公共文化服务平台

共 8 条记录，以下是 1-8

全选清除导出

排序方式：

缺氧反应元件启动子表达反义血管内皮生长因子(VEGF)_(165)cDNA靶向性抑制骨肉瘤细胞VEGF表达被引量：8: 2005年; 目的以缺氧诱导因子1/缺氧反应元件(HIF1/HRE)基因调节系统为载体,构建含HRE启动子的人反义血管内皮生长因子(VEGF)165cDNA真核表达载体,探讨其对缺氧条件下骨肉瘤细胞VEGF表达的靶向性抑制作用。方法采用聚合酶链反应(PCR)和DNA重组技术构建由HRE启动子驱动的含荧光素酶(Luc)报告基因和人反义VEGF165cDNA全长的真核表达质粒,将其转染骨肉瘤细胞系MG63,用液闪计数仪测定缺氧对报告基因表达的调节,酶链免疫吸附试验(ELISA)法检测缺氧条件下细胞VEGF表达的变化。结果成功构建了由HRE启动子驱动的含Luc和反义VEGF165cDNA全长的真核表达质粒pBIHRELucAsVEGF165,该质粒转染骨肉瘤细胞系,缺氧条件下可使报告基因在肿瘤细胞中的表达提高3.5×102倍,使肿瘤细胞VEGF分泌下降45%。结论利用肿瘤缺氧,HRE启动子能够实现反义VEGF165的高效表达,为开展靶向性抗肿瘤血管生成治疗提供了实验依据。; 王燕汪睿乔慧李晋云彭挺生李扬张萌梁惠珍丘钜世; 关键词：骨肉瘤内皮生长因子反义血管内皮生长因子骨肉瘤细胞系缺氧反应元件 VEGF表达启动子

骨肉瘤组织中MICA基因mRNA和蛋白的表达被引量：2: 2009年; 【目的】检测骨肉瘤组织中MHCI类链相关蛋白A(MHC class I chain-related A,MICA)基因mRNA和蛋白的表达情况,为探讨骨肉瘤的肿瘤免疫机制提供信息。【方法】应用RT-PCR方法检测MICA mRNA在11例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中的表达情况;分别应用免疫组织化学方法、Western blot和流式细胞术检测66例石蜡包埋骨肉瘤组织、6例石蜡包埋正常人骨组织、9例新鲜骨肉瘤组织和5个骨肉瘤细胞株中MICA蛋白的表达情况。【结果】骨肉瘤组织中MICA mRNA表达率为81.8%(9/11),5个骨肉瘤细胞株均表达MICA mRNA;MICA蛋白在骨肉瘤组织和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)和0%(0/6);骨肉瘤细胞株Saos-2、MG63和HOS阳性表达膜表面MICA蛋白,而细胞株U2OS和OS732只有少量细胞呈阳性表达。【结论】MICA mRNA和蛋白广泛表达于骨肉瘤组织和细胞株。; 卢善明薛玲肖萍李扬车丽洪乔慧; 关键词：骨肉瘤 MHC MICA

骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A蛋白和基质金属蛋白酶-9的关系: 2009年; 目的:探讨骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A(MICA)蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系。方法:用免疫组化检测66例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达情况。结果:MICA和MMP-9蛋白在骨肉瘤组织的表达率分别为51.5%和54.5%,两者在骨肉瘤组织的表达呈正相关(r=0.414,P<0.01)。结论:MICA广泛表达于骨肉瘤组织,其与MMP-9表达可能由相同信号通路调控。; 卢善明薛玲邓汪东曹清华车丽洪; 关键词：骨肉瘤基质金属蛋白酶-9

膜型/可溶型MHCⅠ类链相关分子A及其受体NKG2D在骨肉瘤中的表达及其意义被引量：4: 2007年; 目的探讨膜型/可溶型 MHC Ⅰ类链相关分子 A(MICA)及其受体 NKG2D 在骨肉瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学(LSAB法)检测膜型 MICA(mMICA)在43例骨肉瘤组织中的表达;用流式细胞仪检测上述病例中的16例患者外周血淋巴细胞 NKG2D 的表达;用 ELISA 法检测患者血清中可溶型 MICA(sMICA)的水平。结果骨肉瘤细胞广泛表达 mMICA(37/43),外周血淋巴细胞 NKG2D 的表达普遍下降,两者的表达水平均与骨肉瘤的分化呈正相关(P<0.05),与临床分期呈负相关(P<0.05)。检测16例骨肉瘤患者血清中 sMICA 含量,其中5例升高,且与骨肉瘤的远处转移及临床分期呈正相关(P<0.05)。结论 (1)骨肉瘤细胞表达 mMICA,外周血淋巴细胞NKG2D 的表达以及血清中 sMICA 的含量与骨肉瘤的分化及临床分期相关,因此可望作为骨肉瘤病理诊断和估计预后的生物学指标。(2)MICA-NKG2D 介导的免疫监视障碍可能促进了骨肉瘤的进展。; 肖萍薛玲车丽洪吴惠茜乔慧; 关键词：骨肉瘤 MHC

NKG2D及其配体在肿瘤免疫中的作用被引量：2: 2005年; 肖萍薛玲乔慧; 关键词：NKG2D NKG2D配体肿瘤免疫

骨肉瘤组织中MICA、MMP-9和NF-κB蛋白的表达及相关性被引量：5: 2009年; 目的探讨骨肉瘤组织中MHCⅠ类链相关蛋白A(MHC class Ⅰ chain-related A,MICA)、MMP-9和NF-κB的表达及相互间的关系,为研究骨肉瘤组织中MICA蛋白表达和脱落机制提供组织学依据。方法应用免疫组织化学方法检测66例骨肉瘤、11例骨母细胞瘤,8例骨化性纤维瘤和6例正常骨组织中MICA蛋白的表达情况,并检测66例骨肉瘤组织中MMP-9和NF-κB蛋白的表达情况。结果(1)MICA蛋白在骨肉瘤组织、骨母细胞瘤、骨化性纤维瘤和正常骨组织的表达率分别为51.6%(34/66)、9%(1/11)、0(0/8)、0(0/6),骨肉瘤组织中MICA表达与骨母细胞瘤(P=0.01)、骨化性纤维瘤(P<0.01)和正常骨组织(P<0.05的差异有显著性。(2)骨肉瘤组织中MMP-9和NF-κB表达率分别为55%(36/66)和73%(48/66);NF-κB与MICA(r=0.373,P<0.01)和MMP-9(r=0.536,P<0.01)的表达呈正相关关系。结论MICA蛋白可作为骨肉瘤诊断的分子标志物;NF-κB可能参与MICA蛋白表达和脱落的分子机制,NF-κB可作为骨肉瘤免疫治疗的候选靶点。; 卢善明薛玲肖萍李扬曹清华乔慧; 关键词：骨肉瘤 MICA MMP-9 NF-ΚB

缺氧反应元件启动子-反义血管内皮生长因子_(165)cDNA和单纯疱疹病毒1-胸苷激酶基因共表达治疗骨肉瘤的体外研究被引量：1: 2007年; 目的探讨缺氧条件下,转基因细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达变化以及单纯疱疹病毒1-胸苷激酶(HSV1-TK)/丙氧鸟苷(GCV)系统对转基因细胞的特异杀伤作用。方法以缺氧诱导因子-1/缺氧反应元件(HIF-1/HRE)基因调节系统为载体,采用 DNA 重组技术构建由 HRE 启动子驱动的含人反义 VEGF_(165) cDNA 全长和 HSV1-TK基因的真核表达质粒,将其稳定转染人骨肉瘤细胞系 MG63。应用 PCR 和 RT-PCR 方法检测 TK 基因的整合及转录;用 MTF 法和混合共培养实验分别检测转基因细胞在缺氧或不缺氧条件下对GCV 的敏感性以及 HSV1-TK/GCV 系统的"旁观者效应";ELISA 法检测细胞在缺氧条件下 VEGF 表达变化;流式细胞仪检测细胞周期改变及电镜观察细胞超微结构变化。结果成功构建了由 HRE 启动子驱动的含反义 VEGF_(165) cDNA 全长和潮霉素磷酸转移酶-单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(HyTK)基因的真核表达质粒 pBI-HRE-AsVEGF_(165)-HyTK;得到转基因细胞系 MG63TV;检测到 MG63TV 细胞内 TK 基因的 DNA 和 mRNA。缺氧条件下,转基因细胞存活率与 GCV 浓度呈现剂量依赖性,对 GCV 的敏感性提高了100倍;HSV1-TK/GCV 系统旁观者效应明显增强;肿瘤细胞 VEGF 分泌下降50%。缺氧和 GCV 共同作用使转基因细胞 DNA 合成抑制,细胞周期阻滞于 G_0～G_1期,细胞发生凋亡和坏死。结论利用肿瘤缺氧,HRE 启动子能够实现反义VEGF_(165)对体外培养的肿瘤细胞 VEGF 表达的靶向性抑制作用,并能增强 HSV1-TK/GCV 系统对肿瘤细胞的特异性杀伤作用和旁观者效应。该双基因共表达载体系统为实践联合抗血管生成和自杀基因治疗骨肉瘤提供了实验依据。; 王燕乔慧彭挺生李扬张萌梁惠珍丘钜世; 关键词：骨肉瘤缺氧诱导因子血管内皮生长因子类

MHCⅠ类链相关蛋白A和基质金属蛋白酶-9在骨肉瘤组织学和血清学中的关系被引量：1: 2009年; 目的探讨MHCⅠ类链相关蛋白A(MHC classⅠchain-related A,MICA)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在骨肉瘤组织学和血清学中的关系,为研究骨肉瘤组织中MICA蛋白脱落的分子机制提供组织学基础。方法应用免疫组织化学方法检测16例骨肉瘤中MICA和MMP-9蛋白的表达情况,同时采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测16例骨肉瘤患者血清中MICA和MMP-9的含量。结果16例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达率分别为42.5%(7/16)和56.3%(9/16),两者的表达无相关性(r=0.454,P>0.05);骨肉瘤患者血清中可溶性MICA(soluble MICA,sMICA)浓度高于健康人(P<0.05),与血清中MMP-9的浓度无相关性(r=-0.429,P>0.05),但与组织中MICA蛋白表达呈负相关(r= -0.502,P<0.05)。结论骨肉瘤患者血清中sMICA浓度升高,而血清中MMP-9含量对MICA浓度无明显影响;骨肉瘤患者可能存在NKG2D-MICA介导的免疫监视功能障碍,MICA蛋白的脱落可能是骨肉瘤逃避免疫监视的一个新机制。; 卢善明薛玲邓汪东曹清华郑惊雷车丽洪; 关键词：骨肉瘤 MHC MMP-9

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(30300354)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(30300354)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈