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国家大学生创新性实验计划(111048672)
作品数:
1
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相关作者:
易伟
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朱晓楠
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信号转导和转录激活因子3信号通路在多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1诱导U251细胞凋亡中的作用
被引量:4
2013年
目的探讨信号转导和转录激活因子3 (STAT3)信号通路在多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白l(LRIGl)诱导人脑胶质瘤细胞株U251细胞凋亡中的作用及机制。方法传代培养U251细胞,随机分为对照组、空载体组及实验组,应用脂质体介导的基因转染技术分别将磷酸盐缓冲液(PBS)、PEGFP-N1质粒体、PEGFP-LRIG1质粒体转染入各组细胞,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞体外生长活性,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)法经流式检测各组细胞凋亡率,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定各组细胞中STAT3的mRNA表达,Westernblot法测定各组细胞中STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、B淋巴细胞/白血病-2( bcl-2)、bax的蛋白表达。结果成功转染LRIG1,实验组细胞中LRIG1基因表达明显上调(P〈0.05);实验组细胞增殖显著受抑,48 h抑制率为(45. 12 ±0. 68)%,72h抑制率为(52. 24 ± 1. 77)%,总凋亡率由(2. 54 土0. 43)%增高至(22. 51 ±2. 12)%(P〈0. 05) ; RT-PCR检测显示实验组细胞中STAT3 mRNA表达明显降低;Western blot检测显示实验组细胞中STAT3蛋白表达及磷酸化水平明显降低,bcl-2表达明显降低,bax表达明显升高。结论LRIG1可促进U251细胞凋亡,其机制可能是通过下调STAT3信号通路,进而抑制STAT3激活的抗凋亡途径。
邓钢
郭振涛
田道锋
刘宝辉
朱晓楠
冀保卫
易伟
吴立权
陈谦学
关键词:
胶质瘤
信号转导和转录激活因子3
脱噬作用
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