“十五”国家科技攻关计划(2002BA514A-17-11)
- 作品数:3 被引量:33H指数:2
- 相关作者:王红宁谭雪梅杨鑫羊云飞张安云更多>>
- 相关机构:四川农业大学四川大学四川省动物防疫监督总站更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 二重PCR检测猪、鸡源致病性大肠杆菌、沙门氏菌磺胺类耐药基因(Sul1、Sul2、Sul3)的研究被引量:24
- 2007年
- 利用二重PCR对临床分离的猪、鸡源致病性大肠杆菌103株和沙门氏菌33株的3个磺胺类药主要耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行了检测。结果表明,在19株耐SD的沙门氏菌中有17株检测出Sul1或Sul2基因,检出率为89.47%,与药敏试验的结果相比,符合率为89.47%;在56株耐SD的大肠杆菌中有53株检出耐药基因,与药敏试验的符合率为94.64%。二重PCR方法与常规PCR的结果符合率为98.5%,具有很高的一致性;与药敏试验也有很好的符合率,具有较高的特异性。整个试验过程只需7 h,比常规PCR节约7 h,检测速度有了较大的提高。
- 羊云飞王红宁谭雪梅张安云杨鑫夏青青曾博
- 关键词:二重PCR大肠杆菌沙门氏菌
- 沙门氏菌耐药基因检测芯片的构建被引量:2
- 2006年
- 以氨基糖苷类、四环素类、磺胺类和氯霉素类四大类抗生素的11种耐药基因为靶基因,构建了耐药基因的检测芯片.确定芯片点样温度为25℃,湿度为65%;各样点中心距离为1000μm,样点直径为220μm.芯片点样结束后,室温干燥6 h,60℃水合处理30 s,80℃干燥10 s,254 nm波长紫外交联10min.以532 nm(绿光)波长扫描采集杂交信号,激光扫描分辨率为10μm,激光功能90%,PMTG 85%.选用tetA基因进行杂交动力学研究,确定靶基因的点样浓度为100 ng?μL-1,探针最适浓度为3600 pg?μL-1,系统检测灵敏度为3 pg?μL-1.基因芯片杂交的主要参数为:44℃预杂交2 h,52℃杂交6 h.杂交信号的判读标准为:样点信噪比(S/N)≥1.5及信号强度中位值≥1000.芯片杂交特异性高,重复性好,实现了11种耐药基因的同时检测.
- 马孟根王红宁余勇张东刘世贵
- 关键词:沙门氏菌耐药基因基因芯片
- 猪源致病性沙门氏菌四环素耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析被引量:8
- 2004年
- 本研究对 16株猪致病性沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测 ,结果表明 ,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性 ,耐药率达 10 0 %。对四环素耐药基因 tet C进行 PCR扩增 ,结果在 12株沙门氏菌的质粒上扩增出特异性产物 ,与药敏试验结果阳性符合率 75 % ,具有较高的检出率 ;序列分析结果表明 tet C的核苷酸同源率较高 ,达 97.7%~ 98.7% ,建立 tet C基因的 PCR检测技术 ,为沙门氏菌对四环素耐药性的分子流行病学监测提供了有效的途径。
- 代敏王红宁吴琦李春于新芬
- 关键词:沙门氏菌四环素耐药基因TETCPCR
- 光生物素标记核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究
- 四环素作为一类广谱抗生素,因其价格低廉、作用范围广泛、毒性低等优点,曾广泛地应用于人医、兽医和植物细菌性感染的防治,导致许多细菌对四环素类抗菌素表现出很高的耐药性。在过去10年中,由沙门氏菌多重耐药菌株引起人和动物的疾病...
- 代敏王红宁
- 文献传递