国家高技术研究发展计划(2006AA020502)
- 作品数：13 被引量：62H指数：4
- 相关作者：杨荣存曾彬焦国慧俞银燕杨曙光更多>>
- 相关机构：南开大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金天津市科委基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 用分子对接搭建激酶-抑制剂复合物的三维结构被引量：1
- 2009年
- 由于蛋白激酶的异常激活导致了许多疾病,激酶抑制剂成为当今医药领域的研究热点.鉴于分子对接在药物设计中取得的成功,该技术被应用于激酶抑制剂的设计.应用分子对接软件包Autodock4对已知三维结构的激酶-抑制剂复合物进行模拟对接,对接所得抑制剂构象与晶体结构非常一致.进一步利用对应激酶在其他体系中的结构与抑制剂进行对接,也获得了与晶体结构一致的抑制剂构象,再现了抑制剂和蛋白间重要的相互作用,从而阐明了利用Autodock4探索激酶-抑制剂结合模式的可行性.
- 张宏恺常云松杜明娟张翠竹曹又佳
- 关键词：分子对接激酶抑制剂
- 肿瘤通过抑制树突状细胞功能逃避免疫监视的研究进展被引量：4
- 2008年
- 树突状细胞（DC）在T细胞介导的免疫反应中起核心作用，可在体内外诱导强烈的抗肿瘤免疫反应。DC作为恶性肿瘤免疫治疗因子被广泛的研究。如今，开发了多种基于DC的抗肿瘤免疫治疗。然而肿瘤也会影响宿主的造血功能以及导致大量未成熟和免疫耐受的DC产生，这些直接抑制免疫反应。了解肿瘤相关DC的免疫抑制作用机制，可提高对肿瘤免疫逃逸的认识。
- 代红胜曾彬杨荣存
- 关键词：树突状细胞肿瘤免疫逃逸
- α-葡萄糖苷酶抑制剂高通量筛选模型的建立及其应用被引量：11
- 2010年
- 【目的】针对人α-麦芽糖苷酶这个糖代谢途径中重要的靶蛋白,建立α-糖苷酶抑制剂高通量筛选模型。【方法】采用毕赤酵母表达系统克隆和表达人α-麦芽糖苷酶。利用酶的催化特性建立α-糖苷酶抑制剂筛选模型。应用该模型对放线菌代谢产物库进行高通量筛选。通过构建16SrRNA系统发育树分析阳性菌株的分类地位。【结果】首次成功克隆、表达了具催化活性的人α-麦芽糖苷酶N端结构域。针对人α-麦芽糖苷酶N端催化结构域,建立α-糖苷酶抑制剂的筛选模型。对包含近2000株放线菌代谢产物的天然产物库进行高通量筛选,最终得到20株α-麦芽糖苷酶抑制剂生产菌株。其中19株放线菌为链霉菌属,且在分类学上具有丰富的多样性。【结论】本研究建立的α-糖苷酶抑制剂高通量筛选模型具有很强的实用价值,可用于新型糖苷酶抑制剂类降糖药物的开发。
- 孟鹏齐西珍郑芳任丽梅白芳白钢
- 关键词：Α-糖苷酶抑制剂毕赤酵母表达系统放线菌
- 人RGS1基因克隆表达及其功能分析被引量：1
- 2009年
- 目的克隆并构建人RGS1表达载体,转染U937细胞和树突细胞,进行功能分析。方法通过RT-PCR方法克隆人RGS1基因,将其连接到pcDNA 3.1/V5表达载体。然后以连接的质粒为基础通过报告基因化学发光及ELISA方法对人RGS1基因的进行初步分析。结果经扩增及序列测定表明pcDNA-RGS1质粒构建成功,在U937细胞和树突细胞中可以表达。RGS1对U937细胞转录因子NFκ-B的活性有明显的抑制作用,同时明显上调树突细胞细胞因子IL-6的表达。结论在pcDNA-RGS1质粒成功构建基础上,证明了人RGS1基因具有免疫调节功能,为进一步研究其免疫应答中的调节作用奠定了基础。
- 刘昱焦国慧张灼寒曾斌陈思张圆杨荣存
- 关键词：免疫调节树突细胞
- 一株新的α-糖苷酶抑制剂生产菌株PW0852的初步研究被引量：2
- 2010年
- 从土壤中分离并筛选得到了一株α-糖苷酶抑制剂生产菌PW0852。根据形态特征、培养特征、生理生化特征及16S rRNA序列相似性分析等多相分类方法,初步判定菌株PW0852为淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulae)。该菌经10L发酵罐水平发酵,发酵液中可积累一定量的α-糖苷酶抑制剂。采用膜过滤技术、离子交换树脂吸附及冷冻干燥等方法,从PW0852发酵液中分离获得混合型α-糖苷酶抑制剂GIB852。GIB852对人类胰腺α-淀粉酶和α-麦芽糖酶都有明显的抑制作用,其对麦芽糖酶的抑制性比同剂量的市售双糖酶抑制剂米格列醇强28.7倍,而对α-淀粉酶的抑制性较弱。通过小鼠糖耐量实验,发现α-糖苷酶抑制剂GIB852对哺乳动物餐后高血糖的形成有明显改善作用,具有开发为糖尿病药物的潜力。
- 白芳张奇彭臻臻齐西珍白钢
- 关键词：发酵Α-糖苷酶抑制剂
- MyD88aa155-171功能区缺失对免疫相关细胞共刺激分子和细胞因子表达的影响被引量：1
- 2008年
- 利用重组PCR的方法,克隆并构建MyD88和MyD88aa155-171功能区缺失(MyD88Δ155-171)载体,转染免疫相关细胞并筛选获得稳定细胞系。报告基因实验结果显示MyD88MyD88Δ155-171功能区缺失能够抑制转录因子NF-κB和AP-1的活性,在不同Toll样受体(TLR)配体刺激后,转染MyD88Δ155-171的细胞表面分子的表达低于MyD88正常表达的细胞,并且抑制表面分子CD86和B7H1在TLR配体刺激后的上调。同时,多细胞因子分析系统的检测结果表明,给予TLR配体刺激之后,MyD88-/-树突细胞表达低水平的细胞因子,转染MyD88可以使细胞因子表达明显增加,而仅表达MyD88Δ155-171可以明显影响IL-12,IFN-γ的表达。以上结果表明MyD88功能区缺失影响免疫相关细胞表面分子和细胞因子的表达及Toll样受体信号的传递,其在细胞内信号系统的具体作用机制还需进一步证实。
- 焦国慧代红胜张灼寒曾彬刘昱张园杨荣存
- 关键词：免疫调节树突细胞
- 跨膜蛋白受体在LRRC19调节机体先天免疫应答反应中的作用
- 2010年
- 目的确定已初步鉴定的富亮氨酸重复结构(LRR)蛋白家族成员LRRC19在脾细胞中的表达及定位,并对其功能进行初步研究。方法通过生物信息学技术预测LRRC19蛋白结构;mRNA原位杂交和RT-PCR检测LRRC19mRNA在小鼠脾组织以及不同脾细胞中的表达;以不同细菌刺激LRRC19转染的293T细胞,通过分泌性碱性磷酸酶(SEAP)检测技术观察细胞分泌的NF-κB活性的改变。结果LRRC19是一种跨膜蛋白,属于LRR蛋白家族成员,胞外区存在串联排列的4个LRR基序,有单一的跨膜结构域,胞内区有2个酪蛋白激酶2(CK2)磷酸化位点;mRNA原位杂交和RT-PCR结果显示,LRRC19mRNA在脾脏主要表达于B1淋巴细胞;体外实验证实,多种细菌均可使转染LRRC19的细胞NF-κB活性增强。结论LRRC19可能是一种跨膜受体,可识别不同的病原体保守分子,可能参与介导细胞信号转导,激活NF-κB信号途径,启动靶基因转录,调节先天免疫应答过程。
- 柴立民车永哲杨荣存
- 关键词：B淋巴细胞NF-ΚB
- 不同Toll样受体介导的树突状细胞因子表达被引量：7
- 2009年
- 目的研究树突状细胞在不同Toll样受体(TLR)配体刺激下的早期反应。方法将鼠骨髓细胞诱导分化得到DC,利用TLR配体刺激,采用芯片分析方法研究其免疫相关基因在9h的表达;采用细胞因子分析系统,检测了12、48h细胞培养上清中细胞因子、趋化因子的产生。结果在给予LPS、PolyI:C、R848、CpG和anti-CD40刺激9h后,IL-1、IL-2rg、IL-13、CCL2、CCL4和CCL7的基因表达明显升高,CCL3、CCL5和CXCL9、CXCL10、CXCL11的表达增加最为显著(P<0.01);而IL-10(PolyI:C除外),CCL-6的表达降低(P<0.05)。培养12h后,IL-1、IL-6、IL-10、IL-12(p40)、IL-12(p70)、TNFa、G-CSF、GM-CSF、KC和MIP-1a(CCL3)产生在5种TLR配体刺激下均显著增加(P<0.01);培养48h后,IL-1、IL-10、IL-12(p40)、IL-12(p70)、TNFa、IFN-γ、G-CSF和MIP-1a(CCL3)产生也同样显著增加(P<0.01)。相对于其它TLR配体,CpG刺激时MIP-1a(CCL3)的产生增加更明显,与基因芯片结果相似。结论本研究揭示了不同TLR配体刺激对DC细胞因子和趋化因子表达量的调节,为TLR配体对DC分化和功能的作用机理提供了更多证据。
- 杨曙光焦国慧俞银燕杨荣存
- 关键词：树突细胞TOLL样受体细胞因子
- 调节性T细胞介导的肿瘤免疫耐受被引量：2
- 2008年
- 恶性肿瘤能够有效的逃避免疫系统的监视源于免疫反应系统功能的障碍，多种因素都可导致抗肿瘤免疫的失效。调节性T细胞（Tr）在肿瘤浸润的淋巴细胞及肿瘤引流的淋巴结中高频出现，意味着其能促进肿瘤生长。Tr在肿瘤免疫病理以及调节免疫治疗的效果中起重要作用。因此，肿瘤患者的Tr可能成为重要的治疗靶细胞，并将会为抗肿瘤免疫治疗提供新策略。
- 代红胜曾彬陈思杨荣存
- 关键词：调节性T细胞肿瘤免疫治疗
- APOE对鼠RAW264.7细胞系内TLR信号通路的调节被引量：2
- 2008年
- 目的分析载脂蛋白E基因(APOE)对RAW264.7细胞内的TLR信号通路的调节作用。方法克隆鼠APOE基因并建立表达APOE的RAW264.7稳定细胞系,使用各种Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)配体进行刺激,用报告基因化学发光检测转录因子活性,流式细胞仪检测细胞表面免疫分子。结果在LPS刺激下,APOE基因抑制NF-κB的活性(P<0.05),但对AP-1活性有促进作用(P<0.05);在PolyI:C刺激下,APOE促进NF-κB和AP-1两者的活性(P<0.05)。在PGN刺激时,APOE明显上调B7-H1的表达,但对CD86、PD-1、CD11c及Gr-1的表达有抑制作用。结论APOE基因可以调节TLR信号通路中NF-κB的活性,也可调节多个具有免疫调节功能的表面分子的表达,这样APOE可能具有免疫调节功能。
- 杨曙光彭茜俞银燕曾彬焦国慧张圆杨荣存
- 关键词：APOETLR免疫调节转录因子
