广东省自然科学基金([2003]11) 作品数:21 被引量:181 H指数:8 相关作者: 王一飞 张美英 康琰琰 朱良 朱艳梅 更多>> 相关机构: 暨南大学 中国药品生物制品检定所 中山大学 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 广州市科技攻关项目 广东省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 理学 更多>>
从裙带菜叶、茎中提取褐藻多糖硫酸酯的最佳工艺条件及性质比较研究 被引量:3 2005年 采用单因素分析法考察从裙带菜叶、茎中提取褐藻多糖硫酸酯(SP)的最优提取条件,并进行比较分析,结论为:裙带菜叶和茎的最佳提取条件分别为:90℃、6h、80倍加水量、pH=6和90℃、6h、60倍加水量、pH=5,并对叶提和茎提SP进行理化性质研究,结果表明,叶提SP和茎提SP的理化性质相似,其主要性质指标“硫酸根+多糖”含量,茎提SP高于叶提SP,分别为71.8%和61.3%。 门晓媛 王一飞 康琰琰 朱艳梅 朱良关键词:褐藻多糖硫酸酯 理化性质 抵抗素在3T3-L1前脂细胞分化前后表达量的变化 被引量:2 2008年 目的检测3T3-L1前脂细胞诱导分化为脂肪细胞前后抵抗素基因表达量的变化情况,为阐明抵抗素在细胞分化过程中所起作用并为研究其与胰岛素抵抗(IR)及2型糖尿病的相关性奠定基础。方法用地塞米松、甲基异丁基黄嘌呤与胰岛素联合诱导法抽提诱导分化前后细胞总RNA,半定量RT-PCR检测抵抗素基因表达量。结果抵抗素在3T3-L1细胞诱导前后表达量明显上升。结论抵抗素在3T3-L1细胞分化过程中表达量的提高,提示其很有可能在鼠脂肪细胞产生IR的过程中发挥积极作用。 赵嘉咏 王一飞 胡红梅 张美英关键词:3T3-L1细胞 诱导分化 抵抗素 逆转录聚合酶链反应 灭活SARS病毒的免疫原性的实验研究 被引量:1 2004年 研究灭活SARS病毒的免疫原性。SARS病毒F6 9株经甲醛灭活后 ,加入氢氧化铝佐剂 ,以 3种剂量接种BALB/c小鼠 ,定时采血 ,测定特异性抗体的滴度及其中和活性 ,同时用化学发光酶联免疫法测定抗血清与SARS病毒结构蛋白的反应特异性及其相对强度。结果发现 ,小鼠接种疫苗 4d后 ,血清中可检测到IgM抗体 ,直至 2 6d后逐渐下降 ;IgG抗体在初次免疫 8d后出现 ,4 7d时达最高峰 ,6 3d后进入稳定期 ;不同剂量组的抗体滴度具有明显剂效关系 ,低剂量组和中剂量组滴度峰值为 1∶192 0 0 ,高剂量组滴度峰值为 1∶384 0 0。中和实验结果表明 ,小鼠所产生的抗体具有中和病毒活性 ,在 6 3d时 ,低剂量组和中剂量组血清的中和效价为 1∶12 80 ,高剂量组血清的中和效价为 1∶5 12 0。抗体分类结果表明 ,小鼠抗血清中含有针对多种SARS病毒结构蛋白的特异性抗体 ,其中 ,针对N蛋白、S4蛋白和S2蛋白的抗体水平相对较高 ,而抗M抗体、抗 3CL抗体的水平相对较低。上述结果说明 ,SARS病毒F6 9株经甲醛灭活后 ,各主要结构蛋白仍保持较强免疫原性 ;免疫小鼠后 ,可以诱导产生高滴度的特异性混合抗体 。 熊盛 王一飞 张庶民 陆家海 孟民杰 张美英 刘新建 张传海 刘石生 李久香 万卓越 郑焕英 鄢心革关键词:SARS病毒 灭活 IGG 兔抗SARS冠状病毒IgG的纯化及鉴定 被引量:3 2005年 目的:制备高纯度的兔抗SARS冠状病毒的IgG。方法:采用辛酸-硫酸铵沉淀进行初纯,以及DEAE离子交换层析精纯IgG,利用SDS-PAGE对纯化后的IgG纯度进行测定,利用间接ELISA、病毒中和滴定对IgG进行效价测定。结果:纯化后的IgG相对纯度达到90%以上,ELISA检测效价为1∶4 800,病毒中和效价为1∶640。结论:利用上述纯化工艺能获得高纯度的兔抗SARS冠状病毒IgG,同时抗体活性损失较小。 钱垂文 王一飞 陆家海 熊盛 张美英 刘新建 李久香关键词:严重急性呼吸综合症 免疫球蛋白G 纯化 肿瘤转移抑制基因nm23-H1在人肺癌细胞的表达及其检测 被引量:1 2005年 目的:选择已分离鉴定的人巨细胞肺癌细胞高转移亚型PGBE1,转染肿瘤转移抑制基因nm23-H1,以获得稳定表达nm23-H1基因的人肺癌细胞株。方法:采用亚克隆方法获得pcDNA3.1(-)/nm23-H1真核表达载体并进行双酶切和测序鉴定;应用脂质体转染法将重组质粒转染PGBE1细胞;用G418筛选获得阳性细胞克隆,命名为pcDNA3.1(-)/nm23-H1-PGBE1细胞株;用RT-PCR法半定量检测nm23-H1基因的mRNA表达水平和免疫组化法检测nm23-H1基因的蛋白质表达。结果:真核表达载体pcDNA3.1(-)中正确插入了具有完整阅读框的nm23-H1基因;倒置显微镜下观察到经G418筛选出的稳定转染的PGBE1细胞,形成“小岛”;RT-PCR和免疫组化显示转染的细胞中nm23-H1mRNA和蛋白质水平表达均增高。结论:建立了稳定表达nm23-H1基因的PGBE1转染细胞株,可用于进一步研究肿瘤转移的分子机制。 胡红梅 王一飞 张美英 刘秋英 袁茵 钱垂文关键词:NM23-H1 真核表达载体 转染 几种天然活性物对黑色素细胞毒性及美白功效的比较 被引量:34 2005年 为比较几种天然产物的美白效果及细胞毒性大小,采用小鼠B16黑色素细胞为受试细胞,分别研究了熊果苷及两种不同的海藻多糖对黑色素细胞的细胞毒性、酪氨酸酶活性和黑色素合成的影响。结果表明:熊果苷具有明显的细胞毒性,与之相比,海藻多糖对黑色素细胞活力几乎无影响;3种药物对细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成均有浓度依赖性的抑制作用,且熊果苷的抑制作用高于海藻多糖。 康琰琰 张美英 邢少璟 熊盛 王一飞 朱艳梅关键词:化妆品添加剂 海藻多糖 熊果苷 黑色素细胞 细胞毒性 传染性非典型肺炎实验室诊断方法及临床研究进展 被引量:5 2005年 熊盛 王一飞 张庶民 张传海 张美英 李久香 阮杰关键词:传染性非典型肺炎 SARS 严重急性呼吸综合征 WHO 纳米硒化裙带菜多糖的制备及其体外抗CVB_3病毒作用研究 被引量:7 2005年 目的:研究纳米硒多糖的制备及其表征并观察其体外抗CVB3病毒作用.方法:以天然高分子裙带菜多糖为软膜板水相制备纳米硒多糖溶液,并采用瑞利共振散射光谱(RRS)、透射电镜(TEM)、激光散射等手段对产物进行表征.采用结晶紫法考察样品对Hela细胞的毒性作用,及其对CVB3病毒的抑制作用.结果:得到均匀、稳定的球形纳米硒,其平均粒径为 25.3 nm,放置 30 d 后,为 39.1 nm; 由细胞毒性试验得出,各硒糖样品的硒浓度最大不应超过 0.8 μg/ml;硒糖样品的硒浓度在 0.500~0.015 μg/ml 范围内,抗CVB3病毒作用均有一定程度的提高,最大可提高 30% 左右.结论: 将纳米硒多糖开发为一种抗CVB3病毒新药具有广阔的前景. 门晓媛 王一飞 郑文杰 朱艳梅 张美英 蒋鑫关键词:纳米硒 多糖 抗病毒 裙带菜茎中硫酸多糖的提取工艺 被引量:4 2006年 为了从裙带菜茎中优选提取硫酸多糖的最佳工艺,以多糖得率为指标,通过单因素分析获得正交表中各因素的最佳水平数,采用正交实验对裙带菜茎中硫酸多糖的提取工艺进行优选.结果表明,浸提温度是提取褐藻硫酸多糖的关键影响因素,加水量和提取时间影响不大.从而求得最佳水浸提工艺条件:温度100℃、加水量40或50倍、浸提时间4 h. 康琰琰 王一飞 门晓媛 朱良关键词:裙带菜 硫酸多糖 正交试验 方差分析 蜈蚣藻多糖的提取分离及抗病毒活性的研究 被引量:30 2006年 目的:提取分离蜈蚣藻多糖,在体外检测不同浓度蜈蚣藻对单纯疱疹病毒Ⅱ型的抑制作用。方法:用五种不同的提取分离方法从蜈蚣藻中提取硫酸多糖,再从药物对细胞的保护、对HSV-2增殖的影响及对HSV-2感染细胞的综合作用三个方面研究不同浓度的蜈蚣藻抑制HSV-2对Vero细胞的感染作用,细胞病变效应法(CPE)观察和MTT法测定蜈蚣藻粗多糖抗HSV-2活性。结果:蜈蚣藻粗多糖能明显抑制HSV-2对Vero细胞的致病变作用,其中水提醇沉法所得的蜈蚣藻多糖的IC50为5.80μg/m。l结论:蜈蚣藻有较显著的抗HSV-2活性,且初步推测其抗HSV-2活性是作用在HSV-2和受体结合、吸附、侵入Vero细胞阶段,是一种具有潜在开发前景的药物。 朱艳梅 王一飞 张美英 朱良 康琰琰 门晓媛 岑颖洲关键词:MTF