重庆市自然科学基金(2006BB5084)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 相关机构：第三军医大学新桥医院更多>>
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- 基于抗原表位分析的P-糖蛋白表达研究
- 2009年
- 目的:对P-糖蛋白抗原表位进行分析和表达研究。方法:联合运用多种方法对P-糖蛋白的二级结构和表面特性进行分析,运用化学和酶法相结合的技术合成P-糖蛋白基因,再克隆入表达载体pGEX-2T进行表达、鉴定及纯化。结果:位于P-糖蛋白胞外段的抗原表位位点仅见于氨基酸残基82aa～115aa(Ⅰ)、741aa～760aa(Ⅳ)及800aa～816aa(Ⅴ)。SDS-PAGE分析,表达出约29 kD大小的蛋白。结论:该基因片段的高效表达为进一步制备其抗体或筛选其特异性结合肽,进行靶向治疗等工作奠定了基础。
- 王祥卫张远宁周锋叶钢
- 关键词：多药耐药P-糖蛋白抗原表位
- P-糖蛋白结合肽的筛选及合成肽鉴定
- 2009年
- 目的筛选人膀胱癌P-糖蛋白特异性结合肽并合成鉴定。方法利用表达获得的P-糖蛋白胞外段融合蛋白为靶蛋白,采用酶联板法筛选噬菌体随机12肽库,化学合成该特异性肽序列,免疫细胞化学方法进行鉴定。结果从噬菌体随机肽库中筛选获得了与P-糖蛋白特异性结合的噬菌体阳性克隆,测序获得特异性结合肽序列。免疫细胞化学结果显示特异性合成肽可与耐药细胞BIU-87/ADM结合,而与敏感细胞BIU-87不结合。结论筛选获得的结合肽具有一定的亲和力,可与特定的肿瘤细胞结合,表现出一定的肿瘤特异性;P-糖蛋白结合肽的筛选,为人膀胱癌多药耐药的靶向治疗结论提供实验依据。
- 王祥卫张远宁叶钢周锋
- 关键词：多药耐药P-糖蛋白结合肽
