国家自然科学基金(30300170)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 相关作者:许雪青段文元白云陈雪丹熊加祥更多>>
- 相关机构:第三军医大学西南医院第三军医大学更多>>
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- 鼠ICOSIg融合蛋白腺病毒的制备及其对胰岛细胞系NIT-1的感染被引量:1
- 2006年
- 目的制备mICOSIg腺病毒,研究其对胰岛细胞系NIT-1的感染情况,及可否使后者正确表达分泌mICOSIg。方法从pMIG-ICOSIg质粒上切下ICOSIg融合蛋白的表达框,插入pAdtrack-CMV中构建腺病毒穿梭质粒pAdmICOSIg,在Adeasy-1大肠杆菌中进行同源重组,随后转染293细胞进行病毒颗粒包装。收集病毒后感染NIT-1细胞,用免疫印迹证实mICOSIg在NIT-1细胞中的正确分泌表达。结果ICOSIg编码框被正确构建到pAdtrack-CMV中,并经测序证实无误。目的病毒成功包装出来,并能有效感染胰岛细胞系NIT-1,免疫印迹证实培养上清中存在正确大小的mICOSIg融合蛋白。结论成功制备了mICOSIg腺病毒,该病毒能有效将mICOSIg转入胰岛细胞系NIT-1,并能准确分泌mICOSIg蛋白。为研究1型糖尿病中ICOS信号通路在T细胞破坏胰岛细胞中的作用提供了有效的研究手段。
- 许雪青王丰陈雪丹熊加祥段文元白云
- 关键词:ICOS腺病毒胰岛细胞