江苏省自然科学基金(BK20130343)
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
- 相关作者：李勇丁少华段生宝魏双施田晶晶更多>>
- 相关机构：中国科学院深圳市血液中心东莞市中心血站更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金中山市科技计划项目江苏省博士后科研资助计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 纳米磁珠免疫分析技术的建立及其检测人红细胞血型Mi^a(MNS7)抗体的初步实验被引量：2
- 2014年
- 目的制备偶联人红细胞Miltenberger血型抗原多肽的免疫磁珠,以之为基础建立快速便捷的Miltenberger血型抗体检测技术。方法利用水热合成法合成纳米磁珠,在其表面包被二氧化硅层,并进行氨基化修饰;利用碳酰二亚胺盐(EDC)分别将人免疫球蛋白G(IgG)及牛血清白蛋白(BSA)偶联于磁珠表面,优化偶联条件,并通过流式细胞仪检测荧光标记的抗IgG来评价偶联效果;将人红细胞Miltenberger血型Mia(MNS7)抗原多肽偶联于磁珠表面,检测血清中的抗体。结果纳米磁珠平均粒径为400 nm,包被二氧化硅层后可有效提高磁珠分散性,经氨基化修饰氨基含量约260μmol/g;在提高偶联效率同时保证蛋白与磁珠间的非特异吸附最低,确定了0.01 mol/L PB溶液(pH=7.4)为偶联BSA、0.1 mol/L PB溶液(pH=7.4)为偶连人IgG的最适反应溶剂,非特异性吸附最小;经荧光素标记抗人IgG检测,偶联人IgG磁珠的荧光信号值约为偶联BSA磁珠的荧光信号值的100倍;Mia抗原多肽免疫磁珠对阴性、阳性血清检测的荧光信号差别可达10倍。结论成功制备偶联人红细胞Miltenberger血型系统Mia抗原多肽的免疫磁珠,并确定其在检测人血清抗体中的应用价值。
- 田晶晶丁少华王红梅段生宝陈晔洲李勇
- 关键词：免疫分析抗体检测
- Miltenberger系统抗-Mi^a及抗-Mur检测固相免疫吸附实验技术的建立被引量：6
- 2014年
- 目的建立不依赖GP.Mur表型红细胞的抗-Mia及抗-Mur检测固相免疫吸附实验技术。方法合成生物素标记的Mia及Mur血型抗原多肽,经凝集抑制试验并通过流式细胞术检测确认其抗原特异性后,通过亲和素固定于U型微孔板孔内作为反应板。同时将抗球蛋白和人IgG致敏红细胞作为指示系统以建立抗-Mia及抗-Mur检测固相免疫吸附试验技术。采用该方法检测2份参考品(分别含抗-Mia及抗-Mur)和500例临床随机血液标本,并与试管法血凝试验比较。结果该方法可检出参考品中的抗-Mia及抗-Mur,500例临床随机血液标本中抗-Mia阳性1例,抗-Mur阳性2例,其余497例检测结果均为阴性,与试管法血凝试验结果一致。结论固相免疫吸附试验技术可准确地检测出抗-Mia及抗-Mur,弥补了临床难以获得GP.Mur表型红细胞的局限性,有助于抗-Mia及抗-Mur检测方法的标准化和规范化。
- 段生宝王红梅丁少华田晶晶陈晔洲史素霞李勇
- 关键词：多肽
- 非活性人细胞依赖型血型抗原的研究及应用
- 2015年
- 长期以来,在医学临床常规的血型抗体检测工作中存在抗原缺乏的困难,由于对活性细胞的依赖,使得血型相容性检测技术落后于临床上同种异型免疫性疾病的诊断、治疗的需求[1]。近年来人们已经对绝大多数血型抗原编码基因、抗原分子以及抗原载体的组成和结构等都有了十分清楚的认识,不依赖活性人血液细胞的血型抗原的研究成为血液免疫学领域的重点研究方向之一,目前主要研究项目有：1重组表达血型抗原;2化学合成血型抗原多肽;3适配体技术筛选的血型模拟抗原；4纳米磁珠细胞膜抗原等。
- 丁少华蒙青林魏双施李勇
- 关键词：血型抗原抗原编码基因血液细胞谱细胞膜抗原
- 人源Mur血型抗体的鉴定和应用——附1例报告被引量：8
- 2016年
- 目的对1名AB型献血者血液中的抗-Mur抗体系统地进行特异性、反应能力等检测,并利用此抗体对中山市人群Mur抗原发生频率进行调查。方法在本实验室,应用合成的Mur抗原特异性多肽,通过红细胞多肽凝集抑制试验鉴定抗-Mur;英国国际血型参比实验室对该抗体进行了经典血型血清学试验、试管凝集方法和Miltenberger抗原谱细胞鉴定抗-Mur。观察蛋白水解酶、酸碱度对Mur抗原抗体反应的影响,以微量板盐水法检测广东中山地区Mur抗原发生频率。结果确定了该抗体是高质量的Mur血型抗原检测试剂;木瓜酶、菠萝酶能破坏Mur抗原,弱酸性环境能增强Mur抗原抗体反应,中山地区献血者Mur抗原占7.31%(128/1 752)。结论我们发现的这例人源抗-Mur,无ABO天然抗体存在,效价高,特异性强,为理想的Mur血型定型抗体,为今后国内外输血界对Mur血型相关研究提供了基本保证。中山地区Mur抗原发生频率较高,输血时应该予以充分的重视。
- 孙爱农魏双施廖艳婷黄小红易峰何锐洪段生宝丁少华李勇
- 关键词：血型抗-MUR抗原频率
- Mur血型抗原抗体调查及应用研究被引量：16
- 2017年
- 目的了解广东地区人群抗-Mur发生频率、性质和来源以及Mur抗原的分布;建立献血者Mur稀有血型库服务于临床用血。方法以微量板的盐水法和聚凝胺法对广东省中山、深圳、江门、东莞、惠州市34 419名献血者做抗-Mur筛查,用抗-Mur做红细胞Mur抗原筛查,部分标本采用固相免疫吸附试验(SPIA)筛查。结果本组筛查对象共检出抗-Mur 48例,占0.14%(48/34 419),其中IgM占79.2%(38/48),IgM+IgG占16.7%(8/48),IgG占4.2%(2/48);献血者抗-Mur频率比较,无显著性差异(P>0.05);中山患者抗-Mur频率为0.17%(5/3010),与献血者比较无明显差异(P>0.05);中山地区,Mur抗原在献血者、患者中的发生率分别为7.31%(128/1 752)vs 7.14%(80/1 120),P>0.05,献血者男性和女性中分别为7.7%(72/931)vs 6.5%(33/504),P>0.05;本组Mur阳性者均为汉族,其中广东省籍贯占66.7%(70/105);建立了中山地区献血者Mur稀有血型库;SPIA技术从2 541份血浆标本中检出4例抗-Mur。结论 SPIA可以检出37℃活性有较高临床意义的抗-Mur,广东地区献血人群Mur血型抗体、抗原发生频率均明显高于Rh D血型抗体、抗原发生频率,不规则抗体检测应增加Mur阳性筛选红细胞,供受血者均应检测Mur血型是否相合,以进一步提高输血免疫安全性。
- 孙爱农段生宝易峰廖艳婷丁少华曾劲峰何子毅古锦萍钟展华李勇
- 关键词：抗-MUR不规则抗体筛查
