国家自然科学基金(30472004)
- 作品数：8 被引量：29H指数：3
- 相关作者：王东李增鹏卿毅张沁宏李梦侠更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院新津县人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金军队“十一五”面上项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- pSilence APE1提高骨肉瘤放疗敏感性的动物实验研究被引量：7
- 2007年
- 目的:观察APE1 siRNA表达载体pSilence APE1基因放射治疗对骨肉瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:人骨肉瘤细胞9901荷瘤裸鼠30只随机分为3组:对照组、单独放射治疗组和pSilence APE1+放疗联合治疗组。实验治疗第15天处死动物,绘制肿瘤生长曲线,免疫组化SP法检测骨肉瘤细胞APE1蛋白的表达、骨肉瘤细胞的微血管密度和TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡的情况。结果:pSilence APE1+放疗联合治疗组和对照组、单独放射治疗组的肿瘤大小存在显著性差异(P<0.05)。pSilence APE1+放疗联合治疗组肿瘤组织APE1表达显著降低;pSilence APE1+放疗联合治疗组肿瘤微血管密度明显低于对照组和单独放射治疗组(P<0.01),而肿瘤细胞凋亡显著增加(P<0.01)。结论:实验结果表明,pSilence APE1基因放射治疗能显著抑制骨肉瘤的生长。
- 卿毅王东仲召阳李增鹏张沁宏
- 关键词：骨肿瘤RNA干扰
- 人APE1/Ref-1基因真核表达质粒的构建和鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的构建含人APE1/Ref-1基因全长cDNA片段的真核表达质粒pcDNA3.1^+APE1,以期进一步研究该基因对细胞DNA损伤的保护作用。方法采用RT-PCR法定向克隆人APE1/Ref-1基因全长cDNA片段,构建pGM-T Easy/APE1质粒,测序鉴定APE1/Ref-1基因cDNA序列正确后,将目的片断亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1^+上,构成pcDNA3.1^+APE1表达质粒,并用Western blotting法检测转染人脐静脉内皮细胞APE1/Ref-1蛋白的表达水平。结果经酶切及测序证实APE1/ Ref-1基因真核表达质粒pcDNA3.1^+APE1构建成功,Western blotting法检测到转染pcDNA3.1^+APE1后,细胞内APE1/Ref-1蛋白表达明显增加。结论成功构建含人APE1/Ref-1基因全长cDNA片段的真核表达质粒,为探讨APE1/Ref-1对细胞电离辐射损伤的保护作用奠定了基础。
- 谭永红王东李增鹏杨宇馨
- 关键词：APE1/REF-1真核表达载体DNA损伤电离辐射
- 肝细胞癌DNA损伤修复基因APE1的表达及与p53的关系被引量：1
- 2009年
- 目的探讨肝细胞癌（HCC）中脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶（APE1）的表达特点及APE1与突变型053表达的关系。方法收集1991年至2004年第三军医大学大坪医院野战外科研究所病理科10例正常肝组织、40例结节性肝硬化组织和103例HCC组织标本，应用免疫组织化学SP二步法分别检测APE1和p53的表达情况。采用χ2检验、相关分析及KIndependent—SamplesTests检验分析所得结果。结果APE1在正常肝组织、肝硬化和HCC组织中均有不同程度的表达，阳性率分别为40．0％、82．5％、100．0％，三者比较差异有统计学意义（χ22=47．852，P〈0．01）。正常肝组织APE1仅表达于细胞核；肝硬化和HCC组织中APE1出现异位表达，异位表达率分别为20．0％和53．4％（χ2=20．757，P〈0．01）。不同APE1／p53表达模式的HCC临床分期及病理学分级比较差异有统计学意义（χ2=12．910，14．481，P〈0．01），APE1异位表达／p53阳性的HCC恶性程度高。结论APE1过表达及异位表达与HCC的发生、发展密切相关；APE1异位表达和p53突变可能在肿瘤的发生、发展过程中具有协同促进作用。
- 张沁宏向德兵李梦侠廖培雷李增鹏王东
- 关键词：肝肿瘤突变型P53
- APE1/Ref-1基因结构及其表达调控被引量：10
- 2006年
- 人类脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE1/Ref-1)是生物大分子功能复合体的一个范例。它在DNA的碱基切除修复、对转录因子的氧化还原调控和活性氧簇的调控等多个重要的生物学过程中发挥着主要的作用。文章综述了APE1/Ref-1表达调控机制的研究进展,展望其今后的研究方向。
- 李梦侠王东
- 关键词：转录后修饰
- APE1在宫颈癌的表达及其与锎-252中子放疗预后的关系被引量：7
- 2009年
- 目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)基因在宫颈癌中的表达情况及其与临床病理和锎-252中子放射治疗预后的关系。方法应用免疫组织化学法检测10例正常宫颈组织、15例子宫颈上皮内肿瘤(CIN)组织、89例宫颈癌组织(接受锎-252中子刀放疗)中APE1的表达,并分析其与宫颈癌临床病理及患者预后的关系。结果宫颈癌组织APE1表达水平明显高于正常宫颈组织和CIN病例(P<0.01)。APE1在正常宫颈组织和CIN病例均呈胞核表达,宫颈癌组织中APE1呈胞核表达(59例)、单纯胞浆表达(8例)或核浆共同表达(22例)。APE1表达强度与宫颈癌FIGO分期、病理分级和淋巴结转移情况有关(P<0.05),与年龄和病理分型无关。APE1亚细胞定位情况与FIGO分期、病理分级有关(P<0.01),与淋巴结转移情况无关。生存分析显示在APE1核表达组(中位生存时间70.9月)和APE1低表达组(中位生存时间75.8月)的生存时间明显长于APE1浆表达组(中位生存时间57.8月)和APE1高表达组(中位生存时间56.5月)(P=0.025,0.001)。结论APE1胞质异位表达可能与宫颈癌的发生、发展相关,APE1亚细胞定位和表达水平对锎-252中子放射治疗宫颈癌的疗效有提示作用。
- 卿毅王东雷新向德兵李梦侠李增鹏单锦露
- 关键词：锎-252中子宫颈癌
- pSilence APE1联合中子射线治疗骨肉瘤的体外实验研究被引量：3
- 2007年
- 目的应用双功能基因脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)小干扰RNA(siRNA)表达载体pSilence APE1“敲低”人骨肉瘤HOS细胞APE1的表达,观察pSilence APE1联合中子放射治疗对HOS细胞生长抑制的协同作用,并探讨其可能机制。方法用脂质体将pSilence APE1质粒导入HOS细胞,同时给予不同剂量的锎-252中子射线照射,采用克隆形成分析法测算平均致死剂量(D0)、准域剂量(Dq)值,彗星分析法检测照射后细胞的DNA损伤情况,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果克隆形成分析显示对照组与pSilence APE1转染组HOS细胞经锎-252中子射线照射后的D0值分别为2·80和1·89,Dq值分别为2·66和2·00。分别以2、5、10Gy锎-252中子射线照射对照组与pSilence APE1转染组HOS细胞后,碱性彗星尾力矩分别为6·664±0·648、20·322±1·433、33·909±1·245和7·997±0·542、25·238±1·185、39·191±1·052(P<0·01);细胞凋亡率分别为4·00%、5·91%、9·63%和5·68%、7·55%、13·51%(P<0·05)。结论pSilenceAPE1能显著提高HOS细胞对中子射线的敏感性,促进DNA损伤和细胞凋亡。pSilence APE1基因联合中子放疗可能成为今后骨肉瘤治疗的新方法。
- 卿毅王东仲召阳李增鹏张沁宏
- 关键词：骨肿瘤APE1锎-252中子
- pcDNA3．1＋Ape1质粒转染对人脐静脉内皮细胞辐射敏感性的影响
- 2008年
- 目的探讨pcDNA3．1＋Ape1质粒转染对血管内皮细胞电离辐射敏感性的影响。方法以pcDNA3．1＋空载体转染、未转染细胞作对照，在细胞转染pcDNA3．1＋Ape1质粒后48h，给予3组细胞2、4、6和8Gy高能x线照射，采用碱性单细胞凝胶电泳和克隆形成实验，分析在不同辐射剂量条件下pcDNA3．1＋Ape1质粒转染对人脐静脉内皮细胞辐射敏感性的影响。结果与未转染细胞相比，3μgpcDNA3．1＋Ape1质粒转染细胞的初始OTM和残存OTM值在2Gy照射时显著降低（P〈0．01），但8Gy照射时差异无统计学意义（P〉0．05）；SF2显著增高（P〈0．05），但SF4、SF6及SF8的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论pcDNA3．1＋Ape1质粒转染可增加内皮细胞对低剂量电离辐射的抵抗能力。
- 谭永红向德兵史曦凯尹晓玲王东
- 关键词：内皮细胞
- APE1 RNA干扰提高骨肉瘤中子放疗敏感性的研究被引量：3
- 2007年
- 目的应用pSilence APE1“敲低”HOS细胞APE1的表达，观察pSilence APE1联合中子放疗对HOS细胞生长抑制的协同作用并探讨其机制。方法用脂质体将pSilence APEI质粒导人HOS细胞，“敲低”HOS细胞中APE1的表达，同时给予^252Cf中子射线照射，MTT法绘出细胞存活曲线，克隆形成分析测算D37值和剂量修饰系数（DMF），彗星分析法检测照射后细胞的DNA损伤情况，并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果由克隆形成分析得到对照质粒与转染pSilence APE1质粒的HOS细胞经^257Cf中子照射后的D37值为3．02和2．42，DMF值为1．43。以上2组HOS细胞以200、500和1000cGy3个剂量^252Cf子射线照射后，碱性彗星尾力矩分别是6．146±0．741、19．918±1．574、31．885±1．192和7．997±0．542、25．238±1．185、39．191±1．052（P〈0．01）；细胞凋亡率是4．00、5．91、9．63和5．68、7．55、13．51（P〈0．05）。结论pSilence APE1能显著提高HOS细胞对中子射线的敏感性，促进DNA损伤和细胞凋亡。pSilence APE1基因联合中子放疗可能成为今后骨肉瘤治疗的新方法。
- 王东卿毅仲召阳李增鹏张沁宏杨宇馨
- 关键词：骨肿瘤APE1中子
