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通过线粒体DNA D-Loop区序列分析鉴别多结节性肝细胞性肝癌细胞克隆起源被引量：1: 2010年; 目的探讨通过线粒体DNA(mtDNA)D-Loop区序列分析鉴别多结节性肝细胞性肝癌(肝癌)细胞克隆起源的可行性。方法实验组为多结节肝癌组,标本来自广西医科大学第一附属医院肝胆外科2004年4月至2007年8月期间连续收治的42例共112个结节性HCC行根治性手术切除的肿瘤组织。对照组来自同期单结节HCC手术切除组织共20例40个样本,分2个亚组,对照组Ⅰ为16例单结节肝癌的2块不相邻的癌组织;对照组Ⅱ为4例伴有肉眼门静脉癌栓的肝癌患者,取癌组织和癌栓各1块;正常对照组来自同期肝移植供肝或肝外伤切除的肝组织共5例。用PCR结合直接测序的方法检测各样本组织mtDNA D-Loop区的序列,并分析各例癌结节中序列异同情况。结果在42例实验组标本中,共有131个位点发生碱基变异,其中15个位点为点突变,9个位点发生插入,16个位点发生缺失,共出现98个多态性变化,位点总变异率为11.7%(131/1122,1122为mtDNAD-Loop区全长);实验组中有20例各结节的mtDNA D-Loop区序列存在差异,可能为多中心(MO)起源,22例各结节的mtDNA D-Loop区序列完全相同,可能为单中心(即肝内转移,I M)起源。对照组20例中各样本的mtDNAD-Loop区序列完全相同,为相同细胞克隆起源。正常对照组中共有14个位点发生碱基变异,均为多态性,其中NT479A>G为新的多态性。结论 mtDNA D-Loop区序列具有较高的变异率,应用PCR结合直接测序的方法检测该区序列并比较各个癌结节的DNA序列异同,可以快速、简单、有效地为区分I M和MO起源提供参考。; 李仕来黎乐群彭涛苏铭; 关键词：线粒体DNA D-LOOP区克隆起源

原发性肝癌Twist基因表达的研究被引量：13: 2007年; 目的:研究Twist基因在人原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学SABC染色方法检测45例PLC组织及癌旁组织中Twist蛋白并采用RT-PCR对TwistmR-NA的表达进行分析研究。结果:PLC组织、癌旁组织及正常肝组织中Twist的阳性表达率分别为80.0%、57.8%和22.2%。PLC和癌旁组织与正常对照肝组织中Twist的表达相比较差异均有统计学意义,P<0.05。肿瘤包膜也可见Twist表达。RT-PCR检测Twist结果显示,PLC组织中Twist mRNA表达显著上调。结论:PLC组织中高表达转录因子Twist对肿瘤的发生、发展起着重要作用。; 徐静陈孝平向秋; 关键词：TWIST 免疫组织化学

六月青多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能及p53,Bcl-2,Bax表达的影响被引量：5: 2013年; 目的:探讨六月青多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能及凋亡基因p53,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),多肽抗原(Bax)表达的影响。方法:将50只小鼠于右腋皮下接种S180腹水肿瘤细胞建立S180荷瘤模型,造模24 h后随机分为5组:模型(生理盐水20 mL.kg-1.d-1)组,环磷酰胺(0.02 g.kg-1.d-1)组,六月青多糖高、中、低剂量(分别为1.2,0.6,0.3 g.kg-1.d-1)组。除环磷酰胺组隔天ip给药外,余均ig给药10 d。停药24 h后检测荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺系数和脾脏系数;MTT法检测ConA刺激脾淋巴细胞转化功能;中性红法检测腹腔巨噬细胞吞噬功能;免疫组织化学法检测肿瘤组织中p53,Bcl-2,Bax蛋白。结果:六月青多糖高剂量(1.2 g.kg-1.d-1)抑瘤率达38%;与模型组比较,六月青多糖各剂量组胸腺系数显著增高(P<0.05),高、中剂量组脾脏系数、脾淋巴细胞刺激指数和腹腔巨噬细胞吞噬功能显著增高(P<0.01或P<0.05);六月青多糖各剂量组p53表达无明显差异;高剂量组Bcl-2表达显著减弱(P<0.05)而Bax表达明显增强(P<0.05)。结论:六月青多糖能抑制小鼠S180肿瘤生长,其机制与增强S180荷瘤小鼠免疫功能、下调Bcl-2蛋白及上调Bax蛋白的表达有关。; 汤小军黄建春黄仁彬陈芳梅朱华; 关键词：S180肉瘤免疫功能 B细胞淋巴瘤

5-FU诱导人肝细胞癌MDR的比较蛋白质组学研究被引量：1: 2012年; 目的寻找与人肝细胞癌多药耐药相关的蛋白质分子,为进一步研究人肝细胞癌多药耐药机制提供依据。方法体外培养人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶(5-FU)细胞Bel-FU,MTT法检测Bel-FU的多药耐药性,双向凝胶电泳技术分析细胞Bel-7402与Bel-FU之间的差异表达蛋白,经MALDI-TOF/TOF质谱鉴定。Western blot验证2-DE及质谱的检测结果。结果与Bel-7402比较,Bel-FU中有24个蛋白表达上调,其中包括FAK、TM3、ORP150、CRT、hnRNP K、80K-H protein、EF-1-D、phosphoprotein等,12个蛋白表达下调。Western blot法检测到蛋白FAK、CRT在Bel-FU中高表达,与2-DE结果一致。结论通过建立人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-FU的2-DE图谱筛选了多药耐药相关的差异蛋白,为人肝细胞癌MDR的分子机制研究奠定了基础。; 韦艳张海英梁钢; 关键词：肝细胞癌比较蛋白质组学双向凝胶电泳

玉郎伞多糖抗鸭乙型肝炎病毒及保护肝细胞作用被引量：13: 2013年; 目的:观察玉郎伞多糖(YLSP)在鸭乙型肝炎病毒(DHBV)持续性感染模型中对鸭血清乙型肝炎病毒DNA的抑制作用及保护肝细胞的作用。方法:将DHBV-DNA强阳性麻鸭随机分为YLSP高、中、低剂量组(10,5,2.5 g·kg-1)、拉米夫定(3TC,0.05 g·kg-1)组和模型组,以上各组每日上午灌胃给药l次,连续14 d。于用药前(T0)、用药7 d(T7)和14 d(T14)及停药后3 d(P3)取静脉血用实时荧光定量PCR检测DHBV-DNA含量,同时采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定上清液鸭乙型肝炎病毒表面抗原(DHBsAg)和e抗原(DHBeAg)的滴度;在停药3 d后,取肝脏匀浆,检测肝匀浆液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量。结果:与模型组相比,YLSP高、中剂量治疗组给药7 d(T7)和14 d(T14)即能明显抑制DHBV-DNA复制及血清DHBsAg,DHBeAg的滴度显著降低(P<0.05或P<0.01),停药后3 d(P3),YLSP高剂量组仍能显示出持续有效,血清DHBV-DNA水平及血清DHBsAg,DHBeAg的滴度均无反跳现象(P<0.05或P<0.01);在停药3d后,肝匀浆液中SOD,GSH-Px活性以及MDA,GSH的含量,YLSP高、中剂量组仍能显示出持续有效,没有出现反跳现象(P<0.05或P<0.01)。结论:YLSP具有有效抑制DHBV-DNA和保护肝细胞的作用。; 左巧云陶丽群罗秀葛文漪黄仁彬; 关键词：玉郎伞多糖鸭乙型肝炎病毒实时荧光定量聚合酶链反应谷胱甘肽谷胱甘肽过氧化物酶

三羟基异黄酮对肝纤维化大鼠血清和肝组织中TGF-β_1表达的影响被引量：2: 2010年; 目的观察4,5,7-三羟基异黄酮(Genistein)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠的防治作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型,在实验的第10周末采血和取肝组织,检测血清中ALT、AST、TGF-β1和Ⅰ型胶原,HE染色法观察肝组织改变,免疫组织化学法检测肝组织TGF-β1表达。结果血清学检测显示Genistein能明显降低肝纤维化大鼠ALT、AST、TGF-β1和Ⅰ型胶原水平,病理组织学观察发现Genistein能明显改善肝纤维化大鼠肝组织结构和肝纤维化,免疫组织化学检测表明肝组织TGF-β1表达量与模型组比较显著降低。结论 Genistein对CCl4诱导的肝纤维化大鼠有较好的保护作用,对TGF-β1表达的影响可能是其作用机制之一。; 廖明; 关键词：三羟基异黄酮肝纤维化 TGF-Β1

鼻咽癌患者血清和鼻咽组织中8-羟基脱氧鸟苷含量的变化: 2009年; 目的:8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)是DNA损伤性生物标志物。通过检测鼻咽癌患者血清和鼻咽组织中8-OHdG的水平,初步探究鼻咽癌的发生和发展是否与DNA损伤有关。方法:利用抗8-OHdG单克隆抗体,通过ELISA和免疫荧光组织化学方法分别检测鼻咽癌患者血清和鼻咽组织中8-OHdG的水平。结果:8-OHdG在鼻咽癌患者血清和组织中表达水平较高,与正常人血清和慢性咽炎组织比较差异显著(P<0.05)。结论:结果提示鼻咽癌的发生和发展可能与8-OHdG的水平有关。8-OHdG有望成为辅助鼻咽癌诊断的一个生物标志物。; 黄元姣张贝贝马宁玄超盛晓晓木村真理子; 关键词：鼻咽肿瘤 8-羟基脱氧鸟苷

肝癌早期血清标志物研究的新进展被引量：5: 2012年; 肝细胞癌是世界范围最常见的恶性肿瘤之一,死亡率位居世界肿瘤死亡第二位,肿瘤标志物是诊断早期肝癌的有效手段之一。近年来各种新的肿瘤标志研究进展迅速,在诊断肝癌的敏感度、特异度或复发和预后的判断等方面各具优势,本文就以上最具代表性的肝癌标志物研究新进展进行综述。; 梁嵘罗小玲; 关键词：肝细胞癌血清标志物

卵巢上皮性癌淋巴道定向高转移细胞系的建立及其生物学特性的鉴定被引量：10: 2007年; 目的筛选卵巢上皮性癌(卵巢癌)淋巴道定向高转移恶性肿瘤细胞亚群,并对其生物学特性进行鉴定。方法将卵巢癌细胞株 SKOV3细胞接种于裸鼠爪垫皮下,待植入细胞在裸鼠体内成瘤并发生转移时,取其淋巴结转移灶中癌细胞再次接种于裸鼠爪垫皮下传代,每代均取出淋巴结转移灶中癌细胞进行培养,通过单细胞分离(克隆)培养或局部淋巴结转移灶筛选的方法建立连续传代细胞系,重复传3代后,通过裸鼠接种实验观察各代裸鼠的淋巴结转移率。利用细胞生长曲线、HE 染色、染色体分析、流式细胞分析、裸鼠接种、免疫组化等方法鉴定各代细胞的生物学特性。结果所建立的连续传代1～3代的细胞系,分别命名为 SKOV3-PM1、SKOV3-PM2和 SKOV3-PM3细胞,癌细胞在裸鼠体内传3代后,裸鼠的淋巴结转移率为100%(10/10),原代 SKOV3细胞的淋巴结转移率为10%(1/10),两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);SKOV3-PM3细胞形成的淋巴结转移灶的数目(26/10)较 SKOV3细胞多(1/10,P<0.01);且转移灶多位于淋巴结。细胞染色体分析显示,SKOV3细胞染色体数目大多数分布在83～89条,SKOV3-PM3细胞染色体数目大多数分布在91～105条。SKOV3与 SKOV3-PM3细胞染色体数目比较,差异有统计学意义(P<0.05);转移灶中上皮膜抗原(EMA)表达呈阳性,证实转移细胞株保持着卵巢癌细胞的生物学特性;SKOV3-PM3细胞倍增时间为22.7 h,SKOV3细胞为49.6 h,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞分析显示,SKOV3-PM1、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3细胞的淋巴结转移灶中癌细胞的 DNA 合成期和分裂期细胞的比例分别为24.2%、29.4%和36.7%,明显高于 SKOV3细胞的21.5%(P<0.05)。结论本研究成功建立了卵巢癌淋巴道定向高转移细胞系,为研究卵巢癌的淋巴结浸润转移的发病机制提供了良好的实验材料。; 阮和云黎丹戎李力冠潇张玮; 关键词：卵巢肿瘤淋巴转移细胞系肿瘤

人肝癌细胞2-DE实验技术条件优化: 2012年; 双向凝胶电泳（two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）是目前比较蛋白质组学研究中最常用蛋白质的技术,通过利用蛋白质的等电点与分子量特性将蛋白质分离,与质谱技术（mass spectrometry,MS）联用,已被广泛应用于分析细胞或组织样品中整体蛋白质表达的差异情况〔1-2〕。然而实验操作过程中,; 韦艳张海英梁钢; 关键词：双向凝胶电泳人肝癌细胞

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广西地方性高发疾病防治研究重点实验室基金

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