国家自然科学基金(30300161)
- 作品数：7 被引量：27H指数：3
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- MRL/lpr小鼠血清与尿液中明胶酶活性的增龄变化及意义被引量：3
- 2005年
- 目的检测不同周龄MRL/lpr小鼠血清与尿液中明胶酶A(MMP-2)与B(MMP-9)的活性,观察其随增龄的变化及在肾脏病变中的意义。方法留取8、16与24周龄MRL/lpr小鼠的血清、尿液与肾脏组织标本,SDS-PAGE明胶酶谱法检测明胶酶活性,检测不同周龄小鼠尿蛋白含量,并对肾组织进行病理学分级;对尿液中明胶酶的活性与尿蛋白进行相关性分析。结果8,16与24周龄MRL/lpr小鼠血清中仅检测到非活化态MMP-2与MMP-9的活性及微弱的活化态MMP-9,其表达随增龄无明显变化;8周龄小鼠尿液中可以检测到较弱的MMP-2与MMP-9活性,以非活化态为主;16与24周龄小鼠尿液中活化态的MMP-2、MMP-9的表达明显增加,肾组织明胶酶的活性亦随增龄明显增加,变化趋势与尿液相似。尿液中明胶酶的活性与尿蛋白的含量及肾脏组织学改变呈正相关。结论MRL/lpr小鼠尿液中MMP-2、MMP-9活性随增龄明显增加,其活性变化与尿蛋白的发生密切相关,可以反映肾组织增龄性病变程度。
- 蔡广研陈香美吕扬师锁柱王兆霞
- 关键词：MRL/LPR小鼠明胶酶谱法
- 人TIMP-1转基因小鼠肾组织内外源基因功能表型的鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的对人基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)转基因小鼠肾组织内外源人TIMP-1基因的功能表型进行鉴定,为深入研究TIMP-1在肾脏疾病进展过程中的病理生理作用奠定基础。方法3月龄野生型小鼠(n=8,正常组)和hTIMP-1转基因小鼠(n=8)肾组织石蜡切片行PAS染色,观察肾脏组织结构变化。采用Northern杂交、Western印迹方法检测两组小鼠肾组织内h/mTIMP-1、mTIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、MMP-9、MMP-2和COLⅣα5mRNA及蛋白质表达;明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性。反向酶谱法检测TIMP-1的活性。结果hTIMP-1转基因小鼠与正常组小鼠相比,肾组织结构未见显著变化。与正常组小鼠相比,hTIMP-1转基因小鼠肾组织内h/mTIMP-1mRNA、蛋白表达及活性显著升高(P<0·05);TIMP-2、MMP-2mRNA和蛋白表达降低(P<0·05);MMP-9的活性增高(P<0·05),而MMP-2的活性则降低(P<0·05)。两组小鼠mTIMP-1、TIMP-3、MMP-9和COLⅣα5的mRNA表达没有显著性差异(P>0·05)。结论外源基因在人TIMP-1转基因小鼠肾组织内稳定表达并导致MMPs/TIMPs系统发生代偿性变化。
- 张雪光陈香美吕扬洪权田月师锁柱尹忠蔡广研
- 关键词：金属蛋白酶组织抑制剂转基因
- IgA肾病肾小管周围毛细血管的变化及临床意义被引量：15
- 2005年
- 目的:探讨IgA肾病患者肾小管周围毛细血管与血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体VEGF-R2(Flk-1)的表达变化及临床意义。方法:对24例不同病理改变的IgA肾病肾组织进行序列切片。采用免疫组织化学SP法检测肾小管间质中VⅢ因子、VEGF和Flk-1的表达。对各指标之间与临床病理改变之间进行相关分析。结果:IgA肾病患者肾组织中,肾小管间质中微血管密度在中度病变的病人表达最多,在重度者表达最少(P<0.05)。VEGF主要表达于肾小管上皮细胞,Flk-1主要表达于肾间质中肾小管周围毛细血管内皮细胞。两者与肾小管周围毛细血管密度呈正相关(P<0.05)。在中、重度组肾小管间质肾小管周围毛细血管的微血管密度与患者尿NAG酶的含量呈负相关(r=-0.57,P<0.05),与间质纤维化呈负相关性(r=-0.82,P<0.01)。结论:IgA肾病肾小管周围毛细血管密度变化与肾小管间质的病变密切相关。血管内皮细胞生长因子可能是导致肾小管周围毛细血管密度变化的主要原因。
- 蔡广研陈香美汤力师锁柱张雪光刘秀娟
- 关键词：肾小管周围毛细血管血管内皮细胞生长因子IGA肾病毛细血管密度免疫组织化学SP法毛细血管内皮细胞
- 人TIMP-1转基因小鼠随增龄肾组织炎症反应变化的意义被引量：1
- 2006年
- 目的利用人基质金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)转基因小鼠,研究了IMP-1在肾脏器官衰老过程中的作用。方法对3、12、24月龄人TIMP-1转基因小鼠和野生型小鼠肾组织石蜡切片行PAS染色；免疫荧光法检测肾组织内F4/80阳性细胞数；Western印迹方法检测肾组织内TIMP-1、TIMP-2、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9、MMP-2、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、Ⅲ型和Ⅳ型胶原蛋白质表达；明胶酶谱法检测明胶酶活性。反向酶谱法检测TIMP-1的活性。结果两种基因型小鼠随增龄肾组织内出现局灶性纤维化改变。24月龄,与野生型小鼠比较,转基因小鼠肾组织内TIMP-1表达及活性上调[(1．10±0．18)对(0．62±0．09)；(50．75±7．25)对(20．64±3．50),P＜0．05]；明胶酶的表达及活性降低[(MMP-2：(2．08±0．20)对(3．39±0．43)；MMP-9：(4．02±0．82)对(6．72±1．40),P＜0．05]；Ⅲ型和Ⅳ型胶原[(0．72±0．11)对(0．57±0．09)；(0．84±0．13)对(0．6±0．11),P＜0．05]、ICAM-1和TGF-β1的表达上调[(0．72±0．12)对(0．53±0．07)；(0．69±0．12)对(0．45±0．09),P＜0．05],F4/ 80阳性细胞增多[(18．8±4．4)对(12．7±3．6),P＜0．05]。结论TIMP-1通过上调ICAM-1、增强炎症,促进衰老相关肾脏纤维化。
- 张雪光陈香美洪权尚希瑶师锁柱尹忠蔡广研
- 关键词：炎症
- ILK-siRNA抑制衰老大鼠系膜细胞纤维连接蛋白积聚的研究被引量：3
- 2006年
- 目的观察整合素连接激酶(integrin linked k inase,ILK)小干扰RNA(small interference,siRNA)对衰老大鼠系膜细胞细胞外基质纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的影响,探讨ILK在衰老肾脏肾小球硬化中的作用。方法分离培养3月龄和24月龄雄性W istar大鼠原代肾小球系膜细胞(m esangial cells,MCs),脂质体转染抑制ILK表达的siRNA或无关siRNA(con siRNA)。利用RT-PCR、W estern b lot和免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术检测ILK和FN的表达情况。结果ILK-siRNA转染可抑制3月龄和24月龄大鼠系膜细胞ILK和FN的表达水平(P<0.05);对24月龄大鼠系膜细胞的抑制程度更显著(P<0.05),几乎使ILK和FN下降到正常青年大鼠系膜细胞的水平。结论通过RNA i技术抑制ILK的表达,可减轻衰老大鼠系膜细胞FN的积聚,为肾脏器官衰老的防治提供新的干预靶点。
- 张雪光洪权陈香美冯哲吕杨蔡广研
- 关键词：细胞外基质衰老
- 人基质金属蛋白酶1组织抑制剂转基因小鼠肾小管间质炎症的改变被引量：2
- 2006年
- 目的观察基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)过表达对肾小管间质炎症反应的影响。方法采用人TIMP-1转基因小鼠和野生型小鼠(n=8)构建单侧输尿管梗阻(UUO)模型。以3 d和14 d为时间点,Masson染色观察肾组织形态学变化,间接免疫荧光法观察肾组织内F4／80阳性细胞的表达;Western印迹检测TIMP-1、TIMP-2、MMP-2、MMP-9和ICAM-1的蛋白表达,明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性,反向酶谱法检测TIMP-1的活性。结果UUO术后肾小管间质病理损伤加重[肾间质纤维化面积(46．24±6．58)％比野生型(36．33±5．12)％．P< 0．05],F4／80阳性细胞数目增加[(68．9±15．6)个／视野比野生型(52．4±13．3)个／视野,P< 0．05],ICAM-1蛋白表达显著上调,术后14 d上述改变在转基因组中更为显著(P<0．05)。UUO术后TIMP-1蛋白表达及活性上调,在术后14 d达高峰,在转基因组中增加更为显著(P< 0．05)。MMP-2和MMP-9的蛋白表达及活性在术后逐渐下降,UUO术后14 d转基因组降低更为显著(P<0．05)。结论TIMP-1过表达可通过增强炎症加重肾小管间质损伤。
- 邵凤民尚希瑶张雪光蔡广研师锁柱尹忠吕扬洪权陈香美
- 关键词：转基因金属蛋白酶1组织抑制剂细胞黏附分子输尿管梗阻
- 肾小管上皮细胞标志物随增龄变化及其意义被引量：3
- 2005年
- 蔡广研陈香美师锁柱高波张雪光王兆霞
- 关键词：肾小管上皮细胞标志物增龄变化细胞表型转化细胞表面标志物肾小管间质
