国家自然科学基金(30110665)
- 作品数：6 被引量：25H指数：4
- 相关作者：孙颖浩邱镇顾正勤许传亮刘毅更多>>
- 相关机构：第二军医大学镇江市第一人民医院中国人民解放军更多>>
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- 多沙唑嗪对前列腺癌DU-145细胞生长的影响及机理研究被引量：4
- 2005年
- 目的 观察多沙唑嗪对激素非依赖性前列腺癌DU- 145细胞增殖与凋亡的影响并探讨其作用机理。 方法 DU -145细胞培养液中加入多沙唑嗪,使其终浓度分别为0. 1、1、10、25、100μmol/L,不加多沙唑嗪者为对照组。24、48、72、96h后分别检测各组癌细胞的吸光度A值,并计算细胞生长抑制率,取与对照组比较有显著性差异的最低浓度为多沙唑嗪最佳浓度,取有显著性差异的最短时间为最佳作用时间。分析25μmol/L多沙唑嗪作用48h后的细胞周期分布及早期凋亡率,观察细胞形态,检测凋亡相关因子及蛋白的表达。 结果 0. 1、1、10μmol/L组的A值与对照组相比差异无统计学意义; 25、100μmol/L组的A值与对照组相比差异有统计学意义(P<0. 01); 25μmol/L多沙唑嗪作用48h时即出现统计学差异。25μmol/L多沙唑嗪作用48h后,细胞周期分布情况与对照组相比差异无统计学意义;早期凋亡率为14. 31%,与对照组(1. 07% )相比差异有统计学意义;电镜观察显示部分细胞呈现典型的凋亡形态学改变;细胞转化生长因子β1 (TGF- β1 )呈阳性表达,Fas表达增强,bcl -2表达与对照组比较差异无统计学意义。 结论 多沙唑嗪可能通过Fas系统或直接激活TGF -β1 信号通路介导凋亡的发生,从而抑制激素非依赖性前列腺癌细胞生长。
- 孙颖浩刘毅王林辉顾正勤邱镇高旭
- 关键词：多沙唑嗪前列腺癌DU-145细胞生长
- α1肾上腺素受体拮抗剂对前列腺癌DU-145细胞生长的影响及机理研究被引量：2
- 2007年
- 目的对比观察三类a1肾上腺素受体拮抗剂对激素非依赖性前列腺癌DU-145细胞增殖与凋亡的影响，并探讨其作用机理。方法DU．145细胞培养液中加入不同浓度（0．1、1、10、25、100μmol／L）多沙唑嗪、特拉唑嗪、坦索罗辛、萘哌地尔，不加药物者为对照组，24、48、72、96h后行MTT法检测细胞生长抑制率；获得最佳浓度及最佳作用时间，在此条件下行流式细胞仪分析细胞周期分布及早期凋亡；透射电镜观察细胞形态；检测凋亡相关因子及蛋白表达。结果25、100μmol／L特拉唑嗪、多沙唑嗪作用48～96h，癌细胞生长抑制率为31．2％～82．5％，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。25μmol／L特拉唑嗪、多沙唑嗪作用48h，细胞周期分布情况与对照组相比无统计学意义，早期凋亡率分别为10．83％、14．31％，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）；部分细胞呈现凋亡特征性形态学改变；细胞转化生长因子-β1（TGF-β1）呈阳性表达，Fas表达增强，bcl-2表达与对照组比较差异无统计学意义。坦索罗辛、萘哌地尔没有类似作用。结论喹唑啉基α1肾上腺素受体拮抗剂可能通过Fas系统或直接激活TGF-β1信号通路介导凋亡的发生，从而抑制激素非依赖性前列腺癌细胞生长，临床上有望用于治疗进展期前列腺癌。
- 刘毅孙颖浩王林辉高旭李香铁张爱民郝俊文
- 关键词：前列腺肿瘤Α1肾上腺素受体多沙唑嗪特拉唑嗪
- 人p27^(kipl)可调控性重组腺病毒载体的构建及其在PC-3细胞中的表达
- 2003年
- 目的:体外构建人p27kipl可调控性重组腺病毒载体,并观察其在前列腺癌细胞系PC-3细胞中的表达及其对细胞生长的影响。方法:采用Ad-X Tet-Off表达系统,将人全长p27kipl cDNA经过穿梭载体,与可调控性腺病毒载体骨架连接,得到重组人p27kipl基因腺病毒(Ad-p27kipl),在HEK293细胞包装、扩增,获得高滴度病毒,采用空斑试验测定病毒滴度,体外转染PC-3细胞,RT-PCR、Western杂交分别检测目的基因不同水平的表达,并通过MTT法观察转染前后细胞增殖力的变化。Ad-X-TRE-β gal病毒作为对照。结果:构建的Ad-p27kipl病毒滴度为1.2×109 pfu/ml,RT-PCR、Western杂交检测有特异的高表达,转染后对细胞的生长有抑制作用。结论:体外连接法成功地构建携带人p27kipl基因的可调控性重组腺病毒载体,在人前列腺癌细胞系PC-3中有高表达并对细胞生长有抑制作用。
- 邱镇孙颖浩许传亮王元天沈茜钱松溪顾正勤李云Chinlee Wu
- 关键词：PC-3细胞前列腺癌细胞生长
- 联合PTEN和P27抑制前列腺癌侵袭和血管生成的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨联合PTEN和P27基因治疗对人前列腺癌PC-3细胞侵袭力和血管生成的影响。方法:构建携带人PTEN和P27基因的腺病毒载体(Ad-PTEN、Ad-P27),在HEK293细胞包装、扩增,空斑试验测定病毒滴度,体外转染PC-3细胞,RT-PCR、Western印迹检测目的基因的表达,利用Boyden侵袭小室法检测联合转染PTEN和P27对PC-3细胞侵袭力的改变,MTT法检测人脐静脉内皮细胞增殖的变化与鸡胚囊实验观察对血管生成的抑制作用。结果:病毒滴度Ad-PTEN为1.8×107pfu/ml、Ad-P27为1.2×109pfu/m,lRT-PCR、Western印迹检测在PC-3细胞中有PTEN和P27的特异高表达,PC-3细胞侵袭力受到明显抑制,联合转染PTEN和P27的PC-3细胞上清液对人脐静脉内皮细胞ECV-304的生长和鸡胚尿囊膜血管形成均有明显的抑制作用,PTEN+P27组与Ad-PTEN、Ad-P27组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:联合PTEN、P27基因治疗在抑制前列腺肿瘤细胞侵袭力和抑制血管生成等方面具有协同、增效的作用。
- 邱镇崔飞伦许传亮顾正勤孙颖浩
- 关键词：PTENP27血管生成
- 人抑癌基因PTEN对前列腺癌细胞系生物学行为的影响被引量：10
- 2004年
- 目的 探讨外源性人抑癌基因PTEN表达对前列腺癌细胞系LNCaP、DU 14 5细胞增殖和侵袭转移能力的影响。 方法 利用携带人PTEN基因的可调控性腺病毒 (Ad PTEN ) ,体外转染人前列腺癌细胞系LNCaP、DU 14 5,RT PCR、Westernblot检测目的基因不同水平的表达 ,通过细胞生长试验、流式细胞仪分析技术以及Boyden小室法检测LNCaP、DU 14 5转染前后细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞体外侵袭力的变化。 结果 转染Ad PTEN后LNCaP、DU 14 5细胞的PTEN表达由阴性转为阳性 ,转染后对LNCaP、DU 14 5细胞生长有抑制作用 ,阻滞于G0 ～G1期 ,早期细胞凋亡率增加 ,LNCaP细胞 (6.89± 0 .51) % ;DU14 5细胞 (5.44± 1.13 ) % ,与对照组相比差异有显著性 ,Boyden小室法检测转染后体外侵袭力受到明显抑制。 结论 重组腺病毒介导的人PTEN基因在体外对前列腺癌细胞系LNCaP、DU 14 5的细胞增殖和体外侵袭力有明显抑制作用 。
- 孙颖浩邱镇许传亮钱松溪王元天沈茜李云唐楠
- 关键词：抑癌基因PTEN前列腺癌生物学行为癌细胞系
- α_1肾上腺素受体拮抗剂对前列腺癌细胞生长的影响被引量：4
- 2005年
- 目的:对比研究三类α1肾上腺素受体拮抗剂对激素非依赖性前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响. 方法:不同浓度多沙唑嗪、特拉唑嗪、坦索罗辛、萘哌地尔加入PC-3细胞.MTT比色法检测细胞生长抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布及早期凋亡;透射电镜观察细胞形态. 结果:10～100 μmol/L特拉唑嗪、多沙唑嗪作用24～96 h,癌细胞生长抑制率为11.6%～82.5%(P＜0.05),25 μmol/L特拉唑嗪、多沙唑嗪作用48 h,细胞周期分布情况相似,部分细胞呈现凋亡特征性形态学改变,早期凋亡率分别为12.83%、18.61%(P＜0.01);坦索罗辛、萘哌地尔没有类似作用.结论:喹唑啉基α1肾上腺素受体拮抗剂通过诱导凋亡抑制激素非依赖性前列腺癌细胞生长,临床上有望用于治疗进展期前列腺癌.
- 刘毅孙颖浩王林辉顾正勤邱镇高旭
- 关键词：前列腺肿瘤Α1肾上腺素受体多沙唑嗪特拉唑嗪
