国家科技支撑计划(2007BAD55B03)
- 作品数：19 被引量：66H指数：5
- 相关作者：张嘉保赵志辉赵玉民高妍张莹更多>>
- 相关机构：吉林大学吉林省农业科学院山东省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 热应激对西门塔尔牛精液品质及顶体反应相关酶活力的影响被引量：7
- 2011年
- 为探讨夏季高温环境对西门塔尔种公牛精液品质和顶体反应相关酶活力的影响,选取年龄和健康状况相近,采精正常的西门塔尔成年种公牛30头,对其精液品质和顶体反应相关酶活力等指标按照春(3月-5月),夏(6月-8月),秋(9月-11月),冬(12月-2月)4个季节进行分组实验,并进行统计分析。结果表明:(1)夏季热应激可造成西门塔尔种公牛精液品质显著下降。采精量略有增加但随季节变化不明显(p>0.05);精子活力在夏季显著低于秋季(p<0.05),极显著低于春季和冬季(p<0.01);精液的密度夏季与秋、冬两季差异显著,极显著低于春季(p<0.01);夏季精子的顶体完整率和畸形率与春季、秋季和冬季存在显著差异,说明季节温度变化对西门塔尔种公牛精子顶体完整性和精子畸形有明显的影响。(2)夏季热应激可以使西门塔尔种公牛的几种重要顶体反应相关酶的活力降低。
- 张莹郝林琳李明谦张嘉宝刘松财
- 关键词：西门塔尔种公牛热应激精液品质酶活力
- 牛黄体中促黄体素受体剪接异构体的表达研究
- 利用RT-PCR结合测序技术,对牛黄体中促黄体素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)在转录后通过选择性剪接而形成的剪接异构体进行鉴定,并比较不同剪接异构体编码蛋白质氨基酸序列的差异,利...
- 熊秋宏邓琼于汪洋高妍马腾壑姜昊戴立胜许艳丽崔香顺赵玉民赵志辉张嘉保
- 关键词：剪接
- 文献传递
- 奶牛孕酮间接竞争ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2008年
- [目的]为孕酮检测试剂盒的研制奠定基础。[方法]采用二环己基碳化二亚胺法制备检测抗原，建立了检测奶牛孕酮含量的间接竞争EHSA方法。[结果]检测奶牛孕酮的间接竞争EHSA的最佳反应条件确定为：最佳包被浓度为100ng／ml，碳酸盐缓冲液的包被效果较好，以4℃过夜＋37℃2h佳，最佳封闭液为2％山羊血清，酶标抗体的工作浓度为0．13μg/ml。建立的标准曲线方程为y=-1．8444x-0．1401（R^2=0．9817），检测范围为0～20ng／ml，最低检测限为0．58ng／ml。该标准曲线的批内变异系数和批间变异系数分别为2．22％和2．37％。[结论]该研究建立了定量检测奶牛孕酮的间接竞争EHSA方法。
- 邵谱杨正涛张乃生周虚
- 关键词：间接竞争ELISA
- 奶牛孕酮单克隆抗体的制备及其酶免疫测定方法的初步建立被引量：1
- 2008年
- [目的]制备奶牛孕酮McAb，建立孕酮酶免疫检测方法，为研制检测试剂盒奠定基础。[方法]用琥珀酰亚胺法将孕酮与钥孔血蓝蛋白（KLH）和卵清白蛋白（OVA）偶联制备完全抗原，免疫BalB／c小鼠，建立杂交瘤细胞株制备McAb，对McAb特异性、亚类、交叉反应性及相对亲和力等进行鉴定，筛选最佳McAb，建立酶免疫检测方法。[结果]获得3株杂交瘤1F6、2G6和2A11，腹水效价依次为1：1×10^6、1：1×10^5和1：8×10^4，其中1F6为IgG2b亚型，2G6和2A11为IgM亚型，3株McAb都能和游离孕酮发生特异性反应，相对亲和力1F6〉2G6〉2A11，其中1F6对雌二醇的交叉反应率小于0．01％。选用1F6与酶标孕酮建立ELISA检测方法。制作标准曲线，检测范围为0．5—100．0ng/ml。[结论]该研究制备的单克隆抗体，可用于建立孕酮酶免疫检测方法，为奶牛孕酮水平的定量监测提供了较实用的方法。
- 杨正涛张乃生冯晓琼曾文渊周虚张嘉保邵谱
- 关键词：孕酮免疫测定
- 牛孕激素受体SNP分析及其与精液品质的关系被引量：3
- 2010年
- 孕激素受体(PR)对于正常雌性动物生殖功能的实现具有重要调节作用,该基因在雄性动物中生物学作用尚不十分清楚。本研究通过PCR-SSCP方法对种公牛群体的PR基因所有外显子及5′UTR多态性进行检测。结果表明:PR基因外显子4、外显子8及5′UTR均检测到了多态性位点,其他外显子没有发现遗传多态性;测序表明外显子4发生了A20G突变,没有导致氨基酸的改变,外显子8发生G86T和A207T突变,其中G86T突变导致所编码的G(甘氨酸)变成V(缬氨酸),A207T突变导致所编码的Q(谷氨酰胺)变成H(组氨酸),5′UTR处存在G-1809A和C-1808G碱基突变。最后用最小二乘分析方法对其基因型和生产性状进行了相关性分析,第4及第8外显子的遗传多态性与部分精液品质性状呈显著相关。
- 宋永利刘伟英张丽颖秦丽红张金玉张嘉保赵志辉
- 关键词：种公牛孕激素受体精液品质
- 牛孤雌激活囊胚冷冻复苏后胚胎存活率和胚胎质量
- 2010年
- 使用2种不同的冷冻载体冷冻保存牛孤雌囊胚,并且使用差异染色的方法计数囊胚细胞数。结果显示,开放式毛细玻璃管(GMP)和冻精管(Straws)冷冻牛孤雌囊胚复苏后囊胚孵出率存在显著性差异(GMP法为70.29%,冻精管法为27.31%,P<0.05)。差异染色结果显示,牛囊胚冷冻复苏后囊胚细胞数目为91.37,而对照组(正常孤雌囊胚)囊胚细胞数目为93.70,两者差异不显著(P>0.05),并且前者内细胞团数(ICM)与滋养层细胞数(TE)比例为0.23,而后者为0.24,差异不显著(P>0.05)。结果表明,GMP法更适合冷冻保存牛孤雌囊胚,并且其冷冻复苏后囊胚的孵出率达到70.29%。同时使用GMP冷冻囊胚对囊胚细胞的损伤较小。
- 张鹏王中伟马馨高飞唐博张嘉保李子义
- 关键词：孤雌激活囊胚玻璃化冷冻
- 促黄体素LHβ基因的单核苷酸多态性与牛精液品质的相关分析被引量：12
- 2009年
- 采用PCR-SSCP技术分析了LHβ基因的5′UTR和3个外显子在西门塔尔、夏洛来等种公牛中的遗传多态性。结果在所扩增的LHβ基因的5′UTR 2个目的片段和外显子1、3中均未发现PCR-SSCP遗传多态;在第2外显子中发现PCR-SSCP多态,有2种等位基因A和B,有3种基因型AA型、AB型、BB型。对多态片段的测序分析表明:在LHβ基因第2外显子中1个碱基G突变为A。适合性卡方检验表明,该位点的不同基因型频率处于Hardy-Weinberg平衡。用最小二乘法分析LHβ基因第2外显子不同基因型与西门塔尔和夏洛来精液品质的相关性,发现LHβ不同基因型对冻精畸形率和射精量有显著影响,对其他性状的影响差异不显著。结果表明,西门塔尔和夏洛来牛LHβ基因应是影响精液品质的一个主效基因或与影响精液品质的主效基因紧密连锁。
- 刘继丰赵志辉戴立胜岳续朋赵锐锋张嘉保
- 关键词：LHΒ基因SNP精液品质
- EFFECTS OF NOVEL SINGLE NUCLEOTIDE POLYMORPHISMS OF THE FSH BETA-SUBUNIT GENE ON SEMEN QUALITY AND FERTILITY IN BULLS
- ＜正＞[Introduction] The key purpose of preparation of frozen semen for harvesting the maximal amount of high-qua...
- Lisheng DAI~1 Guoliang ZHANG~2 Ning JIANG~1 Tenghe MA~1 Jiabao ZHANG~(1*) 1 Laboratory Animal Center
- 关键词：FERTILITY
- 文献传递
- 热应激条件下小鼠睾丸组织HSP70基因表达谱的研究被引量：3
- 2010年
- 本试验建立了不同温度、不同时间热应激实验小鼠动物模型,采用Real-time PCR和Western-blot方法检测了小鼠睾丸组织热应激蛋白70(HSP70)在mRNA和蛋白质水平的表达规律。结果表明:25℃时,HSP70在mR-NA和蛋白质表达水平没有变化;在31℃、34℃和37℃时,随应激时间的延长,HSP70mRNA和蛋白质的表达均呈现先升高后下降的趋势;40℃时,HSP70mRNA和蛋白质始终持续高表达。结论:小鼠受热应激后,睾丸组织HSP70mRNA和蛋白质均随着温度和时间的增加呈规律性变化,本研究为探索HSP70对精液品质的影响奠定了基础。
- 刘一诺郝林琳张莹王佳赵志辉
- 关键词：热应激热应激蛋白70小鼠睾丸组织
- GMP玻璃化冷冻未成熟牛卵母细胞核成熟及冷冻损伤试验被引量：1
- 2011年
- 本试验通过荧光染色的方法建立了未成熟牛卵母细胞在体外培养过程中第1次减数分裂的各个阶段的参考判定图谱;根据这个标准来观察毛细玻璃管(GMP)玻璃化冷冻对卵母细胞核成熟和冷冻损伤的影响。结果表明,从屠宰场废弃的卵巢表面卵泡内抽取的COCs,70%处于生发泡期,12.5%生发泡开始破裂,7.5%已开始浓缩,这说明从屠宰场获得的COCs有较高的异质性;卵母细胞在成熟培养22h时收获排出第一极体的卵母细胞,可得到丰度较高的极体-胞质染色体对称、紧密相邻的成熟卵母细胞;GMP玻璃化冷冻损伤主要有2种表现形式,首先,直接影响膜结构的完整性,包括细胞膜和核膜,这可从退化的细胞比例看出(8～24h,有21.9%～27.2%的细胞处于该阶段),其次,影响CONDENSED向MⅠ期的过渡,这可从处于CONDENSED卵母细胞的比例看出(8～24h,有24.1%～34.3%的细胞处于该阶段)。
- 许卫华王学琼王子玉王锋张嘉保
- 关键词：未成熟卵母细胞玻璃化冷冻
