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国家科技支撑计划(2007BAD55B05)
国家科技支撑计划(2007BAD55B05) 作品数:23 被引量:27 H指数:3 相关作者: 钱爱东 王春芳 姜秀云 金宁一 鲁会军 更多>> 相关机构: 吉林农业大学 军事医学科学院 吉林大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家自然科学基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 社会学 更多>>
3株猪源非结核分支杆菌16S rRNA基因序列分析 2010年 用PCR方法从3株猪源非结核分支杆菌中扩增16 S rRNA基因5′端片段并进行序列测定。用DNA分析软件将所获得的序列与GenBank中分支杆菌序列相比较,计算种间相似性,构建系统进化树,对菌株进行分类与鉴定。结果表明,3株猪源非结核分支杆菌中浅黄分支杆菌1株,偶发分支杆菌2株。非结核分支杆菌在猪中存在的现象应引起重视,对人畜的影响应进一步研究,以便采取有效的防控措施,保护人类及畜群的健康。 葛淑敏 钱爱东 王铁风关键词:非结核分支杆菌 菌株鉴定 RRNA 副结核病发病机制研究进展 2011年 副结核病(Paratuberculosis,也称Johne's病)是由副结核分枝杆菌即禽分枝杆菌副结核亚种(My-cobacterium avium subsp.Paratuberculosis,MAP)引起的以慢性增生性、顽固性肠炎和进行性消瘦为特征的多种动物共患传染病,只在美国每年对奶牛业的损失就有2.2亿美元[1]。 徐凤宇 姜秀云 幺乃全 钱爱东关键词:发病机制 侵袭力 副结核分枝杆菌ISMav2基因的克隆与序列分析 被引量:2 2009年 以副结核分枝杆菌C-2染色体DNA为模板,以ISMav2基因特异性引物进行PCR扩增,获得约340 bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pMDTM18-T Vector中,通过α-互补法筛选、质粒PCR鉴定及序列分析鉴定,成功构建出重组质粒pMDTM18-T-ISMav2,为进一步研究ISMav2基因及其在副结核病诊断中的应用奠定了基础。 王春芳 郭伟生 姜秀云 钱爱东关键词:副结核分枝杆菌 克隆 结核分枝杆菌L型研究现状与兽医临床 被引量:2 2011年 细菌L型(bacterial L-forms)是细菌在体内外受到各种直接或间接损伤细胞壁的理化和生物因素的影响,其细胞壁受到破坏或细胞壁的合成受阻而转化成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌(cell Wall-de-ficeint bacteria,CWDB)。结核分枝杆菌(Myco-bacterium Tuberculosis)也同其它细菌一样,在干扰细胞壁合成或破坏细胞壁结构的因素作用下以及在自然生长繁殖的过程中,发生细胞壁缺陷形成L型(MTB—L)。 于守平 钱爱东 单晓枫 叶丽萍关键词:结核分枝杆菌L型 兽医临床 细胞壁缺陷 细菌L型 生物因素 Asia1型口蹄疫病毒多表位基因的原核表达及ELISA检测方法的建立 被引量:4 2009年 根据国内流行的Asia 1型口蹄疫病毒的基因组特性,合成了Asia 1型口蹄疫病毒2个流行毒株VP1基因的5个抗原表位,并将其克隆到pMD18-T载体上,再按设计的酶切位点连接,构建出Asia 1型口蹄疫病毒VP1双拷贝基因片段(VP1 Asia)。然后,将VP1 Asia基因连接到原核表达载体pET-28a(+)上,构建了重组表达质粒pET-28a-VP1 Asia,接着将其转入BL21菌中进行原核表达。以纯化的表达蛋白作为抗原检测了牛Asia 1型口蹄疫病毒阳性血清。结果显示,VP1 Asia基因在大肠杆菌中获得了高效表达,以纯化的VP1Asia蛋白作为抗原建立了检测Asia 1型口蹄疫病毒抗体的ELISA方法。以建立的ELISA方法和标准Asia 1型口蹄疫液相阻断ELISA试剂盒对30份临床样品进行了检测,两种检测方法的阳性率分别为90.0%(27/30)和93.3%(28/30),符合率为89.7%(26/29)。本研究为组装Asia 1型口蹄疫病毒抗体ELISA诊断试剂盒奠定了基础。 鲁会军 金宁一 郑敏 韩松 霍晓伟 田明尧 李霄 金扩世关键词:口蹄疫 多表位基因 酶联免疫吸附试验 非典型分支杆菌的分类鉴定方法研究进展 被引量:2 2013年 非典型分支杆菌与结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)复合群、麻风分支杆菌(M.leprae)同属于分支杆菌属(Mycobacterium)。随着对结核杆菌的深入研究,非典型分支杆菌也逐渐引起了人们的关注。为了对非典型分支杆菌进行系统的了解和分类鉴定,就国内外常用的分类鉴定方法进行了综述。 陈菲菲 王春芳 钱爱东关键词:非典型分支杆菌 牛分枝杆菌三重PCR检测方法的建立 被引量:1 2011年 为建立快速检测牛分枝杆菌(M.bovis)的三重PCR方法,本研究以M.bovis ValleeⅢ株染色体DNA为模板,分别以其recA、IS6110、IS1081基因特异性引物进行PCR扩增,建立检测M.bovis的recA-IS6110-IS1081三重PCR反应。通过PCR扩增获得大小约为860 bp、520 bp和340 bp的DNA片段。BLAST序列分析表明,这3个基因片段与GenBank中登录的相关基因的核苷酸序列同源性均达到99%。同时,recA、IS6110和IS1081PCR扩增的敏感性分别达到585 fg、19.5 fg和19.5 fg。特异性较强,只有M.bovis和人结核临床分离株扩增反应为阳性,为进一步研究recA、IS6110和IS1081基因以及其在牛结核病诊断中的应用奠定了基础。 钱爱东 王建 王春芳关键词:牛分枝杆菌 RECA基因 三重PCR 牛分枝杆菌RecA基因的克隆与序列分析 2009年 以牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)Vallee111株染色体DNA为模板,以RecA基因特异性引物进行PCR扩增,获得约240 bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pMDTM18-T Vector中,通过α-互补法筛选、质粒PCR鉴定及序列分析鉴定,成功构建出了重组质粒pMDTM18-T-RecA,为进一步研究RecA基因及其在牛结核病诊断中的应用奠定了基础。 王春芳 郭伟生 姜秀云 钱爱东关键词:牛分枝杆菌 RECA基因 克隆 牛分枝杆菌MPB64基因在大肠杆菌中的表达 被引量:1 2009年 王春芳 张慧清 姜秀云 钱爱东 何昭阳关键词:牛分枝杆菌 大肠杆菌 人兽共患传染病 牛结核病 变态反应 防制措施 一株偶发分支杆菌基因组文库的构建 被引量:2 2011年 对一株致病性的非结核分支杆菌(NTM)即偶发分支杆菌(M.fortuitum)建立基因组文库,选用同尾酶Sau3 AⅠ和BamHⅠ分别酶切基因组DNA和载体pUC18,回收1 kb^7 kb大小范围的插入性DNA片段,与已经酶切去磷酸化的载体用T4连接酶连接,并转化入DH5α感受态细胞中,进行蓝白斑和氨苄抗性筛选,用PCR方法检测连接效率。结果得到阳性克隆4×104个,达到基因组文库要求,用真空冷冻干燥技术保存。该文库的建立为以后对该菌特殊基因方面的研究及基因结构和调控等研究奠定了良好基础,同时也为其他NTM的研究工作奠定了一定的技术和理论基础。 王铁峰 毛冉 赵雪峰 钱爱东关键词:非结核分支杆菌 基因组文库 真空冷冻干燥技术