国家自然科学基金(30700671)
- 作品数:7 被引量:12H指数:2
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- 维生素E对邻苯二甲酸二丁酯细胞毒性的影响
- 2008年
- 目的探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对小鼠淋巴瘤细胞(EL4)的毒作用及维生素E(VitE)对细胞的保护作用。方法分别用10、100、500、1000μmol/LDBP作用细胞24h,并且VitE进行干预,检测细胞增殖、乳酸脱氢酶(LDH)活力及丙二醛(MDA)含量。结果DBP作用EL4细胞24h,100~1000μmol/LDBP均能明显促进EL4细胞增殖。1000μmol/LDBP可明显升高EL4细胞上清液中LDH活力及MDA含量。与1000μmol/LDBP组比较,50μmol/LVitE能显著降低细胞上清液中LDH活力及MDA含量。结论DBP使EL4细胞产生氧化损伤,这可能与DBP的免疫毒性有关。
- 裴秀丛李哲张玉敏段志文
- 关键词:细胞毒性维生素E
- 活化T细胞核因子在DEHP调控IL-4表达中作用被引量:5
- 2012年
- 目的通过研究活化T细胞核因子(NFAT)在邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(DEHP)影响白细胞介素-4(IL-4)表达中的作用,探讨DEHP的免疫毒性机制。方法以佛波酯(PMA)和离子霉素(Ion)为激活剂,用10、50μmol/L DEHP染毒激活的脾淋巴细胞4 h,同时用0.5μmol/L钙调神经磷酸酶抑制剂他克莫司(FK506)进行干预,最后分别检测IL-4、NFATp、NFATc mRNA表达与NFATp和NFATc蛋白表达。结果以10 ng/mL PMA+0.5mg/mL Ion为激活剂时,激活组的IL-4 mRNA表达相对值为(2.53±0.42),50μmol/L DEHP染毒组的相对值为(18.21±1.67),差异有统计学意义(P<0.01);而FK506干预组的IL-4 mRNA表达相对值为(9.85±1.24),与50μmol/L DEHP染毒组比较,差异有统计学意义(P<0.01);50μmol/L DEHP染毒组的NFATc mRNA表达相对值为(2.00±0.32),激活组的相对值为(1.37±0.10),差异有统计学意义(P<0.05);同时DEHP促进NFATc蛋白在细胞质和细胞核里表达;染毒4 h后,与激活组NFATp mRNA表达相对值(2.51±0.45)比较,10、50μmol/L DEHP染毒组的相对值分别为(5.14±0.28)和(5.38±0.60),差异均有统计学意义(P<0.01);但DEHP降低了细胞质和细胞核里NFATp蛋白表达。结论 NFAT在DEHP调控IL-4表达中具有重要作用。
- 裴秀丛郭丽张玉敏段志文马明月
- 邻苯二甲酸二(2-乙基)己基酯影响白细胞介素-4蛋白的机制初探被引量:2
- 2009年
- 目的通过研究钙调神经磷酸酶(CaN)在邻苯二甲酸二(2乙-基)己基酯(DEHP)影响白细胞介素(IL)-4蛋白表达中的作用,初步探讨DEHP的免疫毒性机制。方法以10μg/L佛波酯(PMA)及0.5 mg/L离子霉素(Ion)为激活剂,用10、50μmol/L DEHP染毒脾淋巴细胞72及96 h,同时用0.5μmol/L CaN抑制剂FK506进行干预。实验终点检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出、用酶联免疫吸附试验测定细胞上清液中CaN蛋白及IL-4蛋白含量。结果与PMA+Ion组比较,10、50μmol/L DEHP均使细胞上清液中LDH漏出明显升高;50μmol/L DEHP作用细胞72及96 h,使CaN蛋白表达分别增加3.83倍及3.91倍。实验72 h,50μmol/L DEHP与PMA+Ion组比较明显促进IL-4蛋白表达,且FK506能抑制淋巴细胞分泌IL-4蛋白。结论CaN在DEHP调控IL-4蛋白表达中具有重要作用。
- 裴秀丛郭丽张玉敏段志文马明月
- 关键词:钙调神经磷酸酶
- 邻苯二甲酸二丁酯对EL4细胞增殖作用的影响
- 2008年
- 目的探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对激活与未激活的小鼠淋巴瘤细胞(EL4细胞)增殖作用的影响。方法用佛波醇酯(简称PMA,1、5、10ng/m1)激活EL4细胞,分别用不同浓度的DBP(0.1、1、2.5、5、10μmol/L)在无或有PMA激活条件下作用EL4细胞24h及48h,以MTT法检测细胞增殖情况。结果与对照组相比,不同浓度的DBP单独作用于未激活的EL4细胞24h及48h均未引起细胞明显增殖。以5ng/ml PMA激活EL4细胞,0.1~2.5μmol/LDBP作用细胞24h就能明显促进细胞增殖,而5μmol/LDBP在48h时细胞增殖作用显著(P〈0.05)。结论DBP能明显促进激活的EL4细胞增殖,且DBP与PMA对EL4细胞增殖有协同作用,可能与DBP的免疫毒性有关。
- 张玉敏裴秀丛段志文
- 关键词:细胞增殖
- 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对原代淋巴细胞Th1/Th2平衡的影响被引量:2
- 2009年
- 目的研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对原代淋巴细胞分泌Th1、Th2型细胞因子的作用,进而探讨其对Th1/Th2平衡的影响。方法分别用刀豆蛋白(ConA)及佛波酯+离子霉素(PMA+Ion)去激活脾淋巴细胞,以不同浓度DEHP染毒细胞72 h及96 h,实验终点检测细胞增殖、细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力及Th1型细胞因子[白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)]、Th2型细胞因子(IL-4、IL-6)的蛋白表达。结果10、50μmol/L DEHP单独作用细胞72 h明显促进细胞增殖。10、50μmol/L DEHP作用激活的淋巴细胞72 h显著增加了细胞上清液中LDH活力。50μmol/L DEHP作用淋巴细胞72 h能明显降低IL-2蛋白含量;1、10、50μmol/L DEHP 72 h则显著降低IFN-γ及IL-4含量。而DEHP对IL-6蛋白影响不显著。10、50μmol/L DEHP 96 h均明显降低了Th1/Th2比值。结论不同激活条件下,DEHP对淋巴细胞分泌细胞因子的影响不同,并能影响Th1/Th2平衡。
- 张玉敏石新钢郭丽段志文马明月裴秀丛
- 关键词:TH1/TH2平衡细胞因子
- PAEs对淋巴细胞分泌IL-4蛋白的影响被引量:3
- 2009年
- 目的:以DBP和DEHP为例,研究PAEs对淋巴细胞分泌IL-4蛋白的影响,为进一步探讨PAEs的免疫毒性提供基础。方法:分别用ConA及PMA+Ion去激活脾淋巴细胞,以不同浓度DBP和DEHP染毒细胞72 h、96 h,实验终点用ELISA方法检测细胞上清液中细胞因子IL-4蛋白表达。结果:不同激活条件下,10μM、50μM的DBP或DEHP作用72h均明显降低细胞上清液中IL-4蛋白表达;而10μM的DBP或DEHP作用96h却显著促进了IL-4蛋白表达。结论:不同激活条件下,PAEs对淋巴细胞分泌IL-4蛋白影响不同,可能与其免疫毒性有关。
- 裴秀丛李哲张玉敏郭丽段志文马明月
- 关键词:淋巴细胞IL-4
- DEHP对小鼠淋巴细胞分泌IL-2影响被引量:2
- 2010年
- 目的通过邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)影响小鼠淋巴瘤细胞(EL4)分泌白细胞介素-2(IL-2)蛋白影响机制研究,探讨DEHP对辅助性T细胞1(Th1)型细胞因子影响。方法不同浓度DEHP染毒以25 ng/mL佛波酯(PMA)+1μg/mL离子霉素(Ion)激活的EL4细胞,并用钙调神经磷酸酶抑制剂FK506进行干预;实验6 h用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测活化T细胞核因子(NFAT)的mRNA表达;实验48 h用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中IL-2蛋白表达。结果与激活剂组的(72.59±9.05)pg/mL比较,10,50μmol/L DEHP染毒组的IL-2蛋白分泌量为(36.00±5.10),(32.00±1.86)pg/mL,明显降低EL4细胞分泌IL-2蛋白(P<0.01);50μmol/L DEHP明显升高了EL4细胞中NFAT2 mRNA相对含量,且降低了NFAT1 mRNA相对含量(P<0.05);0.05,0.5μmol/L FK506未明显影响IL-2蛋白表达;Spearman相关分析表明,DEHP影响IL-2蛋白与NFAT mRNA表达无相关。结论DEHP可能是通过NFAT非依赖途径影响EL4细胞分泌IL-2蛋白。
- 郭丽裴秀丛张玉敏段志文马明月