教育部留学回国人员科研启动基金(2007[1108])
- 作品数：9 被引量：18H指数：3
- 相关作者：屈慧鸽刘泽隆迟晓艳朱甫祥杨树德更多>>
- 相关机构：鲁东大学南京信息工程大学广西大学更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信建筑科学更多>>
- N-{1-[取代吡啶(噻唑)甲基]-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰基}-N′-(芳氧乙酰)肼的合成与生物活性被引量：5
- 2008年
- 采用2-氯-5-(氯甲基)吡啶和2-氯-5-(氯甲基)噻唑为原料,经过叠氮化、乙酰乙酸乙酯环化、水解、酰氯化,然后与芳氧乙酰肼的缩合反应,合成了9种目标化合物,其结构经1H NMR、IR、MS和元素分析测试技术确证,初步的生物活性测定结果表明,目标化合物在100 mg/L质量浓度下显示出良好的除草活性,但杀虫活性较弱。
- 严曼石德清王慧利
- 关键词：吡啶噻唑三唑生物活性
- TMD2前断裂CFTR翻译后的连接及氯离子通道功能被引量：1
- 2010年
- CFTR基因突变导致一种常染色体隐性遗传疾病——囊性纤维化(CF)。利用split Ssp DnaB intein的蛋白质反式剪接技术的真核细胞双载体转CFTR基因,旨在研究翻译后水平CFTR的连接,以及由其建立的氯离子通道功能。于CFTR膜内第2个跨膜结构域(TMD2)前的Glu838密码子后将其cDNA断裂为N端和C端两部分,与具有蛋白质反式剪接作用的split Ssp DnaB intein编码序列融合,分别插入到载体pEGFP-N1和pEYFP-N1,构建一对真核表达载体pEGFP-NInt和pEYFP-IntC。用脂质体将这对载体共转染至幼年仓鼠肾细胞(BHK),瞬时表达实验用Western blotting观察CFTR蛋白质的连接,并用膜片钳技术记录Cl-通道电流。结果显示,基因共转染细胞呈现完整的CFTR蛋白条带,膜片钳记录到全细胞Cl-电流和单个Cl-通道开放活性。结果表明split Ssp DnaB intein的蛋白质反式剪接技术可用于双载体共转移CFTR基因,为CF基因治疗应用双腺相关病毒载体(AAV)转运CFTR基因,克服AAV的容量限制提供了依据。
- 朱甫祥宫贤弟刘泽隆杨树德屈慧鸽迟晓艳
- 关键词：CFTRSPLITSSPDNABINTEIN蛋白质反式剪接
- A1区替换提高人BDD-FⅧ重链的分泌并缓解其与轻链共转基因细胞链分泌的不均衡性
- 2010年
- 双载体转凝血Ⅷ因子基因(FⅧ)可有效克服腺相关病毒(AAV)载体容量限制,但FⅧ重链分泌的低效性导致重、轻链分泌的不均衡。重链分泌的低效性源自其A1区存在与内质网蛋白质分子伴侣结合的位点。本文在我们最近运用蛋白质剪接的双载体共转B区缺失型FⅧ(BDD-FⅧ)重链和轻链基因研究的基础上,将重链的A1区替换为猪FⅧ的A1区,用融合蛋白内含子的重链和轻链转基因实验,定量分析了重链的分泌及其对共转重链和轻链基因细胞分泌剪接BDD-FⅧ蛋白和活性的影响。结果显示,变构体重链单独转基因时其分泌得到明显改善,达到89±12 ng/ml,明显高于人BDD-FⅧ重链的分泌(25±9 ng/ml);该变构体重链与轻链共转基因细胞分泌的剪接变构体BDD-FⅧ和活性分别为219±51 ng/ml和1.47±0.22 U/ml,明显高于剪接的人BDD-FⅧ的分泌量和活性(1 16±32 ng/ml和0.8±0.11 U/ml)。单独变构体重链和轻链转基因细胞合并培养后,其培养上清中检测到剪接的变构体BDD-FⅧ和活性,分别为38±7 ng/ml和0.22±0.05 U/ml,提示为不依赖细胞机制的蛋白质剪接所产生。结果表明,A1区替换后重链分泌的增强,可促进基于蛋白质剪接技术的双载体共转重链和轻链基因细胞分泌的剪接BDD-FⅧ水平和活性,并可缓解链分泌的不均衡性,为动物体内应用双AAV载体共转BDD-FⅧ重链和轻链基因研究奠定了实验基础。
- 朱甫祥刘泽隆缪静屈慧鸽迟晓艳
- 关键词：分泌蛋白内含子蛋白质剪接
- 型钢混凝土L形柱—混凝土梁节点的受力性能被引量：6
- 2011年
- 为了研究型钢混凝土(SRC)L形柱—混凝土梁框架节点的受力性能,设计了4个试件进行低周反复加载试验,揭示了其受力破坏机理;获取了节点受力全过程的荷载—位移滞回曲线和荷载—应变滞回曲线,分析了其变形能力和能量耗散能力。结果表明:反复荷载作用下SRC异形柱框架角节点的抗震性能良好,荷载—位移滞回曲线的滞回环饱满、对称,其抗震承载能力高,综合抗震指标明显优于钢筋混凝土异形柱框架角节点的。研究可为SRC异形柱框架角节点受力机理的分析和承载力计算方法的建立提供试验依据。
- 陈宗平王妮薛建阳胡秀杰
- 关键词：SRC异形柱角节点低周反复加载试验
- vWF-△Pro改善基于蛋白质剪接的双载体BDD-FⅧ基因转移被引量：6
- 2010年
- 多聚体von Willebrand因子(vWF)的功能之一是保护凝血Ⅷ因子(FⅧ)免受蛋白水解引起的快速清除.前肽缺失突变体vWF(vWF-ΔPro)不能形成多聚体,但可以结合FⅧ蛋白.为探讨vWF-ΔPro对基于蛋白质反式剪接作用介导的双载体转FⅧ基因后连接的FⅧ蛋白的分泌和活性的影响,将vWF-ΔPro基因和融合SspDnaB内含肽的B结构域缺失型FⅧ(BDD-FⅧ)断裂基因共转染293细胞进行转基因的瞬时表达,用Western印迹检测了单独转染vWF-ΔPro基因细胞的vWF-ΔPro表达量和蛋白形式,并检测了其对FⅧ的结合力;用ELISA法观察分泌至培养上清中的剪接的BDD-FⅧ,并用Coatest法检测由其产生的生物活性.结果显示,vWF-ΔPro转基因细胞呈现二聚体蛋白表达形式,其结合FⅧ的能力与转野生型vWF基因细胞相近;vWF-ΔPro共转染细胞上清中剪接BDD-FⅧ蛋白浓度为198±21ng/mL,活性为1.78±0.18IU/mL,明显高于未转染vWF-ΔPro基因的细胞对照(91±12ng/mL和1.05±0.13IU/mL),与共转染野生型vWF基因细胞对照相近(221±19ng/mL和1.95±0.22IU/mL),表明vWF-ΔPro可显著改善内含肽剪接的BDD-FⅧ蛋白的分泌和生物活性.为vWF-ΔPro转基因的基于蛋白质剪接技术双AAV载体转BDD-FⅧ基因动物体内实验提供了依据.
- 朱甫祥杨树德刘泽隆屈慧鸽迟晓艳
- 关键词：WILLEBRAND因子内含肽蛋白质反式剪接
- 人工影响天气燃烧炉应急系统设计
- 2009年
- 以"青海省三江源人工影响天气系统"开发为例,详细阐述了运用高级程序语言C#和组件W ebG IS技术及控件M a-pOb jects(MO)进行二次开发的人工影响天气燃烧炉应急系统的设计方法,充分体现了利用控件实现二次开发的优势和特点.
- 渠寒花葛春林杜景林周杰
- 关键词：WEBGIS技术
- 非理想功率控制和多用户检测在WCDMA高空平台通信系统中的联合应用
- 2008年
- 高空平台(HAPS)通信系统是近年来正处于先期研究的新型信息系统。理论分析了非理想功率控制和多用户检测(MUD)对HAPS通信系统上行链路的影响,分析这两种技术的工作原理,探讨在WCDMA应用中结合使用两种技术的可行性和方法。
- 潘文婵周杰张海燕
- 关键词：HAPS功率控制多用户检测
- 基于PIC的无线数据传输系统设计
- 2008年
- 本论文以PIC单片机为核心部件,设计和开发了一套无线数据传输系统。PIC单片机是一种用来开发的去控制外围设备的集成电路。基于PIC单片机的寻址方式简单,运行速度高,功耗低,驱动能力强,寻址空间设计简洁,外界电路简单,开发方便等优点,因此本设计使用PIC单片机为核心部件,在硬件方面,电路设计更为简洁、实用,既提高了整个设计的安全性和可靠性,又降低整个系统的功耗;在软件方面,程序的调试、模拟运行变得更为方便快捷。
- 王丽霞周杰
- 关键词：无线发射机无线接收机
- 蛋白反式剪接的人/猪嵌合体BDD-FVIII及其分泌的改善
- 2010年
- 本研究采用具有促分泌作用的猪FVIII分子的A1和A3区,替换人FVIII分子的相应结构,构建人/猪嵌合体BDD-FVIII(BDD-hpFVIII),利用Ssp DnaB intein的蛋白质反式剪接功能,双载体培养的COS-7细胞瞬时共转嵌合体BDD-hpFVIII基因。免疫印迹法观察了转基因细胞内的蛋白表达和BDD-hpFVIII的剪接,采用ELISA和Coatest法分别观察了分泌至培养上清液中剪接的嵌合体BDD-hpFVIII蛋白和生物活性。结果显示,基因共转染细胞内可见明显的剪接BDD-hpFVIII蛋白,分泌至上清液的剪接BDD-hpFVIII蛋白量为(340±64)ng·mL-1,活性为(2.52±0.32)u·mL-1,明显高于双载体共转人BDD-FVIII基因细胞[质量浓度为(93±22)ng·mL-1,活性为(0.72±0.13)u·mL-1],提示intein介导的双载体共转BDD-hpFVIII基因可明显促进剪接蛋白的分泌。另外,分别转intein融合BDD-hpFVIII重链和轻链基因的细胞混合培养后上清液中仍可检测到剪接的BDD-hpFVIII蛋白及其活性,分别为(44±9)ng·mL-1和(0.32±0.07)u·mL-1,提示intein可进行不依赖细胞机制的BDD-hpFVIII剪接。本研究为旨在提高分泌的动物体内应用intein的双载体转BDD-hpFVIII基因奠定了基础。
- 朱甫祥杨树德刘泽隆缪静屈慧鸽迟晓艳
- 关键词：分泌蛋白质反式剪接
