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HBV表面抗原大蛋白与人胰腺突触角蛋白6之间的相互作用: 2012年; 目的验证HBV表面抗原大蛋白(LHBs)与人胰腺突触角蛋白6(STX6)在细胞内是否存在相互作用,为进一步研究HBV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础。方法构建真核表达质粒pACT-STX6,采用哺乳动物双杂交技术验证LHBs与STX6之间的相互作用。结果实验组和各阴性对照组相对荧光素酶活性值均存在差异,且均具有显著统计学意义(P<0.01)。结论 LHBs与人胰腺STX6在胰腺细胞内存在相互作用。; 张海栋张锦前赵龙凤贾因棠王琦刘顺爱温少芳孙荣华李卓成军

应用酵母双杂交技术筛选和克隆视黄醇脱氢酶11结合蛋白基因: 2008年; 视黄醇脱氢酶11（RDH11）广泛存在于视网膜、心脏、肝脏、胰腺、脑、睾丸和肾脏组织，在前列腺高水平表达，与前列腺癌的发生、发展密切相关。在以HCV核心蛋白作为诱饵对肝细胞cDNA文库进行筛选的研究中，我们发现一个能与核心蛋白结合且功能未知的新基因，命名为HCV核心蛋白结合蛋白12（HCBP12），后来证明其为RDH11。慢性丙型肝炎也是一种代谢性疾病，代谢异常是HCV慢性感染发病机制的重要组成部分。HCV核心蛋白可以与RDH11结合，可能通过改变其酶学催化作用导致肝脏正常代谢途径的紊乱。我们构建了RDH11的真核表达载体，应用酵母双杂交技术筛选RDH11蛋白在肝细胞中相互作用的蛋白，并对筛选出的新基因进行了克隆化。; 李越王琦成军林原樊万虎袁菊洪源; 关键词：视黄醇结合蛋白质类真核表达载体

慢性乙型肝炎伴发代谢综合征影响因素分析被引量：9: 2009年; 目的探讨慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者伴发代谢综合征(metabolic syndrome,MS)的影响因素。方法选取我院2005年1月至2007年12月住院的未接受过抗病毒治疗的CHB患者89例,根据患者是否伴有MS分为两组:MS组(30例)和非MS组(59例)。比较两组间的年龄、性别、BMI等一般情况;肝脏酶学指标(ALT、AST、ALP、LDH、GGT);FPG、FINS、HOMA-IR、HOMA-β等糖代谢相关指标;TG、CHO、Apo A1、Apo B、FFA等脂代谢相关指标;HBV基因型、病毒载量等病毒相关指标;存在肝脏脂肪变性比例及严重程度。结果MS组LDH、GGT、FPG、FINS、HOMA-IR、HOMA-β,TG、Apo B水平,以及肝脏存在脂变的比例及严重程度明显高于非MS组(P<0.05)。75名男性患者中有28名伴有MS,14名女性患者中有2名伴有MS(P>0.05)。两组人群ALT、AST、ALP、CHE、CHO、ApoA1、FFA、病毒载量、HBV基因型无统计学差异(P>0.05)。MS组肝脏脂变程度较非MS组更为严重(P<0.001)。结论CHB患者伴发的MS与胰岛素抵抗及糖、脂代谢因素密切相关(尤与糖代谢相关性更为显著),与病毒本身无明确相关性,CHB患者所存在的肝脏脂肪变及MS之间密切相关,很可能是CHB患者伴发MS的一个重要组分。; 柴艳云张锦前凌伟李贲王琦张维燕范小玲成军; 关键词：慢性乙型肝炎代谢综合征

哺乳动物双杂交技术验证HBV表面抗原大蛋白与人胰腺CDK5RAP3蛋白间的相互作用被引量：1: 2010年; 目的验证HBV表面抗原大蛋白(LHBs)与人胰腺CDK5RAP3蛋白在细胞内是否存在相互作用关系,为进一步研究HBV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础。方法构建真核表达质粒pACT-CDK5RAP3,哺乳动物双杂交技术验证LHBs与人胰腺CDK5RAP3蛋白之间的相互作用。结果实验组和各阴性对照组差别均有统计学意义(P<0.05)。结论LHBs与人胰腺CDK5RAP3蛋白在细胞内存在相互作用关系,且单独转染后没有自身激活作用。; 巩雪俐张丽张建龙张锦前; 关键词：胰腺癌细胞

Factors Associated with Death Due to 2009 Influenza A (H1N1) Virus Infection and Acute Respiratory Distress Syndrome in Beijing, 2009-2011被引量：1: 2012年; Objective Patients with H1N1 virus infection were hospitalized and quarantined, and some of them developed into acute respiratory failure, and were transfered to the medical intensive care unit of Beijing Ditan Hospital, Capital Medical University in Beijing, China. Methods The clinical features and preliminary epidemiologic findings among 30 patients with confirmed H1N1 virus infection who developed into acute respiratory failure for ventilatory support were investigated. Results A total of 30 patients(37.43 ± 18.80 years old) with 2009 influenza A(H1N1) related acute respiratory distress syndrome(ARDS) received treatment with mechanical ventilation, 15 cases of whom were male and 17 cases died of ARDS. Fatal cases were significantly associated with an APACHE Ⅱ score(P = 0.016), but not with PaO 2 /FIO 2(P = 0.912) and chest radiograph(P = 0.333). The most common complication was acute renal failure(n = 9). Five patients received extracorporeal membrane oxygenation(ECMO), 3 of whom died and the others survived. The major causes of death were multiple organ dysfunction syndrome(MODS)(39%), intractable respiratory failure(27%) and sepsis(20%). Conclusions Most patients with respiratory failure due to influenza A(H1N1) virus infection were young, with a high mortality, particularly associated with APACHE Ⅱ score, secondary infection of lung or type 2 diabetes mellitus.; Jin-qian ZhangLi-cheng ZhangNa RenMing ZhangLi-min GuoXing-wang LiJun Cheng; 关键词：H1N1 DISTRESS EXTRACORPOREAL OXYGENATION

人胰腺细胞cDNA文库中丙型肝炎病毒NS4B结合蛋白基因的筛选被引量：4: 2011年; 目的从人胰腺细胞cDNA文库中,采用酵母双杂交方法筛选HCV NS4B包膜蛋白的相互作用蛋白。方法人胰腺细胞cDNA文库先进行扩增,随后纯化及鉴定,然后将鉴定好的人胰腺细胞cDNA文库质粒转化入酵母菌株Y187。构建pGBKT7-NS4B作为诱饵质粒,随之转化酵母菌株AH109,用色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)筛选阳性菌落。配合两种重组酵母菌株AH109与Y187,用四缺培养基及X-α-gal筛选蓝色酵母菌落,提取相应质粒,电转化感受态菌DH5α后再提取质粒,测序仪测序,结果使用PUBMED进行序列比对。结果成功构建pGBKT7-HCV NS4B重组质粒,并从人胰腺cDNA文库中筛选出7种与HCV NS4B蛋白相结合的蛋白基因,包括CDK5RAP3、辅脂肪酶、胰石蛋白、凝乳蛋白、弹性蛋白酶2A、糜蛋白酶和胆盐刺激酯酶。结论 HCV NS4B蛋白可能通过与所筛选出前述蛋白中参与代谢过程的相关蛋白结合,影响糖、脂类代谢过程。; 温少芳张锦前孙荣华李卓高萍王琦刘顺爱成军; 关键词：肝炎病毒属基因文库载体蛋白质类双杂交系统技术 NS4B

人胰腺细胞cDNA文库中丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白基因的筛选被引量：1: 2009年; 目的为进一步研究HCV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础。方法扩增人胰腺cDNA文库并经纯化鉴定后，将文库质粒转化酵母菌株Y187。诱饵质粒pGBKT7-core转化酵母菌株AH109，在色氨酸缺陷型培养基（SD／Trp）上筛选阳性菌落。应用酵母双杂交系统3将阳性重组AH109菌株与重组酵母菌株Y187进行配合，在四缺培养基（SD／Trp／Leu／-His／-Ade）和铺有Xα-gal的四缺培养基上进行筛选，提取蓝色酵母菌落质粒，电转化大肠埃希菌DH5 α后再提取质粒测序，测序结果进行序列比对。结果筛选出11种与HCV核心蛋白相结合的蛋白基因，包括胰凝乳蛋白酶原B1前体、羧肽酶A1，胰蛋白酶原2、胰凝乳蛋白C、胰蛋白酶1、羧肽酶B1、驱动蛋j白家族3B、胰蛋白酶2、线粒体蛋白基因、弹性蛋白酶3A、辅脂肪酶。结论在筛选出的HCV核心蛋白结合的人胰腺细胞蛋白基因中，部分与糖、脂代谢密切相关。; 张锦前张晨宇吴淑玲王琦成军; 关键词：肝炎病毒丙型病毒核心蛋白质类基因文库

HBsAg结合胰腺细胞蛋白基因的酵母双杂交技术筛选被引量：1: 2009年; 目的应用酵母双杂交技术筛选胰腺细胞cDNA文库中与HBsAg相互作用的结合蛋白的基因。方法扩增人胰腺cDNA文库并纯化鉴定,将其转入酵母菌Y187;诱饵质粒PGBKT7-HBSAg转入酵母菌AH109。将以上二者进行配合,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade和X-α-Gal培养基上进行双重菌落筛选;提取阳性质粒转化大肠埃希菌DH5α并测序,在GenBank中进行生物信息学分析。结果获得了6个与HBsAg相结合的蛋白,包括顺乌头酸酶、CDK5RAP3、羧肽酶B1、胰脂肪酶、辅脂肪酶、弹性蛋白酶。结论筛选出的胰腺细胞蛋白与2型糖尿病等代谢性疾病有较密切关系,为进一步研究并阐明乙肝病毒(HBV)感染引发糖脂代谢紊乱机制提供了新的思路。; 王晓春张锦前张晨宇成军王琦李朝品; 关键词：基因 HBSAG 酵母双杂交

人胰腺细胞cDNA文库中丙型肝炎病毒NS4B结合蛋白基因的筛选: 2011年; 目的应用酵母双杂交技术筛选人胰腺细胞cDNA文库中与HCV包膜糖蛋白NS4B相互作用的结合蛋白的编码基因。方法扩增人胰腺细胞cDNA文库进行纯化鉴定,并将文库质粒转化酵母菌株Y187。诱饵质粒pGBKT7-NS4B转化酵母菌株AH109,在色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)上筛选阳性菌落。应用酵母双杂交系统3将阳性重组AH109菌株与重组酵母菌株Y187进行配合,在四缺培养基(SD/-Trp/-Leu/-H is/-Ade)和铺有X-α-gal的四缺培养基上进行筛选,提取蓝色酵母菌落质粒,电转化大肠埃希菌DH5α后再提取质粒测序。测序结果进行序列比对。结果成功构建人胰腺cDNA文库以及pGBKT7-HCV NS4B重组质粒,筛选出7种与HCV NS4B蛋白相结合的蛋白基因。结论筛选出的与HCV NS4B蛋白结合的人胰腺细胞蛋白基因中,部分与2型糖尿病、肝脏脂肪变性密切相关。; 任娜吴璐李贲张婷田梅梅张锦前成军李鑫; 关键词：胰腺丙型肝炎病毒酵母双杂交

糖尿病对肝硬化患者并发自发性细菌性腹膜炎的影响被引量：6: 2007年; 目的探讨合并糖尿病对肝硬化患者并发自发性细菌性腹膜炎（SBP）的影响。方法选择2000年1月-2004年12月收治的肝硬化合并腹水患者3079例，在腹水细菌培养阳性的148例患者中，合并糖尿病患者49例（合并糖尿病组），未合并糖尿病患者99例（非合并糖尿病组）；肝硬化合并糖尿病的405例患者中；根据有无SBP又分为SBP组（246例）和无SBP组（159例）。记录相关情况并进行分析。结果在腹水细菌培养阳性的患者中，合并糖尿病组患者转归差，且真菌感染和混合感染发生率高。在肝硬化合并糖尿病的患者中，SBP组转归差。结论肝硬化患者合并糖尿病时更易并发SBP，且抗感染疗效及预后差，更易发生真菌及混合感染；糖尿病与感染间存在相互作用。; 张锦前范小玲凌伟董小冬徐寒潘馨; 关键词：糖尿病肝硬化自发性细菌性腹膜炎

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