“十二五”国家科技计划农村领域(2011AA100905-4)
- 作品数：7 被引量：32H指数：4
- 相关作者：路福平刘逸寒李玉王建玲薄嘉鑫更多>>
- 相关机构：天津科技大学中国环境管理干部学院更多>>
- 发文基金：“十二五”国家科技计划农村领域国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 长野芽孢杆菌普鲁兰酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究被引量：4
- 2012年
- 根据NCBI上报道的基因序列设计引物,以长野芽孢杆菌(Bacillus naganoensis)ATCC53909的染色体DNA为模板,PCR扩增普鲁兰酶编码基因pulB。将此基因与表达载体pWB980连接构建重组质粒pWB-pulB,并转化枯草芽孢杆菌WB600。SDS-PAGE结果显示,在100 kD处有特异性条带,经测定重组转化子粗酶液酶活力达10.94 U/mL。酶学性质分析表明,其最适反应温度为60℃,最适反应pH为5.0,且在温度30-60℃及pH4.0-6.0范围内稳定,适合淀粉加工行业的应用。
- 张艳路福平刘逸寒李玉张春峰
- 关键词：普鲁兰酶酶学性质
- 功能性低聚糖合成中糖基转移酶研究进展被引量：9
- 2013年
- 低聚异麦芽糖、低聚果糖、岩藻糖基化寡糖和唾液酸化寡糖等功能性低聚糖因具有显著促双歧杆菌增殖的作用,已被广泛应用于婴幼儿乳粉及食品中,目前合成这些功能糖的主要途径是利用微生物所产的α-葡萄糖基转移酶、果糖基转移酶、岩藻糖基转移酶或唾液酸转移酶等糖基转移酶,以葡萄糖、蔗糖或乳糖等作为底物进行合成。本文针对这几类微生物糖基转移酶的来源、性质、活性、表达和在功能性低聚糖合成中的应用以及相关研究进行简要的概括和总结,为高活力糖基转移酶的研究与开发以及改善其在功能低聚糖生产中的应用性能提供一定的参考。
- 李玉路福平王正祥
- 关键词：果糖基转移酶岩藻糖基转移酶
- 毕赤酵母表面展示磷脂酶D高密度发酵优化被引量：3
- 2012年
- 利用基因工程手段构建获得的一株细胞表面展示表达磷脂酶D的毕赤酵母工程菌株GS115/pKFS-pld,通过摇瓶单因素筛选进行发酵条件优化,确定了最佳发酵条件为:诱导产酶阶段28℃,初始pH6.5,甲醇浓度1.5%,装液量为30 mL/250 mL,250 r/min摇床培养144 h。在此优化条件下菌体量为19.6 g/L,酶活达17.8×10-7kat/g,分别是是优化前的1.38及1.44倍。同时进行了5 L规模发酵罐分批补料培养,结果表明15 mL(/L.h)速率流加甘油补料培养基6 h后,采用溶氧恒定流加法流加甲醇,诱导132 h后,菌体量及PLD活力分别达到67.4 g/L及27.3×10-7kat/g,是摇瓶发酵水平的3.44倍及1.53倍。
- 刘逸寒薄嘉鑫乔婧张超王建玲路福平
- 关键词：磷脂酶D磷脂酰丝氨酸发酵优化酶活力
- 产果糖基转移酶的黑曲霉细胞固定化条件优化被引量：1
- 2013年
- 以卡拉胶为固定化载体,对含有果糖基转移酶的黑曲霉细胞进行固定化。通过单因素和Box-Behnken试验,得到其最优固定化工艺为:卡拉胶9.4g/L、多乙烯多胺9g/L、戊二醛10g/L、KCl 15g/L、菌浓100g/L,在此最优工艺条件下低聚果糖含量达到最大值40.12%,与模型预测值接近。优化后的工艺可为低聚果糖的生产提供技术参考。
- 张颖姚盟成荆玮路福平李玉
- 关键词：黑曲霉果糖基转移酶固定化细胞响应面试验
- 枯草芽孢杆菌谷氨酰胺转氨酶的异源表达被引量：5
- 2012年
- 以野生型枯草芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增获得带有SD序列及谷氨酸棒状杆菌信号肽ΔS0949的BTG基因.将其与大肠杆菌-谷氨酸棒状杆菌穿梭表达载体pXMJ19连接,构建重组质粒pXMJ19-Sbtg转化谷氨酸棒状杆菌ATCC13032.经IPTG诱导后该重组菌发酵液具有交联酪蛋白的能力,表明该重组菌能够实现分泌表达.
- 刘凯刘逸寒张艳田耀路福平
- 关键词：谷氨酰胺转氨酶谷氨酸棒状杆菌信号肽分泌表达
- 果糖基转移酶的固定化及其性质研究被引量：3
- 2012年
- 果糖基转移酶的固定化可以很方便地实现酶的回收和再利用。以HPA25L树脂为固定化载体,对果糖基转移酶进行了固定化初步研究。结果表明,其最优固定化条件为:采用先交联后固定化方法,以戊二醛为交联剂,固定化温度20℃,pH5.0,加酶量10mL/g树脂,戊二醛浓度为0.15%,得到固定化酶酶活达120U/g,酶活回收率达81%,其最适反应温度和pH分别为55℃和7.0,利用固定化酶连续反应12个批次后,酶活仍然保留达20%以上。
- 姚盟成杨丽萍司建华荆玮路福平李玉
- 关键词：果糖基转移酶固定化酶低聚果糖
- 枯草芽孢杆菌工程菌株产普鲁兰酶发酵条件的优化被引量：9
- 2012年
- 利用基因工程手段获得的产长野芽孢杆菌普鲁兰酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌株WB600/pWB-pulB,通过单因素筛选及正交试验进行发酵培养基优化,得到产酶最佳配方为玉米淀粉3.0%,酵母膏2.0%,CaCl20.03%,Na2HPO41.0%。同时对重组菌株摇瓶条件下液体发酵的主要影响因素初始pH、接种量、装液量、转速、温度等进行探讨,确定了产酶最佳培养条件为,以3%接种量接种于优化后培养基,初始pH7.0,装液量30 mL/250 mL,37℃,200 r/min摇床培养36 h。在此优化条件下,普鲁兰酶活力达到20.16 U/mL,是之前研究结果(10.94 U/mL)的1.84倍。
- 刘逸寒薄嘉鑫王亚品张志萌王建玲路福平
- 关键词：普鲁兰酶发酵条件优化酶活力
