浙江省自然科学基金(Y3090494)
- 作品数:3 被引量:13H指数:2
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- 相关机构:浙江农林大学学研究院浙江省丽水市农业局更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目更多>>
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- ‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂特性基因RAD51和MS1的表达差异分析被引量:1
- 2016年
- ‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’是野生型瓯柑Citrus suavissima的芽变,其花粉完全败育,败育起始于小孢子母细胞减数分裂形成四分体时期。研究‘无籽’瓯柑小孢子母细胞减数分裂异常的分子机制,有利于深入认识果树芽变的发生机制。随机选择"无籽"瓯柑和瓯柑各3株,根据花蕾直径采集花粉母细胞时期(Ⅰ),四分体时期(Ⅱ),单核花粉粒时期(Ⅲ),双核花粉粒时期(Ⅳ)及花粉粒成熟期(Ⅴ)共5个时期的花蕾并分离花药,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)分析减数分裂特性基因RAD51和MS1的相对表达量,3次重复。通过SPSS 16.0的最小显著差法(LSD)在0.01水平上进行各样品间的相对表达量差异分析。结果表明:RAD51和MS1基因的表达高峰均集中在第Ⅰ时期和第Ⅱ时期,且此时花药中的相对表达量均极显著(P<0.01)高于花蕾。第Ⅰ时期花药中,‘无籽’瓯柑RAD51的相对表达量为瓯柑的3.7倍,MS1可达300倍;但同时期花蕾中,RAD51的相对表达量仅1.1倍,MS1为140.0倍。‘无籽’瓯柑RAD51基因在第Ⅰ时期和第Ⅱ时期的相对表达量极显著(P<0.01)高于瓯柑,说明‘无籽’瓯柑小孢子母细胞和四分体时期的细胞内均存在DNA受损现象;‘无籽’瓯柑MS1基因在第Ⅰ时期的相对表达量极显著(P<0.01)高于瓯柑,但第Ⅱ时期极显著(P<0.01)低于瓯柑,推测‘无籽’瓯柑败育花粉的形成与MS1基因表达紊乱引起油脂分泌、转运异常密切相关。
- 朱咪咪张迟常爱玲党婉誉周彩红俞狄虎吴莹莹张敏
- 关键词:园艺学减数分裂MS1
- ‘无籽’瓯柑CsLTP和CsLOX基因的克隆与表达分析被引量:2
- 2014年
- 采用同源序列法,结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术,克隆获得‘无籽’瓯柑Citrus suavissima‘Seedless’脂转移酶基因CsLTP和脂氧合酶基因CsLOX的全长cDNA序列;CsLTP cDNA全长667 bp,1个开放阅读框,编码215个氨基酸,与脐橙C.sinensis,粗柠檬C.jambhiri的脂转移蛋白的相似性分别为95%和60%;CsLOX cDNA全长2 915 bp,1个开放阅读框,编码895个氨基酸,与粗柠檬、美洲黑杨Populus deltoids的相似性分别为99%和51%。荧光定量聚合酶链式反应(PCR)表明:CsLTP和CsLOX的表达量均在‘无籽’瓯柑花粉粒形成期开始显著下降,并显著低于普通瓯柑Citrus suavissima。‘无籽’瓯柑花粉发育过程中油脂的转运及氧化的异常,可能成为‘无籽’瓯柑花粉败育的原因之一。
- 张敏刘志辉宋雪恩朱咪咪党婉誉颜福花张迟
- 关键词:园艺学花粉败育荧光定量PCR
- ‘瓯柑’及其无子突变体花粉发育的细胞学观察被引量:13
- 2014年
- 【目的】观察‘瓯柑’及其无子突变体的花粉形态和花药发育过程,探讨‘无子瓯柑’花粉败育的时期和方式。【方法】以雄性不育的‘无子瓯柑’和可育的有子瓯柑为试材,采用半薄树脂切片、扫描电镜、透射电镜等方法对其花药发育过程和花粉形态进行观察。【结果】有子瓯柑花粉粒饱满,‘无子瓯柑’花粉粒多干瘪、畸形。‘无子瓯柑’小孢子母细胞形成期正常,在四分体时期开始出现异常,在单核期出现明显异常,虽然能形成花粉壁,但小孢子细胞质收缩、解体,最终只剩余空瘪的花粉壳。在成熟花粉粒时期,‘无子瓯柑’花药的绒毡层附近有大量的脂类物质残存,营养物质未能被花粉粒充分利用,有子瓯柑绒毡层附近无脂类物质残存,营养物质被花粉粒利用充分。【结论】‘无子瓯柑’花粉母细胞正常,花粉败育开始于小孢子母细胞减数分裂期至四分体时期,小孢子母细胞减数分裂过程的不正常是导致其花粉败育的主要原因。
- 张迟张敏朱铨刘志辉颜福花吴连海徐象华周晓音陈翔
- 关键词:花粉败育小孢子母细胞