenBank登录号:HQ908794),编码172个氨基酸;变异体2基因cDNA长1 653 bp(GenBank登录号:HQ908795),编码182个氨基酸;变异体3基因cDNA长1 765 bp(Genbank登录号:HQ908796),编码144个氨基酸。CIRP变异体2与变异体1相比,在其编码区的第501碱基处,出现了一段375 bp的插入片段,该插入片段的第46~48个碱基为TAG,使翻译提前终止;变异体3与变异体2相比,在其编码区的第428碱基处,出现一段115 bp插入片段,该插入片段的第5~7个碱基为TGA,使翻译提前终止。3种转录变异体的核苷酸序列同源性为86.45%,氨基酸序列同源性为87%。冷诱导后,CIRP基因在肌肉中的表达水平出现显著升高(P<0.05)。 张冬杰 刘娣 汪亮 别墅 杨国伟关键词:民猪 变异体