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中间锦鸡儿CiMYB177的克隆及表达分析被引量：3: 2016年; MYB转录因子超家族很多基因参与调控生物钟。本文利用RACE技术克隆到一个中间锦鸡儿MYB家族基因CiMYB177,其c DNA全长2 028 bp,可以编码433个氨基酸。序列分析发现CiMYB177属于CCA1(CIRCADIAN AND CLOCK ASSOCIATED1)亚家族,与大豆的GmMYB177一致性最高(70.3%)。用染色体步移技术克隆到该基因起始密码子上游1 127 bp的启动子序列。用实时荧光定量PCR技术对CiMYB177的转录水平进行分析发现其表达呈节律性的昼夜变化,并且受干旱、NaCl和冷的诱导。亚细胞定位观察发现CiMYB177定位到细胞核。; 韩晓敏邢丹丹杨杞李国婧王瑞刚; 关键词：中间锦鸡儿生物钟基因克隆 MYB转录因子

中间锦鸡儿CiMYB68基因克隆及表达分析被引量：1: 2014年; 该研究以中间锦鸡儿(Caragana intermedia)为材料,利用RACE技术克隆了CiMYB68基因的全长序列。对CiMYB68的基因组DNA和cDNA全长分析显示,CiMYB68基因无内含子,开放阅读框为852bp,编码284个氨基酸。预测CiMYB68基因编码的蛋白质等电点为8.95,分子量约为31 459.4Da。序列比对和系统进化分析表明,该蛋白和大豆的GmMYB68一致性最高,达到67%。构建了CiMYB68基因与GFP融合表达质粒,激光共聚焦显微镜观察发现,融合蛋白定位于细胞核。用实时荧光定量PCR技术对在不同胁迫条件下CiMYB68基因的表达检测结果表明,在干旱和低温处理下CiMYB68均受到不同程度的诱导,暗示CiMYB68基因可能与中间锦鸡儿响应逆境胁迫有关。; 冯宗琪韩晓敏杨杞邢丹丹齐力旺王瑞刚李国婧; 关键词：中间锦鸡儿 MYB 基因克隆

拟南芥钙调蛋白CBP60g在大肠杆菌和昆虫细胞内的表达与纯化: 植物通过调节胞内钙离子浓度对外界不良环境因素进行防御。钙调素(CaM)是一类最主要的钙离子感受器,钙离子-钙调素(Ca2+-CaM)复合体与钙调素结合蛋白(CBPs)结合构象发生变化后参与植物对生物和非生物胁迫的响应。C...; 于爽; 关键词：表达纯化大肠杆菌表达系统; 文献传递

中间锦鸡儿CiMYB60基因克隆及表达分析: 2018年; 本研究以中间锦鸡儿作为实验材料,利用PCR技术分别对CiMYB60基因的cDNA与gDNA进行了克隆。测序结果表明:CiMYB60基因的开放阅读框为1 035 bp,编码345个氨基酸,其基因组DNA序列长度为1 485 bp,含有2个内含子和3个外显子。生物信息学分析显示:CiMYB60所编码蛋白的N端包含2个MYB结构域,因此认为其属于典型的R2R3-MYB类蛋白。克隆得到CiMYB60基因的ATG上游序列1 848 bp,分析显示该启动子中包含一些与光反应、组织特异性表达、激素和非生物胁迫相关的响应元件。对CiMYB60基因的表达模式进行分析发现在脱水、NaCl和UV-B处理下其表达量随胁迫处理时间的延长而降低。上述研究结果表明CiMYB60基因可能参与中间锦鸡儿对非生物胁迫等逆境胁迫的响应过程,为进一步研究该基因在非生物胁迫中的功能和表达调控提供了一定的参考。; 刘建政郝志霞王光霞苏雨萌杨杞王瑞刚; 关键词：中间锦鸡儿启动子克隆

中间锦鸡儿CiMYB31基因克隆及表达分析被引量：2: 2017年; MYB类转录因子是植物中最大的转录因子家族之一,在植物的初生与次生代谢、细胞命运、生长发育及在生物与非生物胁迫应答中具有重要的作用。本研究以中间锦鸡儿为实验材料利用PCR技术分别以cDNA与gDNA为模板对CiMYB31基因进行了克隆。研究测序表明:CiMYB31基因的开放阅读框(ORF)为969 bp,编码323个氨基酸,其基因组DNA序列长度为1 724 bp,包含3个外显子与2个内含子。生物信息学分析显示:CiMYB31所编码蛋白的N端包含2个MYB结构域(14~64 aa和67~115 aa),属于R2R3-MYB类蛋白。预测该蛋白分子量为36.32 k D,等电点为5.6,蛋白整体上是亲水性的。利用染色体步移技术克隆CiMYB31基因启动子序列,得到902 bp ATG上游序列。分析显示启动子序列中包含一些非生物胁迫相关的顺式作用元件,如干旱响应元件(MBS)与低温响应元件(LTR)。利用实时荧光定量PCR技术对CiMYB31基因的表达进行分析,发现该基因受到低温的诱导。上述研究表明CiMYB31基因可能在中间锦鸡儿对非生物胁迫的响应过程中起作用。; 郝志霞柴文娟刘建政杨杞王瑞刚郭琳丛靖宇; 关键词：中间锦鸡儿启动子克隆

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国家自然科学基金(31360056)