国家自然科学基金(30440057)
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
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- 相关机构：北京大学深圳医院中南大学湘雅二医院北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省博士启动基金更多>>
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- 印迹基因Snrpn在人类卵母细胞及植入前胚胎mRNA表达被引量：3
- 2007年
- 目的了解印迹基因Snrpn在人类卵母细胞和植入前胚胎的表达,以分析Snrpn基因表达对人类卵母细胞和早期胚胎发育的影响。方法采用单细胞巢式逆转录多聚酶链式反应(Single Cell Nested RT-PCR)方法,检测人类卵子和植入前各个阶段胚胎的印迹基因Snrpn mRNA表达情况。结果Snrpn在人类卵母细胞GV、MI、MII和植入前胚胎2、4、6、8细胞期都有表达,单卵母细胞扩增成功率为87.5%,单个胚胎为75.8%,平均扩增成功率为79.1%。单个卵母细胞和单个卵裂球扩增成功率无显著性差异(P>0.05),但单卵母细胞较单个卵裂球高。结论建立了比较稳定、可靠的单细胞巢式RT-PCR技术检测基因表达。印迹基因Snrpn在人类卵细胞和植入前胚胎的表达对卵子生长和胚胎发育有着重要意义。
- 马玲李蓉卢丽华贺蓉郝桂琴林秋华
- 关键词：印迹基因
- 体外培养成人包皮成纤维细胞周期同步化效果检测
- 2009年
- 供体细胞和受体胞质周期协调性是核移植胚胎发育的关键,对人成体细胞的细胞周期分布及其同步化效果进行探讨,将为人治疗性克隆研究打下基础。结果发现:80%￣85%汇合生长成人包皮成纤维细胞G0/G1期细胞比例显著高于接种后第1天指数生长细胞及接种后第5天100%汇合生长细胞两组(67.0%vs58.2%,52.8%,P<0.05),指数生长状态下,仍有58.2%的成人包皮成纤维细胞处于G0/G1期;以0.2μg/ml和2μg/ml不同浓度阿菲迪霉素(aphidicolin,APD)处理成人包皮成纤维细胞24h,2μg/mlAPD组G0/G1期细胞比例显著高于0.2μg/ml组和对照组(10%FBS)(82.9%vs68.8%,63.5%,P<0.05),2μg/mlAPD可有效的将成人包皮成纤维细胞同步于G0/G1期,且培养液中添加10%、0.5%、0%FBS不同浓度血清对2μg/mlAPDG0/G1期同步化效果无显著影响(82.6%vs81.8%vs74.6%,P>0.05);以血清饥饿培养法(0.5%FBS)进行成人包皮成纤维细胞同步化处理,血清饥饿处理3d组G0/G1期细胞比例显著高于0d组(对照组)(71.8%vs59.6%,P<0.05),血清饥饿培养3d可有效将细胞同步于G0/G1期。因此,2μg/mlAPD处理24h和血清饥饿培养3d可有效将成人包皮成纤维细胞同步于G0/G1期。
- 韦精卫李蓉耿岚郝桂琴
- 关键词：体细胞核移植
- 人类卵母细胞及植入前胚胎中印迹基因Snrpn mRNA的表达被引量：2
- 2007年
- 马玲李蓉周亮钟凯
- 关键词：印迹基因人类卵母细胞植入前胚胎单细胞
- 印迹基因UBE3A在人类卵母细胞及植入前胚胎的mRNA表达被引量：1
- 2007年
- 目的 了解印迹基因泛素蛋白酶基因（UBE3A）在人类卵母细胞和植入前胚胎的表达状况。方法采用单细胞巢式RT-PCR,检测UBE3A在人类卵母细胞和植入前各个阶段胚胎中的mRNA表达。结果UBE3A在人类卵母细胞MⅠ、MⅡ和植入前胚胎2、4、6、8细胞期均有表达,单卵母细胞扩增成功率为83.3%,单个卵裂球细胞为72.3%,平均扩增成功率为77.9%。单个卵母细胞和单个卵裂球扩增成功率无显著性差别（P〉0.05）,但单卵母细胞较单个卵裂球高。结论UBE3A在人类卵细胞和植入前胚胎均有表达,有助于研究卵母细胞成熟及胚胎生长发育,为探讨印迹基因与辅助生殖及遗传性印迹疾病的关系提供理论依据。
- 马玲李蓉卢丽华郝桂琴贺蓉林秋华
- 关键词：卵母细胞胚泡基因组印迹
