南京医科大学科技发展基金(2011NJMU275)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
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- 相关机构：南京医科大学江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：南京医科大学科技发展基金江苏省高校优势学科建设工程资助项目国家自然科学基金更多>>
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- 围产期双酚A暴露对子代海马组织APP、Tau表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:观察F0代孕鼠围产期不同时期双酚A(bisphenol A,BPA)暴露对子代小鼠海马中淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein,APP)、微管相关蛋白(microtubule-associated protein,Tau)、磷酸化的Tau蛋白(p-Tau)的影响,探讨雌雄小鼠胎儿发育阶段BPA暴露的敏感期。方法:利用C57BL/6J胎鼠原代培养的海马神经元共孵BPA;F0代小鼠围产期皮下注射建立BPA暴露小鼠模型,根据不同暴露期分为4组,即对照组、胎儿期(P6-PND0)、哺乳期(PND0-PND21)、胎儿期和哺乳期联合暴露(P6-PND21),取其成年子代海马组织(8月龄)通过Western blot方法检测APP、Tau及p-Tau的表达量。结果:海马神经元细胞与不同浓度BPA共孵后,APP、Tau及p-Tau的表达均上调,呈剂量依赖性。BPA连续暴露后的子代小鼠中,雌性小鼠PND0-PND21组、P6-PND21组海马组织中APP、Tau及p-Tau表达增加,而雄性小鼠仅P6-PND21组3种蛋白的表达上调。结论:围产期BPA连续暴露可引起子代小鼠海马APP、Tau及p-Tau表达改变,从而可能引起神经损伤,而雌性小鼠相较于雄性小鼠可能对BPA引起的神经损伤更敏感。
- 周景朱庆刘景丽钱文溢高蓉王军肖杭
- 关键词：双酚A淀粉样蛋白前体微管相关蛋白
- 钾电流在甲基苯丙胺引起神经元损伤中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨甲基苯丙胺（Meth）对外向钾电流的影响及外向型钾通道在Meth引起的海马神经元损伤过程中的作用。方法以分离出的怀孕18dSprague—Dawley大鼠胎鼠的海马神经元作为实验对象，分为对照组和Meth处理组，采用全细胞膜片钳的实验方法，分别记录Meth处理后外向4-AP和TEA敏感型钾电流大小的变化。通过MTT和TUNEL的方法，观察Meth作用后引起的电流变化对海马神经元活力和凋亡的影响。统计分析利用单因素方差分析结合LSD-t检验，以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果与对照组（n=10）比较[（87．4±12．5）pA／pF]，Meth处理组（n=7）细胞外向4-AP敏感型钾电流密度明显增大[（120．1±19．6）pA／pF，P〈0．01]，且呈剂量依赖性。MTT结果表明，Meth明显降低细胞的活力（48．72±4．38）％，与对照组（100．07±3．36）％比较，差异具有统计学意义，而钾通道抑制剂4-AP（61．39±3．15）％以及胞外高浓度K^＋溶液（78．25±9．42）％，能有效抑制Meth引起的细胞损伤。TUNEL实验进一步表明，Meth能引起海马神经元的凋亡，而4-AP和胞外高浓度K^＋溶液对Meth引起的细胞凋亡具有保护作用。结论Meth引起外向4-AP敏感型钾电流增大，进而可能导致海马神经元的损伤。
- 蒋雷王军高蓉肖杭张劲松
- 关键词：甲基苯丙胺
- TEA敏感型钾电流在gp120引起的海马神经元损伤中的作用
- 2015年
- 目的:探讨gp120对TEA敏感型钾电流的作用以及该电流在gp120引起神经元损伤中的作用。方法 :分离怀孕18d SD大鼠胎鼠的海马神经元作为实验对象,分为对照组和gp120处理组,利用全细胞膜片钳的方法记录外向延迟钾电流的变化,通过MTT和TUNEL的方法分别观察gp120处理后神经元的活力和凋亡情况。Western blot观察Kv2.1钾通道的蛋白表达变化以及在TEA敏感型钾电流中的贡献度。结果:gp120能引起外向钾电流明显增大,具有浓度依赖性,其中TEA敏感型成分参与了外向钾电流的增大。此外,MTT和TUNEL实验发现,gp120能引起神经元活力的下降和凋亡,而钾通道抑制剂TEA能缓解由gp120引起的细胞损伤。进一步实验表明,gp120可上调TEA敏感型成分中Kv2.1钾通道的表达,且其特异性抑制剂Gx TX-1E能显著抑制神经元中TEA敏感型钾电流成分。结论:TEA敏感型钾电流参与了gp120引起的神经元损伤过程,其重要组成成分Kv2.1通道蛋白上调,提示该通道蛋白可能参与了gp120引起的细胞损伤。
- 余鹏飞蒋雷钱文溢周景王易欣肖杭王军
- 关键词：GP120海马神经元
- 毒理学教学方法转变的探索与思考被引量：6
- 2015年
- 毒理学基础作为一门预防医学领域的主干课程,对理解化学物毒性及机制起着重要作用。本文结合现代预防医学教育发展的需要及培养与国际接轨的高素质预防医学人才这一目标,针对毒理学基础的教学特点,在教学方法的转变过程中进行了尝试和探索,旨在毒理学课程教学中激发学生学习兴趣,使其明确学习目的,促进学生综合素质和应用能力的培养与提高。
- 王军顾爱华王心如蒋雷
- 关键词：毒理学案例教学问题导向教学实验教学
- 甲基苯丙胺对大鼠小胶质细胞损伤作用
- 2013年
- 目的观察甲基苯丙胺(Meth)通过电压门控钾离子通道亚型1.3、1.5(Kv1.3、Kv1.5)对大鼠胎鼠小胶质细胞的损伤作用。方法 SD胎鼠原代培养小胶质细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;采用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应法观察Kv1.3、Kv1.5表达变化。结果 Meth呈浓度依赖性降低小胶质细胞活力,增加小胶质细胞凋亡;Kv1.3的抑制剂MgTx对Meth所致小胶质细胞损伤有部分保护作用;与对照组(1.047±0.165)比较,300μmol/L Meth组小胶质细胞Kv1.3 mRNA表达(7.453±0.675)增高(P<0.05),MgTx组Kv1.3 mRNA表达(1.684±0.875)低于Meth 300μmol/L组(P<0.05);Meth对Kv1.5 mRNA表达无影响。结论 Meth可引起小胶质细胞损伤,其机制可能与Kv1.3表达变化有关。
- 赵晶晶钱文溢刘景丽周景高蓉王军肖杭
- 关键词：小胶质细胞原代培养钾通道
- PFOS对BV-2细胞的炎性损伤及机制研究被引量：4
- 2017年
- 目的:探讨环境内分泌干扰物全氟辛磺酸(perfluorooctane suifonate,PFOS)对小鼠小胶质瘤细胞BV-2的损伤作用及其炎性反应。方法:利用体外培养的小胶质细胞,给予不同浓度和作用时间的PFOS进行染毒,通过MTT法检测BV-2细胞活力;实时定量PCR的方法观察诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthesis,i NOS)、白介素(interleukin,IL)-6和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-αm RNA的表达。ELISA法检测炎性因子IL-6,免疫蛋白印迹法检测核转录因子kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)等信号蛋白表达情况。结果:不同浓度PFOS对BV-2细胞染毒12、24 h后,细胞活力下降,引起明显的细胞损伤。ELISA结果显示,PFOS作用BV-2 24 h后,细胞炎性因子IL-6分泌增加。此外,PFOS还可引起i NOS、IL-6基因表达上调,而TNF-α表达有下降趋势。PFOS与细胞孵育后,炎性通路NF-κB明显激活,表现为磷酸化程度升高。且随染毒浓度的增加,p-NF-κB的表达有上升趋势;此外,随染毒时间的增加,p-NF-κB的表达亦有上升趋势。结论:PFOS可引起BV-2细胞活力降低,激活NF-κB通路,促进炎性因子的释放,该途径可为阐明PFOS引起的神经系统损伤的分子机制提供理论依据。
- 刘艳青宋词王军
- 关键词：PFOS环境内分泌干扰物BV-2炎性因子信号通路
